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侵肺巴斯德菌PCR检测试剂盒

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更新日期:
2024-08-28
点击次数:
872
产品特点:
侵肺巴斯德菌PCR检测试剂盒实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
  50T侵肺巴斯德菌PCR检测试剂盒的详细资料:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

侵肺巴斯德菌PCR检测试剂盒

 英文名称

 Pasteurella pneunotropicaPCR

 货号

 HE31355-R

实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建


特点优势:
    1.   特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
    2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
    3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
4×蛋白上样缓冲液(含DTT)  10ml 英文名称 SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT)储存条件 建议分装冻存,避免反复冻融,-20℃,有效期1年单位 支产品简介: 本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷*被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。 使用说明: 1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。 2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。 3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。 

硝酸纤维素膜NC膜(0.45um)Millipore分  15cm*20cm 单位 卷英文名称  Immobilon-NC Membrane, Triton-free, mixed cellulose esters, 0.45 µm用于科研实验研究耗材。 硝酸纤维素膜NC膜优点 硝酸纤维素膜是世界上实用为广泛的特异性转移介质之一,硝酸纤维素膜采用100%纯硝酸纤维素材料制成,确保了高的结合能力。 使用方便,操作简单,兼容多种检测方法,与PVDF膜相比,不需要甲醇浸泡过程,这样使得那些需要亲水环境下的蛋白质转移。在转移前,仅需要在水中简单润湿,然后置于转移缓冲液中,不需要其他的预湿步骤了。 背景低 除了具有高结合力外,硝酸纤维素膜本身产生的背景非常低,膜*的表面性质保证了优异的信噪比,在膜洗脱时不需要严格的洗脱条件。 小分子蛋白的高截留率 硝酸纤维膜有多种孔径以供选择,按照不同的使用要求进行选择相应的孔径的膜,0.22um的硝酸纤维素膜通过小孔径来截留分子量小于20kD的蛋白质分子。0.45um的膜是较大分子蛋白和核酸的理想选择,0.1um 的膜常用于分子量小于7kD的蛋白质。 经实验证明,改膜主要优势在于结合在膜上的分子识别活性长达5年。 

10×丽春红  10ml 英文名称 Ponceau S Solution,10×储存条件 RT,有效期1年丽春红(Ponceau S)也称猩红,可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纤维素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的检测。丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS或其它适当溶液洗去。因此,蛋白质N端测序时将SDS-PAGE胶上的蛋白转移到PVDF膜,用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。 

双组分TMB显色液  2*50ml 英文名称 TMB Two-Component Substrate solution(for Elisa)储存条件 2-8℃,避光,有效期1年单位 瓶保存: 2-8℃避光保存,有效期1年。 产品简介:      目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,由于3,3',5,5'-四甲基联(TMB)在HRP的显色反应体系中,比其它色原具有更高的灵敏度且无致癌性而被广泛应用。TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。为了满足不同的试剂盒产品与以及科研需求,本公司专门研制了针对不同类型的基于HRP的免疫分析用TMB显色液。    外观与结构:显色液A应为无色或淡黄色透明液体,显色液B应为无色透明液体。均无沉淀、颗粒及絮状物。 用于酶联免疫实验中的显色阶段:可于样本反应,生成深蓝色产物。 

硝酸纤维素膜NC膜(0.22um)Pall  30cm*3m 硝酸纤维素膜(Hybond-NC)0.22um 用于Southern、Northern、Dot/Slot blotting等PALL66485 规格 15×20cm    30×300cm 硝酸纤维素膜NC膜优点 硝酸纤维素膜是世界上实用为广泛的特异性转移介质之一,硝酸纤维素膜采用100%纯硝酸纤维素材料制成,确保了高的结合能力。 使用方便,操作简单,兼容多种检测方法,与PVDF膜相比,不需要甲醇浸泡过程,这样使得那些需要亲水环境下的蛋白质转移。在转移前,仅需要在水中简单润湿,然后置于转移缓冲液中,不需要其他的预湿步骤了。 背景低 除了具有高结合力外,硝酸纤维素膜本身产生的背景非常低,膜*的表面性质保证了优异的信噪比,在膜洗脱时不需要严格的洗脱条件。 小分子蛋白的高截留率 硝酸纤维膜有多种孔径以供选择,按照不同的使用要求进行选择相应的孔径的膜,0.22um的硝酸纤维素膜通过小孔径来截留分子量小于20kD的蛋白质分子。0.45um的膜是较大分子蛋白和核酸的理想选择,0.1um 的膜常用于分子量小于7kD的蛋白质。 经实验证明,该膜主要优势在于结合在膜上的分子识别活性长达5年。 
侵肺巴斯德菌PCR检测试剂盒过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶2抗体Piplartine别名: 分子式: C17H19NO5性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库

胆固酰基转移酶1抗体Dehydroformouregine别名: 分子式: C20H19NO4性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库

磷化间变型淋巴瘤激酶抗体6-Formyl-1,2,9,10-tramethoxy-6a,7-dehydroaporphine别名: 分子式: C21H21NO5性状: Yellow powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库

磷化ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体1-(3,4-Dimethoxycinnamoyl)piperidine别名: 分子式: C16H21NO3性状: Oil纯度: 95.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库

磷化有丝分裂激酶B/C抗体Cyclo(L-Phe-L-Pro)别名: 分子式: C14H16N2O2性状: Oil纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库

磷化腺泡Acinus蛋白抗体1-(4-Methoxycinnamoyl)pyrrole别名: 分子式: C14H13NO2性状: Powder纯度: 98.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库

磷化肾上腺素能受体β2抗体Cyclo(D-Leu-L-Pro)别名: 分子式: C11H18N2O2性状: Oil纯度: 96.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 对照品;标准品;微生物代谢产物;天然产物;天然产物库

APS抗体3α,6β-Ditigloyloxytropan-7β-ol别名: 分子式: C18H27NO5性状: Oil纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库

 

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