产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:瓜纳图巴病毒PCR检测试剂盒 英文名称:Guaratuba VirusRTPCR 编号:HE31039-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 铍试剂II/8-羟基萘-3,6-二磺酸(1-偶氮-2′)-1′,8′-二羟基萘-3′,6′-二磺酸四钠盐/H酸偶氮变色酸钠/2-(8-羟基萘-3,6-二磺酸钠偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸钠/Beryllon II 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 包装;1g 石墨粉/黑铅/笔铅/半石墨/不纯石墨/墨铅/炭精/石墨润滑剂/胶体石墨/导电敷层/Graphite powder 质量规格:>98.0%(T) 包装;500mg 人造沸石/交替砂/软砂/变通质/沸石/Permutit 质量规格:>92.0%(T) 包装;100mg 钠石灰/苏打石灰/碱石灰/苏打石灰混合物/钠钙玻璃/Soda lime 质量规格:>99.0%(GC) 包装;1g 海砂/石英玻璃/Sea sand 质量规格:>95.0%(HPLC)(T) 包装;25g 脂质体2000/Lipofectamine 2000 Transfection Reagent 质量规格:>98.0%(HPLC) 包装;5g 辛可宁/弱金鸡钠碱/4-喹啉基(5-乙烯基-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-基)甲醇/金鸡宁/辛可尼/Cinchonine 质量规格:>98.0%(HPLC) 包装;1g 罗丹宁/银试剂/罗丹酸/2-硫代-4-噻唑烷酮/绕丹宁/2-硫代-2,4-噻唑烷二酮/2-硫-4-氧四氢噻唑/Rhodanine 质量规格:>98.0%(GC)(T) 包装;25g N-甲基吩嗪甲基硫酸盐/N-甲基二苯并吡嗪甲基硫酸盐/吩嗪二甲酯硫酸盐/5-甲基吩嗪硫酸甲酯/吩嗪硫酸甲酯/甲硫吩嗪/硫酸甲酯吩嗪/PMS 质量规格:>98.0%(N)(T) 包装;5g 草酸二乙酯/乙二酸二乙酯/草酸乙酯/二乙基草酸/Diethyl oxalate 质量规格:>97.0%(GC) 包装;10g /精/粒/Iodine 质量规格:>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色谱标记 包装;50g 红色硫化汞/朱砂/银朱/硫化汞/硫化汞(II)/辰砂/丹砂/Chinese red 质量规格:>99.0%(GC) 包装;25g 三苯基氧化膦/三苯基氧膦/2-乙醇/三苯基磷氧/氧化三苯磷酸/氧化三苯膦/Triphenylphosphine oxide 质量规格:>98.0%(GC) 包装;5g 皂土/膨润土/浆土/胶状黏土/斑脱岩/胶膨润土/胶体粘土/胶质粘土/高钠膨润土/泥浆膨润土/班脱岩/Bentonite 质量规格:用于薄层色谱显色剂 包装;5g 漂白土粉/漂洗泥/Floridin 质量规格:>99.0%(GC) 包装;5g 碳化硼/Boron carbide 质量规格:99.8原子%D 包装;100g 三氧化二硼/氧化硼/硼酐/三氧化硼/硼酸酐/Boron oxide 质量规格:>98.0%(T) 包装;25g 瓜纳图巴病毒PCR检测试剂盒Anoxybacillus│flavithermus 中文名称:好热黄无氧芽孢菌种属:Anoxybacillus│flavithermus分离基物:样/上层海提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:微生物/高温菌(55℃)培养方法培养基:471生长条件:55℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Bacillus│halodurans 中文名称:耐盐芽胞杆菌种属:Bacillus│halodurans分离基物:样/表层温泉提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:微生物/高温菌(60℃)培养方法培养基:471生长条件:60℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Exiguobacterium│arabatum 中文名称:微小杆菌(加词待译)种属:Exiguobacterium│arabatum分离基物:样/表层海提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:深海细菌培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:>98.0%(GC) Microbacterium│sediminis 中文名称:沉积物微杆菌种属:Microbacterium│sediminis分离基物:沉积物/表层沉积物提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:;微生物/耐冷、耐热、耐盐微生物培养方法培养基:221生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:>98.0%(GC) Altererythrobacter│epoxidivorans 中文名称:食环氧化物交替赤细菌种属:Altererythrobacter│epoxidivorans分离基物:土样/生活区土样提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物质筛选;4.海洋微生物生态学研究。培养方法培养基:472生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:>98.0%(GC) Rhodococcus│qingshengii 中文名称:樊庆生红球菌种属:Rhodococcus│qingshengii分离基物:土样/生活区土样提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物质筛选;4.海洋微生物生态学研究。培养方法培养基:472生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Nocardioides│furvisabuli 中文名称:黑沙类诺卡氏菌种属:Nocardioides│furvisabuli分离基物:沉积物/表层沉积物提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物质筛选;4.海洋微生物生态学研究。培养方法培养基:472生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Arthrobacter│humicola 中文名称:居土节杆菌种属:Arthrobacter│humicola分离基物:沉积物/湖边沉积物提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物质筛选;4.海洋微生物生态学研究。培养方法培养基:472生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |