荧光定量PCR试剂盒技术：
产品仅用于科研本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。 产品名称 | 热带念珠菌探针法荧光PCR检测试剂盒 | 英文名称 | Candida tropicalis | 货号 | YSP96506 |
样品RNA的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μ
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．产品仅用于科研所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
碲标准溶液(100μg/ml，基体:HCI)Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)酸氢氨钠 铥标准溶液(1000µg/mL,基体：10%HCL)Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)5,6-二氢-4H-吡咯并[3,2,1-IJ]喹啉 钒标准溶液(500mg/L,溶剂：水)FANCD2 (D5L5X) Rabbit mAb硝基-1,二硫酸盐 钒标准溶液(100mg/L,基体:1%HCI)HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb5-溴-2-(硫代甲基)嘧啶 镱标准溶液(1000μg/ml)BCAT1 (D4V2T) Rabbit mAbN,N-二异基乙三酸盐 镱标准溶液(1000μg/ml in 10%HCl)Phospho-Met (Tyr1234/1235) Blocking Peptide4,5-二氯-2-甲基哒-酮 锌标准溶液(1000mg/L,溶剂：1%盐酸)Ibrutinib3,4',5-*氧基-反-二代乙 锌标准溶液(500mg/L,溶剂：1%盐酸)ROR1 (D6T8C) Rabbit mAb2-ACETAMIDO-BROMOANISOLE 二溴一氯标准溶液(1.0mg/ml,基体：甲)MUC1-C (D5K9I) XP® Rabbit mAb甲基-1-萘甲酸 2,二甲酚标准溶液(1000μg/ml,溶剂：甲)ERG (A7L1G) Rabbit mAb (PE Conjuga)METHYL IMIDAZO[1,2-A]PYRIDINE-5-CARBOXYLA 3,二甲酚标准溶液(1000μg/ml,溶剂：甲)TKS5 Antibody3,4'-二氨基二烷 邻二甲酸二乙酯标准溶液(1000μg/ml,溶剂：甲)TRPC6 (D3G1Q) Rabbit mAbN,N'-乙基双酰 邻二甲酸二丁酯标准溶液(1000μg/ml,溶剂：甲)Phospho-CaMKK2 (Ser495) Antibody双(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)化铜 2,二溴酰标准溶液(490mg/L,基体:乙酸乙酯)Orexin (D6G9T) Rabbit mAb氧基乙 1,1-二氯乙烷标准溶液(1.00mg/ml,基体:甲)CaMKK2 (D8D4D) Rabbit mAb 反式-1,2-二氯乙标准溶液(1.00mg/ml,基体:甲)eIF4E (C46H6) Rabbit mAb (Biotinylad)7-甲氧基咪唑并[1,2-A]吡啶-8-甲 邻二甲酸二正壬酯标准溶液(136.0μg/ml,溶剂:甲)SIX1 (D5S2S) Rabbit mAb6-乙酰氧基正己酸甲酯 乙标准溶液(1000μg/ml,溶剂：二硫化碳)CAR (D3W3G) Rabbit mAb1-BOC-5-(METHOXYCARBONYL)INDOLE-2-BORONIC ACID
热带念珠菌探针法荧光PCR检测试剂盒包虫抗体IgG ELISA试剂盒Inhibin Beta C 抑制素βC抗体20 ul 膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA试剂盒Insulin 胰岛素抗体100 ul 膀胱癌抗原(UBC)ELISA试剂盒Insulin (pig) 胰岛素抗体 （猪）100 ul 伴侣蛋白10(CPN10)ELISA试剂盒rInsulin 抗重组胰岛素抗体100 ul 半糖凝集素-7(Gal-7)ELISA试剂盒rInsulin monoclonal (pig) 抗胰岛素单克隆抗体（猪）100 ul 半糖(Galactose)ELISA试剂盒rInsulin human monoclonal 重组胰岛素单克隆抗体100 ul 板层素相关多肽2亚型α(TMPO)ELISA试剂盒Insulin Receptor 胰岛素受体抗体100 ul 瘢痕性天疱疮抗体(CP)ELISA试剂盒Insulin Receptor alpha 胰岛素受体α抗体100 ul 百日咳病毒抗体(IgM)ELISA试剂盒Insulin Receptor Alpha 胰岛素受体α抗体100 ul |
