产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:巴斯德氏杆菌属通用PCR检测试剂盒规格 英文名称:Pasteurella spp.PCR 编号:HE31356-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 增强型DAB显色试剂盒(20×) 3ml 别名 增强型DAB显色试剂盒(20×)英文名称 Metal Enhanced DAB Substrate Kit,20×储存条件 -20℃,避光,有效期1年单位 瓶 产品简介: 增强型 DAB 显色试剂盒是一种借助辣根过氧化物酶(HRP) ,用于免疫组化显色、原位杂交显色或 Western、 Southern 、Northern、EMSA 等膜显色的试剂盒。 DAB(二氨基联)是辣根过氧化物酶的常用底物。在 辣根过氧化物酶的催化下,DAB 会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇。 本产品采用特殊配方,灵敏度高,背景低,重复性好,储存稳定,使用方便,适合于蛋白印迹、免疫组织 化学和免疫细胞化学、斑点印迹和生物芯片等的染色和显色反应。 操作说明: 1. 对于组织切片或蛋白质印记膜,在与辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适 当洗涤液洗涤 3-5 次,每次 3-5 分钟。 2. 向 5 ml 蒸馏水中加入 250 μl 溶液 A、250 μl 溶液 B、250 μl 溶液 C,并混合均匀,即为 DAB 工作液,1h 内使用。注意:溶液 A/B/C 必须*融化后使用。 3. 向组织切片或膜上加入适量 DAB 工作液,确保能充分覆盖样品。 4. 室温避光孵育 1-30 分钟,显色时间过长可引起本底增高,故应密切观察显色过程(一般 3-10 分钟理想), 并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。 5. 对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后可对其进行其他染料复染。对于膜,显色反应终止后,可以室 温晾干避光保存。 3MM滤纸 Whatman 27cm×100m 单位 张whatman原装3mm层析滤纸。实验室相关耗材。 3MM滤纸 Whatman-3MM层析滤纸 3030-704 规格27cm×1m 27cm×100m PVDF膜(0.22um)Millipore 26.5*3.75 单位 卷英文名称 Immobilon-PSQ PVDF,0.2 µm科研实验用耗材。 PVDF膜(0.45um)13.25*15cm 13.25*15 单位 张英文名称 Immobilon-P PVDF,0.45 µm科研实验用耗材。 丽春红S 10g 有效期 2年级别 BS Grade别名 猩红S;Fast ponceau 2B;Ponceau Sextra英文名称 Ponceau SCAS 6226-79-5分子式 C22H12N4Na4O13S4分子量 760.61储存条件 RT外观(性状) 深红色粉末单位 瓶说明:丽春红(Ponceau S)也称猩红,可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纤维素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的检测。丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS或其它适当溶液洗去。因此,蛋白质N端测序时将SDS-PAGE胶上的蛋白转移到PVDF膜,用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。 巴斯德氏杆菌属通用PCR检测试剂盒规格 激活素受体样激酶1抗体3'-Demethoxypiplartine别名: 分子式: C16H17NO4性状: Powder纯度: 95.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库 激活素A受体1B抗体Cyclo(D-Val-L-Pro)别名: 分子式: C10H16N2O2性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库 磷化雄激素受体抗体Cyclo(L-Ala-L-Pro)别名: Cyclo(alanylprolyl)分子式: C8H12N2O2性状: Oil纯度: 96.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 对照品;标准品;微生物代谢产物;天然产物;天然产物库 磷化A-Raf抗体Cyclo(D-Phe-L-Pro)别名: 分子式: C14H16N2O2性状: Oil纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 对照品;标准品;微生物代谢产物;天然产物;天然产物库 酰基鞘氨脱酰酶2抗体5,6-Dihydropyridin-2(1H)-one别名: 分子式: C5H7NO性状: Oil纯度: 96.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库 脂肪细胞特异性粘附分子抗体3-(4-Methoxyphenyl)-1-(pyrrol-1-yl)propan-1-one别名: 分子式: C14H15NO2性状: Cryst.纯度: 96.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库 腺相关病毒5抗体Cyclo(L-Leu-trans-4-hydroxy-L-Pro)别名: 分子式: C11H18N2O3性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库 腺苷活化蛋白激酶γ3抗体3-Phenyl-1-(pyrrol-1-yl)propan-1-one别名: 分子式: C13H13NO性状: Cryst.纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |