实验外包: 1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析 2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq 3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA 6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选 7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR 8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建 服务流程: 接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。 产品名称 | 丹毒丝菌属通用PCR检测试剂盒说明书 | 英文名称 | Erysipelothrix sppPCR | 货号 | HE30969-R |
使用方法: 一、样品 DNA 的制备 用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。 二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。 1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。 2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。 3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。 4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。 5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。 6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。 8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。 PCR实验方法步骤: 方法 1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 特点优势: 1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。 2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。 3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。 4. 实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。 5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。 N-羟乙基乙二胺-N,N′,N′-三乙酸三钠/氨乙基乙醇胺三乙酸三钠/N-羟乙基乙二胺三乙酸三钠/N-(2-羟乙基)乙二胺三乙酸三钠/N-(2-羟乙基)乙二胺-N,N',N'-三乙酸三钠/羟乙基乙烯二胺三乙酸三钠/N-二-羟乙基-亚乙基二胺三乙酸三钠/N-[2-[双(羧甲基)氨基]乙基]-N-(2-羟乙基)-甘氨酸三钠盐/HEDTA-Na3 质量规格:>95.0%(GC) 包装;100g 乙二胺四乙酸二钠盐/四乙酸二氨基乙烯二钠盐/托立龙B/氨羧络合剂III/螯合剂III/络合酮II/ EDTA二钠/N,N’-1,2-乙二基双(N-羧基甲基)氨基乙酸二钠盐二合物/络合剂EDTA二钠/氨羧络合亮剂Ⅲ/EDTA-2Na 质量规格:>98.0%(GC) 包装;25g 乙二胺四乙酸二钠钙盐/乙二胺四乙酸钙二钠/EDTA二钠钙/依地酸钙二钠二合物/依地酸钠钙/EDTA 钙钠盐/EDTA-2NaCa 质量规格:>98.0%(GC) 包装;500g 乙二胺四乙酸二钠锰盐/乙二胺四乙酸锰二钠/EDTA二钠锰/EDTA锰二钠/EDTA锰钠盐/Ethylenediaminetetraacetic acid manganese disodium salt hydrate 质量规格:>98.0%(GC) 包装;5g 乙二胺四乙酸二钠锌盐/乙二胺四乙酸锌二钠/EDTA二钠锌/Disodium zinc ethylenediaminetetraacetate tetrahydrate 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 包装;1g 乙二胺四乙酸二钠铜盐/乙二胺四乙酸铜二钠/EDTA二钠铜/乙二胺基四乙酸铜二钠盐/Ethylenediaminetetraacetic acid copper(II) disodium salt 质量规格:>98.0%(T) 包装;250mg 乙二胺四乙酸四钠盐/EDTA四钠盐/EDTA tetrasodium salt 质量规格:>98.0%(GC)(T) 包装;50mg 乙二胺四乙酸二钾盐/乙二胺四乙酸钾/EDTA二钾盐二合物/EDTA-2K 质量规格:>98.0%(T) 包装;25g 乙二胺四乙酸三钾盐/EDTA三钾盐二合物/EDTA-三钾/EDTA-3K 质量规格:>95.0%(GC) 包装;5g 脂磷壁酸/Lipoteichoic acid 质量规格:>98.0%(GC) 包装;25g 2-硫代巴比妥酸/4,6-二羟基-2-巯基嘧啶/丙二酰硫脲/2-硫代巴比土酸/4,6-二氧-2-巯基嘧啶/二氢-2-硫代-4,6(1H,5H)-嘧啶二酮/丙二烯缩硫脲/TBA 质量规格:>98.0%(GC) 包装;5g 三/三氟醋酸/过/全氟醋酸/TFA 质量规格:>96.0%(GC) 包装;25g 三/三氯醋酸/TCA 质量规格:>95.0%(GC) 包装;5g 棕榈酸/软脂酸/十六酸/鲸蜡酸/正十六烷酸/鲸乙酸/十六烷酸/Palmitic acid 质量规格:>97.0%(GC) 包装;1g 柠檬酸/枸橼酸/2-羟基丙羧酸/Citric acid 质量规格:>98.0%(GC) 包装;250mg 无柠檬酸/枸橼酸/2-羟基丙羧酸/Citric acid 质量规格:>98.0%(GC)(T) 包装;5g α-酮戊二酸/2-酮戊二酸/2-氧代戊二酸/α-酮基戊二酸/2-氧代-1,5戊二酸/α-羰基戊二酸/2-氧代-1,5戊二酸/α-胶酮酸/α-Ketoglutaric acid 质量规格:>97.0%(GC)(T) 包装;100g 丹毒丝菌属通用PCR检测试剂盒说明书Trichosporon asahii 中文名称:阿萨斯丝孢酵母种属:Trichosporon asahii提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:YM 培养基:酵母提取物,3.0 g 麦芽提取物,3.0 g 葡萄糖,10.0 g 蛋白栋,5.0 g 琼脂,20.0 g 蒸馏1000 ml ,pH 6.2 +/- 0.2生长条件:25℃,好氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Mucor flavus 中文名称:黄色毛霉种属:Mucor flavus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:type of M. sciurinus培养方法培养基:综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。生长条件:25℃,好氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥97% (HPLC) Penicillium brasilianum 中文名称:巴西青霉种属:Penicillium brasilianum提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:综合PDA:20%马铃薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,琼脂 15g,pH 自然。生长条件:25-28℃,好氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥97% (HPLC) Streptomyces│fungicidicus 中文名称:杀真菌素链霉菌种属:Streptomyces│fungicidicus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:Type strain; Produces fungicidin培养方法培养基:38生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:试剂级 Pseudomonas│putida 中文名称:恶臭假单孢菌种属:Pseudomonas│putida提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:用于微生物驱油及含油污处理培养方法培养基:33生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:≥99% Lactobacillus│delbrueckii subsp.bulgaricus 中文名称:德式乳杆菌保加利亚亚种种属:Lactobacillus│delbrueckii subsp.bulgaricus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes培养方法培养基:6生长条件:37℃存储条件:定期移植法 纯度:≥99% Bosea│massiliensis 中文名称:马赛博斯氏菌种属:Bosea│massiliensis分离基物:土壤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:848生长条件:18℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98% Paenibacillus│pabuli 中文名称:饲料类芽孢杆菌种属:Paenibacillus│pabuli分离基物:绿色或发酵的饲料提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes培养方法培养基:533生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98% |