产品名称:幼禽螺杆菌PCR检测试剂盒 英文名称:Helicobacter pullorumPCR 编号:HE31067-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 N-氨乙基/氨乙基/氨基乙基对二氮己环/2-(1-基)乙胺/1-2-氨乙基/氮乙基/N-氨基乙基/氨基乙基/AEP 包装;100g 2-羟乙基/乙醇/1-(β羟乙基)/2-(1-基)乙醇/N-(2-羟乙基)/N-羟乙基/基乙醇/1-Piperazineethanol 包装;25g 尿酸钠/尿酸二氢钠/Uric acid sodium salt 包装;1g 2,3-二甲基马来酸/二甲基马来酸酐/2,3-二甲基马来酸酐/二甲基顺二酸酐/2,3-Dimethylmaleic anhydride 包装;5g 1,8-环氧对孟烷/1,3,3-*基-2-氧杂双环[2.2.2]辛烷/欧卡那卜托/桉树脑/桉叶油醇/1,3,3-*基-2-氧杂二环[2.2.2]辛烷/1,8-桉树脑/Cineole 包装;1g 乙二醇单甲醚/2-甲氧基乙醇/乙二醇甲醚/甲基溶纤剂/甲氧基乙醇/羟乙基甲基醚/乙二醇独甲醚/2-Methoxyethanol 包装;25g 2,4-二羟基-6-甲基苯甲酸/2,4-二羟-6-甲基苯甲酸/邻地衣酸/苔色酸/2,4-Dihydroxy-6-methylbenzoic acid 包装;5g DL-丙交酯/3,6-二甲基-1,4-二氧杂环己烷-2,5-二酮/丙交酯/内消旋乳酸/DL-Lactide 包装;25g L-丙交酯/左旋乳酸/L-交酯/(3S,6S)-3,6-二甲基-1,4-二氧杂环己烷-2,5-二酮/L-Lactide 包装;5g 吗啡啉/1,4-氧氮杂环已烷/四氢-1,4-噁嗪/四氢-1,4-恶嗪/1,4-氧氮六环/吗啉/吗福林/四氢化嗪/对氧氮六环/对氧氮苯烷/对氧氮己环/四氢化噁嗪/二亚乙基草酰亚胺/ Morpholine 包装;1g N,N-二乙基羟胺/二乙基羟胺/N,N-二乙基羟基胺/二乙氢胺/二乙胲/二乙羟胺/DEHA 包装;25g 萘黄酮/β-萘黄酮/5,6-苯并黄酮/β-萘基黄酮/β-Naphthoflavone 包装;5g 苯甲酰基二羰基/ (N5-2,4-环戊二烯-1-基)铁/二羰基环戊二烯基铁二聚物/双(二羰基环戊二烯铁)/环戊二烯基二二聚体/苯甲酰基二羰基(N5-2,4-环戊二烯-1-基)铁/Bis(cyclopentadienyl)tetracarbonyl Diiron 包装;100g 5-氮胞苷/5-氮杂胞嘧啶核苷/5-氮杂胞苷/阿托胞苷/阿扎胞苷/氮胞苷/氮杂胞苷/5-Azacytidine 包装;25g 邻甲基对苯二胺硫酸盐/甲苯二胺硫酸盐/甲苯-2,5-二胺硫酸盐/硫酸-2,5-二氨基甲苯/2,5-二氨基甲苯硫酸盐/2-甲基-1,4-苯二胺硫酸盐/硫酸对甲苯二胺/硫酸二甲基-1,4-苯二胺/2,5-Diaminotoluene sulfate 包装;5g 聚氧乙烯双胺/聚乙烯二胺/聚氧乙烯二胺/聚乙二醇二胺/PEG-diamine 包装;25g 2-(4-氯苯氧基)-2-甲基丙酸/4-氯苯氧异丁酸/对氯苯氧异丁酸/2-(4-氯苯氧)异丁酸/4-氯苯氧基-α-甲基丙酸/2-甲基-2-(对氯苯氧基)丙酸/2-(4-氯苯氧基)异丁酸/氯贝酸/Clofibric acid 包装;1g 幼禽螺杆菌PCR检测试剂盒Nesterenkonia│alba 中文名称:白色涅斯特连科氏菌种属:Nesterenkonia│alba分离基物:其他/黑浆处理系统(the black liquor treatment system)提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:28-30存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Brachybacterium│squillarum 中文名称:虾小短杆菌种属:Brachybacterium│squillarum分离基物:其他/盐发酵的小虾食品提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:28-30存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Brachybacterium│muris 中文名称:小鼠小短杆菌种属:Brachybacterium│muris分离基物:生物样/老鼠的肝脏提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:28-30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Corynebacterium│casei 中文名称:奶酪棒杆菌种属:Corynebacterium│casei分离基物:沉积物/TVG沉积物提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:海洋放线菌培养方法培养基:471生长条件:28℃-30&存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Saccharopolyspora│endophytica 中文名称:植物内生糖多孢菌种属:Saccharopolyspora│endophytica分离基物:沉积物/TVG沉积物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:海洋放线菌培养方法培养基:471生长条件:28℃-30&存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Marinobacter│adhaerens 中文名称:黏着海杆菌种属:Marinobacter│adhaerens分离基物:沉积物/TVG沉积物提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:海洋细菌培养方法培养基:471生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Arthrobacter│subterraneus 中文名称:地下节杆菌种属:Arthrobacter│subterraneus分离基物:沉积物/TVG沉积物提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:海洋放线菌培养方法培养基:471生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Microcella│sp. 中文名称:小细胞菌种属:Microcella│sp.分离基物:沉积物/电视多管采样提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:海洋放线菌培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥97% (HPLC) |