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溃蚀齿密螺旋体探针法荧光PCR检测试剂盒

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更新日期:
2020-12-03
点击次数:
433
产品特点:
溃蚀齿密螺旋体探针法荧光PCR检测试剂盒注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
  50次溃蚀齿密螺旋体探针法荧光PCR检测试剂盒的详细资料:

样品RNA的抽提:
产品仅用于科研取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1)紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。

 产品名称

溃蚀齿密螺旋体探针法荧光PCR检测试剂盒

 英文名称

 Treponema phagedenis

 货号

 YSP97285

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.产品仅用于科研所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。

荧光定量PCR试剂盒技术:
本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒,包括盒体,盒体由上盒体和下盒体组成,上盒体的底面上设有限位凸起,下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽,且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖,侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾,下盒体的上端边缘处设有环形凸起,两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上;凹槽的内部设有固定杆,固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架;下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分,并将两个部分通过侧盖连接,即可保证试剂盒的便携性,同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
细胞BAD蛋白表达比色法定量检测试剂盒 FSD1L ELISA Kit 100 ul

细胞BAD蛋白表达荧光定量检测试剂盒 FUT4 ELISA Kit 300 ul

BAD蛋白表达西方杂交分析试剂盒 FSCN3 ELISA Kit 100 ul

BAD蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 FSD2 ELISA Kit 100 ul

BAD蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 FTCD ELISA Kit 100 ul

细胞BAX蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 FOXS1 ELISA Kit 100 ul

载玻片细胞BAX蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 FRAG1 ELISA Kit 100 ul

冰冻切片组织BAX蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 FPG A Kit 100 ul

石蜡切片组织BAX蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 Frizzled 2 ELISA Kit 100 ul

载玻片细胞BAX蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 FREM1 ELISA Kit 100 ul

冰冻切片组织BAX蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 Frizzled 8 ELISA Kit 20 ul

石蜡切片组织BAX蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 FRS3 ELISA Kit 100 ul

细胞BAX蛋白表达比色法定量检测试剂盒 Frizzled 7 ELISA Kit 100 ul

细胞BAX蛋白表达荧光定量检测试剂盒 Frizzled 10 ELISA Kit 100 ul

BAX蛋白表达西方杂交分析试剂盒 Frizzled 9 ELISA Kit 20 ul

BAX蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 FRK ELISA Kit 100 ul
溃蚀齿密螺旋体探针法荧光PCR检测试剂盒甘肽受体3抗体ECF(Human eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit  鼠嗜酸粒细胞趋化因子20 ul

脑肠肽受体抗体EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit  内分泌腺来源的血管内皮生长因子150 ul

GRC5蛋白抗体CNTF(Human Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit  睫状神经营养因子600 ul

肠和大脑特定同源蛋白1抗体CD30(Human Clusr of differentiation 30) ELISA Kit  CD30分子200 ul

生长分化因子6抗体CXCR1(Human CXC-chemokine receptor 1) ELISA Kit  CXC趋化因子受体11 Kit

鸟嘌呤核苷酸交换因子GEFT抗体XCR1(Human XC-chemokine receptor 1) ELISA Kit  XC趋化因子受体1100 ul

胶浆成熟因子β抗体SLC/CCL21(Human secondary lymphoid-tissue chemokine) ELISA Kit  二级淋巴组织趋化因子200 ul

蛋白偶联受体56抗体E-Cad(Human E-Cadherin) ELISA Kit  E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白20 ul

肠和大脑特定同源蛋白2抗体BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit  脑源性神经营养因子300 ul

 

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