产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:鸭源鸡杆菌PCR检测试剂盒说明书 英文名称:Gallibacterium anatisPCR 编号:HE31017-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 草酸钾/乙二酸钾/草酸二钾一合物/Potassium oxalate monohydrate 质量规格:100mg/L,基体: 5%HNO3 包装;1g 硬脂酸钾/十八酸钾/Potassium stearate 质量规格:1000μg/ml,基体:1.0 mol/L HNO3 包装;5g 四草酸钾/四乙二酸钾/草酸三氢钾/二草酸三氢钾/三氢二草酸钾二合物/Potassium tetraoxalate dihydrate 质量规格:100µg/mL,基体:1%HNO3 包装;1g 草酸钛钾/乙二酸钛钾/双草酸氧化钛(IV)酸钾二合物/Potassium titanyl oxalate dihydrate 质量规格:1000μg/ml 包装;25g 四苯硼钾/四苯硼化钾/四苯基硼酸钾/Potassium tetraphenylborate 质量规格:1000μg/ml,溶剂: 包装;5g 氯铂酸钾/氯化铂钾/氯铂(IV)酸钾/氯高铂化钾/六氯铂酸钾/(OC-6-11)六氟合铂酸(2-)钾/六氯铂(IV)酸钾/六氯铂钾/(OC-6-11)六氟合铂酸钾/Potassium platinic chloride 质量规格:1000μg/ml,基体:1.0 mol/L HNO3 包装;100g 氯亚铂酸钾/氯亚铂酸钾/氯化亚铂钾/四氯亚铂酸钾/四氯铂酸钾/氯亚铂化钾/四氯铂(II)酸钾/Potassium chloroplatinite 质量规格:100.0μg/g,基体: 0.5mol/L的HCl溶液 包装;500g 溴酸钾/Potassium bromate 质量规格:1000μg/ml,基质:2.0mol/L盐酸 包装;100mg 亚碲酸钾/碲(IV)酸钾/亚蒂酸钾/Potassium lurite 质量规格:500mg/L,溶剂:1%硝酸 包装;20mg /四氢硼钾/钾硼氢/钾氢化硼/氢硼化钾/四氢硼酸(1-)钾/Potassium borohydride 质量规格:100µg/mL,基体:1%HCl 包装;100g 丁二酮肟/二甲基乙酰肟/丁二酮二肟/二乙二肟/丁二肟/双乙酮肟/镍试剂/二乙酰二肟/二甲基乙二醛肟/二甲基乙二肟/2,3-丁二酮二肟/Dimethylglyoxime 质量规格:1000µg/mL,基体:10%HCl 包装;25g 二乙酰一肟/2,3-丁二酮一肟/联乙酰一肟/双乙酰一肟/甲基肟乙/丁二酮单肟/2,3-丁二酮肟/2,3-丁烷二酮一肟/肟乙/丁二酮一肟/二甲基乙二酰一肟/Diacetyl monoxime 质量规格:1000μg/ml,基体:0.1mol/LNaOH 包装;1g 肟/β-异亚硝基丙烷/二甲基酮肟/2-肟/Acetoxime 质量规格:1000μg/ml 包装;25g 环戊酮肟/Cyclopentanone oxime 质量规格:1000μg/ml 包装;5g 杨醛肟/邻羟基肟/2-羟基肟/柳醛肟/Salicylaldoxime 质量规格:1000µg/mL,基体:10%HCl 包装;1g 8-羟基喹啉/8-氢氧化喹啉/8-羟基氮(杂)萘/邻羟基氮(杂)萘/8-羟基氮萘/喔星/8-羟基氮杂萘/喹啉醇/8-Hydroxyquinoline 质量规格:1000μg/ml,溶剂:0.5mol/L HNO3 包装;1g 2,9-二甲基-1,10-菲罗啉/2,9-二甲基邻菲啰啉/新铜试剂/2,9-二甲基-1,10-邻菲罗啉/2,9-二甲基-1,10-邻菲洛啉/Neocuproine 质量规格:1000μg/ml in 10% HCl 包装;25g 鸭源鸡杆菌PCR检测试剂盒说明书Pichia│onychis 中文名称:指甲毕赤酵母种属:Pichia│onychis分离基物:生物样/石鲽鱼 胃提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:共生微生物/鱼类共生菌培养方法培养基:513生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法 纯度:99% Candida│zeylanoides 中文名称:涎沫假丝酵母种属:Candida│zeylanoides分离基物:生物样/狼鱼 肠提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:共生微生物/鱼类共生菌培养方法培养基:513生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法 纯度:99% Candida│inconspicua 中文名称:平常假丝酵母种属:Candida│inconspicua分离基物:生物样/海藻提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:共生微生物/藻类共生菌培养方法培养基:513生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法 纯度:99% Filobasidium│uniguttulatum 中文名称:线黑粉菌种属:Filobasidium│uniguttulatum分离基物:生物样/蜈蚣藻提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:共生微生物/藻类共生菌培养方法培养基:513生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法 纯度:95% Hanseniaspora│uvarum 中文名称:葡萄有孢汉逊酵母种属:Hanseniaspora│uvarum分离基物:生物样/海藻提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:生物转化微生物/蛋白含量高培养方法培养基:513生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法 纯度:95% Pichia│sp. 中文名称:毕赤酵母种属:Pichia│sp.分离基物:样/表层海提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:潜在的有机污染物降解菌/分离自石油富集菌群培养方法培养基:821生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥97%, ee 98% Candida│viswanathii 中文名称:维斯假丝酵母种属:Candida│viswanathii分离基物:样/海提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:降解柴油及原油培养方法培养基:472生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥97%, ee 98% Kocuria│sp. 中文名称:考克氏菌种属:Kocuria│sp.分离基物:沉积物/箱式沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:产酶微生物/产淀粉酶、过氧化氢酶;未检测到果胶酶、酪蛋白酶、纤维素酶、琼脂酶培养方法培养基:471生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |