产品名称:乙型肝炎病毒型PCR检测试剂盒 英文名称:Hepatitis B Virus(HBV)APCR 编号:HE31071-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 邻苯二甲酸二苯酯/2,2-二苯基-1-苦味基肼自由基/1,2-苯二甲酸二苯酯/苯二甲酸苯酯/邻酞酸二苯酯/Diphenyl phthalate 包装;25g 三栀子甙甲酯/山栀苷甲酯/山栀甙甲酯/Shanzhisize methyl ester 包装;5g 三酐/三氟醋酸酐/三氟乙酐/三氟醋酐/TFAH/TFAA 包装;1g 亚磷酸三乙酯/三乙基亚磷酸酯/三乙氧基膦/Triethyl phosphite 包装;5g 甘氨酸-脯氨酸-7-氨基-4-三氟甲基/Gly-Pro-AMC 包装;100g 3,5-二甲苯酚/3,5-二甲酚/3,5-二甲基苯酚/1-羟基-3,5-二甲基苯/1,3,5-二甲苯酚/1,3-二甲苯-5-酚/1,3-二甲基-5-羟基苯/3,5-二甲苯-1-酚/3,5-Dimethylphenol 包装;25g 间乙酮/3-乙酮/1-(3-基)乙酮/间硝基乙酰苯/3-硝基乙酰苯/3′-Nitroacetophenone 包装;250ml 3-氨基苯硼酸/间氨基苯硼酸/3-氨基苯基硼酸/3-Aminobenzeneboronic acid 包装;100g 4-乙烯基苯硼酸/4-苯乙烯硼酸/4-乙烯基苯基硼酸/4-Vinylphenylboronic acid 包装;25g 哒螨灵/2-叔丁基-5-(4-叔丁苄基硫)代-4-氯-3(二氢)哒嗪酮/2-特丁基-5-(4-特丁苄基)硫代-4-氯-3(2氢)-哒嗪酮/达螨尽/灭特灵/牵牛星/速螨酮/2-特丁基-5-(4-特丁基苄硫基)-4-氯-2H-哒嗪-3-酮/哒螨酮/Pyridaben 包装;1g 吡虫灵/脒蚜胺/1-(6-氯-3-吡啶基甲基)-N-硝基亚咪唑烷-2-基胺/吡虫啉/扑虱蚜乳油/Imidacloprid 包装;100g 福美双/ N,N’-四甲基二硫双硫羰胺/促进剂T/促进剂TMTD/促进剂TMTD-II/促进剂TT/二硫化双(硫羰基二)/二硫化四甲基秋兰姆/秋兰姆/TMTD 包装;25g 环氧大豆油/环氧豆油/环氧化酸豆油酯/环氧化大豆油/环氧大豆油酸-2-甲基己酯/ESBO 包装;500g 对甲苯亚磺酸钠/对甲苯磺酸钠盐/SPTS 包装;100g 氯化花青素/花青素/花色素/元/定/矢车菊素CY/矢车菊素/氯化矢车菊素/Cyanidin chloride 包装;25g 六氟磷酸钾/六氟代磷酸钾盐/Potassium hexafluorophosphate 包装;100g 甘氨胆酸/3α,7α,12α-三羟基-5β-胆甾烷-24-羧酸-24-甘氨酰胺/N-[(3α,5β,7α,12α)-3,7,12-三羟基-24-氧代胆甾烷-24-基]甘氨酸/甘胆酸/N-(3,7,12-三羟基-24-羰基胆烷-24-基)-甘氨酸/甘胆酸合物/甘氨石胆酸/Glycocholic acid hydrate 包装;25g 乙型肝炎病毒型PCR检测试剂盒Streptomyces│malachiticus 中文名称:孔雀石绿链霉菌种属:Streptomyces│malachiticus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:331生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97% Streptomyces│hygroscopicus var. violaceus 中文名称:吸链霉菌紫色变种种属:Streptomyces│hygroscopicus var. violaceus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:12生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Streptomyces│hygroscopicus 中文名称:刺孢吸链霉菌种属:Streptomyces│hygroscopicus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:12生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:95% Streptomyces│flavorectus 中文名称:黄直丝链霉菌种属:Streptomyces│flavorectus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:Type strain;对产朊酵母和稻瘟菌有溶菌作用培养方法培养基:12生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Streptomyces│coelicolor 中文名称:天蓝色链霉菌种属:Streptomyces│coelicolor提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:12生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Streptomyces│albogriseolus 中文名称:白浅灰链霉菌种属:Streptomyces│albogriseolus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:Type strain; Produces neomycin complex培养方法培养基:11生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Penicillium ochrochloron 中文名称:赭绿青霉种属:Penicillium ochrochloron提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25-28℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Aspergillus ustus 中文名称:焦曲霉种属:Aspergillus ustus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:综合PDA:20%马铃薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,琼脂 15g,pH 自然。生长条件:25-28℃,好氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% |