特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！ 产品名称 | 安氏网尾线虫探针法荧光PCR检测试剂盒 | 英文名称 | Dictyocaulus arnfieldi | 货号 | YSP96622 |
荧光染料的优点：
产品仅用于科研使用简便；
可以与任何PCR产物结合；
价格便宜；
荧光染料的缺点：
不能区分不同的双链DNA
引物二聚体会影响检测的敏感性
非特异性产物会影响结果的敏感性
引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别，进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。总的来说，SYBR Green I方法是一种基础也的Real-time qPCR实验手段。
荧光探针：
Real-e qPCR中的荧光探针为TaqMan探针，其基本原理是依据目的基因设计合成一个能够与之特异性杂交的探针，该探针的5'端标记荧光基团，3'端标记淬灭基团。
正常情况下两个基团的空间距离很近，荧光基因因淬灭而不能发出荧光。PCR扩增时，引物与该探针同时结合到模板上，探针的结合位置位于上下游引物之间。
当扩增延伸到探针结合的位置时，Taq酶利用5'外切酶活性，将探针5'端连接的荧光分子从探针上切割下来，从而使其发出荧光。检测到的荧光分子数与PCR产物的数量成正比，因此，根据PCR反应体系中的荧光强度即可计算出初始DNA模板的数量。
TaqMan探针技术解决了荧光染料与非特异性扩增结合的问题，反应结束后无需通过熔解曲线检测，缩短了实验时间。
TaqMan探针技术的优点：
荧光背景低；
敏感性高；
杂交稳定性高；
荧光光谱分辨率好；
特异性高。
TaqMan探针技术的缺点：
成本高；
设计难度大；
只能用于检测产物长度低于150bp的反应。
由于TaqMan探针的高特异性，可用于等位基因的辨别，特别适用于人类基因多态性以及根据SNP区别和定量菌株。
PCR技术的定量原理：
扩增曲线
在Real- qPCR中，对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号，随着反应的进行，监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线，即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。
在Real-time qPCR扩增早期，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化，此时即为基线期。
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的，随着反应循环数的增加，终PCR反应不再以指数形式生成模板，从而进入“平台期”。在该时期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系，所以根据终的PCR产物量不能计算出初始模板量。
荧光定量PCR原理：
产品仅用于科研荧光定量PCR早称TaqMan PCR，后来也叫Real-Time PCR，是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理：随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。
一般而言，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段，荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化。而在平台期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系，根据终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段， PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便，在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念：荧光阈值和 CT值。
EHDAB；十六烷基二甲基乙基溴化铵eIF4B Antibody2-氯-氟吡啶 十二烷基二甲基乙基溴化铵eIF4B Antibody三氟磺酸酮 十四烷基二甲基苄基氯化铵Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (redFluor™ 710 Conjuga)甲氧基-5-三氟 HDBAC；十六烷基二甲基苄基氯化铵Malic Enzyme 2 (E1N3F) XP® Rabbit mAb三氟甲 十烷基*基氯化铵Grp75 (D13H4) XP® Rabbit mAb三基乙酸叔丁酯 辛基*基氯化铵;八烷基*基氯化铵Grp75 (D13H4) XP® Rabbit mAb氟-羟基甲酸 2-溴乙基*基溴化铵Calmodulin (D1F7J) Rabbit mAb对氟 溴基*基溴化铵(BPTAB)eIF2B-ε Antibody2-氯-6-并噻唑 十二烷基二甲基苄基氯化铵Phospho-eIF2α (Ser51) (119A11) Rabbit mAb2-溴-氟磺酰氯 DDAB；双十烷基二甲基溴化铵Phospho-eIF2α (Ser51) (119A11) Rabbit mAb溴-氟磺酰氯 双十二烷基二甲基溴化铵FLI1 (D7N5M) Rabbit mAb(1R,2R)-1,2-二基乙二 L-赖氨酸DNMT3A (D23G1) Rabbit mAb2-亚甲基-1, L-赖氨酸SimpleChIP® Human NRIP1 Upstream Primers氨酰基酸 L-色氨酸EpCAM Antibody4,6-二甲基-2-甲磺酰基嘧啶 L-色氨酸(标准品)Phospho-BLNK (Tyr96) AntibodyH-HIS(TRT)-OH L-丝氨酸Phospho-BLNK (Tyr96) Antibody(5-甲基异恶唑-基)甲 L-丝氨酸(标准品)Cdc7 Antibody4,二氟乙酰乙酸乙酯 L-精氨酸(标准品）CDC37 (V367) Antibody2-氟-5-三氟酸
安氏网尾线虫探针法荧光PCR检测试剂盒干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒SIAH2 泛素连接酶Siah2100 ul 干扰素诱导蛋白11(IP-11/CXCL11)ELISA试剂盒SIP1 运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗体100 ul 干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒SIRT1 沉默调节蛋白1抗体100µg 钙卫蛋白(CALP)ELISA试剂盒Phospho-SirT1 (Ser27) 酸化沉默调节蛋白1抗体100 ul 钙网蛋白(CRT)ELISA试剂盒Phospho-SirT1 (Ser47) 酸化沉默调节蛋白1抗体300 ul 钙腔蛋白(CALU)ELISA试剂盒Skp2 细胞S相激酶相关蛋白抗体100 ul 钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒SLC4A4 碳酸氢钠协同转运蛋白4-A4抗体20 ul 钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)ELISA试剂盒Slc4a7/Nbcn1 碳酸氢钠协同转运蛋白4-A7抗体100 ul 钙非依赖型脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒NGALR/Slc22A17 可溶性载质转运蛋白22A17抗体20 ul |
