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牛肾盂肾炎棒杆菌PCR检测试剂盒说明书

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更新日期:
2020-11-05
点击次数:
320
产品特点:
牛肾盂肾炎棒杆菌PCR检测试剂盒说明书实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
  50T牛肾盂肾炎棒杆菌PCR检测试剂盒说明书的详细资料:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

 牛肾盂肾炎棒杆菌PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 Corynebacterium renalePCR

 货号

 HE30853-R

实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建


特点优势:
    1.   特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
    2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
    3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
γ-氨基丁酸/4-氨基丁酸/氨酪酸/氨酷酸/丁氨酸/GABA 质量规格:>95%,一合物 包装;25g

γ-L-谷氨酰-α-萘酰胺/γ-L-谷氨酰-1-萘酰胺/N-(γ-L-谷氨酰)-1-萘胺/L-谷氨酰-1-萘胺/γ-L-谷氨酰-α-萘胺/γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide 质量规格:>98.5% 包装;5g

γ-L-谷氨酰-β-萘酰胺/γ-L-谷氨酰-2-萘酰胺/N-(L-谷氨酰基)-β-萘胺/L-谷氨酰-2-萘胺/N-(L-谷氨酰基)-β-萘胺/γ-L-谷氨酰-β-萘酰胺/γ-L-Glutamyl-β-naphthylamide 质量规格:>98.5% 包装;1g

γ-L-谷氨酰对硝基一合物/L-谷氨酰基-4-硝基/L-γ-谷氨酰-对硝基/γ-L-谷氨酰基-4-硝基/GPNA/H-Glu-PNA 质量规格:>99% 包装;5g

γ-谷氨酰-3-羟基-4-硝基单胺盐/γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基单盐/L-Glutamic acid γ-(3-carboxy-4-nitroanilide) ammonium salt 质量规格:>99% 包装;500mg

氧化型谷胱甘肽/N-(N-L-γ-谷胺酰基-L-半胱胺酰基)甘氨酸-2,2-二硫化物/L-谷胱甘肽(氧化型)/氧化谷胱甘肽/GSSG 质量规格:>99% 包装;25g

还原型谷胱甘肽/L-还原型谷胱甘肽/5-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸/GSH 质量规格:>68% 包装;5g

磷酸组胺/组胺磷酸盐/二磷酸组织胺/二磷酸组胺/磷酸组织胺/组织胺二磷酸盐/Histamine diphospate 质量规格:>50% 包装;25g

组胺/2-咪唑基乙胺/组织胺/β-氨乙基咪唑/β-氨乙基甘噁啉/1H-咪唑-4-乙胺/Histamine 质量规格:>30% 包装;5g

组胺/组胺双盐酸盐/二盐酸组胺/二盐酸-1H-咪唑-4-乙胺/2-(4-咪唑基)乙胺/二盐酸-β-氨乙基甘恶啉/二盐酸组织胺/Histamine dihydrochloride 质量规格:>98% 包装;1g

L-肌肽/N-β-丙氨酰-L-组氨酸/β-氨基-L-丙酰组氨酸/L-肉缩氨基酸/L-肉缩酸/β-丙氨酰-L-组氨酸/L-Carnosine 质量规格:≥99%,BR 包装;250mg

L-多巴/3-羟基-L-酪氨酸/左旋多巴/L-β-(3,4-二羟基苯)丙氨酸/L-3-(3,4-二羟基苯)丙氨酸/左多巴/3-(3,4-二羟基苯)-L-丙氨酸/β-[3,4-二羟苯基]L-初油氨基酸/L-Dopa 质量规格:>99% 包装;100g

L-甲状腺素/O-(4-羟基-3,5-二苯基)-3,5-二-L-酪氨酸/3,5,3′,5′-四-L-甲状腺原氨酸/3-[4-(4-羟基-3,5-二苯氧基)-3,5-二苯基]-L-丙氨酸/2-甲状腺素/L-β-(3,5-二磺-4-羟基苯氧基)-3,5-二磺苯丙氨酸/左甲状腺素/T4 质量规格:>98% 包装;25g

L-甲状腺素钠/(2S)-2-氨基-3-[4-(4-羟基-3,5-二-苯氧基)-3,5-二苯基]丙酸钠/L-甲状腺胺钠/3,5,3′,5′-四甲状腺-L-原氨酸钠/左旋甲状腺素钠/L-腻,3',5'-四甲状腺氨酸钠/3',3,5',5-四甲腺原氨酸钠盐五合物/O-(4-羟基-3,5-二苯基)-3,5-二-L-酪氨酸单钠盐五合物/L-thyroxine sodium 质量规格:>99% 包装;5g

L-肾上腺素/副肾素/(R)-肾上腺素/副肾碱/1-(3,4-二羟基苯基)-2-甲氨基乙醇/3,4-二羟基-α-(甲氨基甲基)苄醇/肾上腺素/L(-)-Epinephrine 质量规格:>97% 包装;25g

L-去甲肾上腺素/去甲肾上腺素/(R)-4-(2-氨基-1-羟基乙基)-1,2-苯二酚/L-Noradrenaline 质量规格:>97%,USP 包装;5g

重组人甲状旁腺激素1-84/PTH1-84 质量规格:>97% 包装;10g
牛肾盂肾炎棒杆菌PCR检测试剂盒说明书Bacillus│simplex 中文名称:简单芽胞杆菌种属:Bacillus│simplex分离基物:土壤样品提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:97%,含0.1% hydroquinone稳定剂

Comamonas│sp. 中文名称:丛毛单胞菌种属:Comamonas│sp.分离基物:堆肥提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:在无机盐培养基:中添加100ppm的DEHP,经过紫外扫描能降解形成代谢中间产物但不能开环。培养方法培养基:33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:97%,含0.1% hydroquinone稳定剂

Microbacterium│lacticum 中文名称:乳微杆菌种属:Microbacterium│lacticum分离基物:提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:在无机盐培养基:中降解100ppm对邻苯二酚,降解率为80~90%培养方法培养基:33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:97%,含0.1% hydroquinone稳定剂

Achromobacter│insolitus 中文名称:罕见无色小杆菌种属:Achromobacter│insolitus分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:在无机盐培养基:中以10mg/L的联苯为碳源培养,24h内对10mg/L的联苯降解率99.5%;24h内对5ppm萘和菲降解率大于95%培养方法培养基:2生长条件:28℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:97%,含0.1%对叔丁基邻苯二酚(TBC)稳定剂

Virgibacillus│marismortui 中文名称:死海枝芽孢杆菌种属:Virgibacillus│marismortui分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:耐受10%的NaCl培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:97%,含0.1%对叔丁基邻苯二酚(TBC)稳定剂

Staphylococcus│sciuri 中文名称:松鼠葡萄球菌种属:Staphylococcus│sciuri分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:耐受10%的NaCl培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:97%

Halobacillus│trueperi 中文名称:特氏盐芽孢杆菌种属:Halobacillus│trueperi分离基物:酸菜卤汁提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:在10%NaCl培养基:上能够生长。培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:>98.0%(GC)

Sphingomonas│xenophaga 中文名称:食异源物鞘氨醇菌种属:Sphingomonas│xenophaga分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:能于30℃、48小时内降解浓度为100ppm的菲,降解率为90%,菲为碳源(无机盐培养基:)培养方法培养基:33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:>98.0%(GC)

 

产品相关关键字: 牛肾盂肾炎棒杆菌 PCR检测试剂盒 50T
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