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犬新孢子虫探针法荧光PCR检测试剂盒

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更新日期:
2020-12-01
点击次数:
491
产品特点:
犬新孢子虫探针法荧光PCR检测试剂盒注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
  50次犬新孢子虫探针法荧光PCR检测试剂盒的详细资料:

客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

 产品名称

犬新孢子虫探针法荧光PCR检测试剂盒

 英文名称

 Neospora caninum

 货号

 YSP97003

荧光定量PCR试剂盒技术:
产品仅用于科研本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒,包括盒体,盒体由上盒体和下盒体组成,上盒体的底面上设有限位凸起,下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽,且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖,侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾,下盒体的上端边缘处设有环形凸起,两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上;凹槽的内部设有固定杆,固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架;下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分,并将两个部分通过侧盖连接,即可保证试剂盒的便携性,同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
样品RNA的抽提:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1)紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
人中性粒细胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA试剂盒英文名称:Human neutrophil peptide 1-3,HNP1-3 ELISA Kit进口/分装

人中性粒细胞碱性酸酶(NAP)ELISA试剂盒英文名称:Human neutrophilic alkaline phosphatase,NAP ELISA Kit进口/原装

人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒英文名称:Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit*

SOD(Human Super Oxidase Dimutase) 人超氧化物歧化酶Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-DRD2 多巴胺受体D2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Neurexin 2 轴突蛋白2抗体 规格 0.2ml

human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit 人甲状腺刺激免疫球蛋白 96T

C17orf77 英文名称: 17号染色体开放阅读框77抗体 0.2ml

Anti-OPG 骨保护蛋白/护骨素抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

MV(Human morbillivirus) ELISA Kit 人麻疹病毒Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-IRS-3 胰岛素受体底物-3抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh LEO1 RNA聚合酶相关蛋白LEO1抗体 规格 0.1ml

DHEA-S(Human Dehydroepiandrosterone sulfate) ELISA Kit 人脱氢表雄酮酯 96T

Piwil2 英文名称: piwi样2蛋白抗体 0.2ml

IκB β 单克隆抗体IκB β Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ulInsulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4 ELISA Kit
大鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒 进口/原装 英文名称: Rat B(INH-B)ELISA试剂盒 进口/原装 英文名称: Rat Agarose常温100g
琼脂糖Agarose4℃保存100g
琼脂粉Agar,Powder-20℃保存100g
松Hydrocortisone 5g
青霉素G钠盐溶液Penicillin G Sodium Solution-20 ℃避光保存10mL    鸢尾黄素;鸢尾黄酮;鸢尾苷元Tectorigenin548-77-620mgHPLC≥98%
芫花素;芫花黄素Genkwanin437-64-920mgHPLC≥98%
原阿片碱;双花母草素;全能花素;原阿片鹼Protopine130-86-920mgHPLC≥98%
原儿茶醛;3,4-二羟基protocatechuic aldehyde139-85-520mgHPLC≥98%
原儿茶酸;瑞炎宁;3,4-二羟基苯甲酸protocatechuic acid99-50-320mgHPLC≥98%
原花青素proanthocyanidins4852-22-620mgUV≥98%
原花青素B1;原矢车菊B1Procyanidin B120315-25-720mgHPLC≥97%
原花青素B2;原矢车菊素B2Procyanidin B229106-49-820mgHPLC≥98%
原人参二醇Protopanaxdiol213849920mgHPLC≥98%
原人参三醇Protopanaxatriol1453-93-620mgHPLC≥98%
大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒 进口/原装 英文名称: Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA Kit
大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒 进口/原装 英文名称: Rat Tumor necrosis factor soluble receptor ​

信号传导蛋白SMAD3 单克隆抗体Smad3 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

CaMKIIβ/γ/δ (Phospho Thr287) 单克隆抗体CaMKIIβ/γ/δ (Phospho Thr287) Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

热休克蛋白22 单克隆抗体HSPB8/HSP22 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

转铁蛋白 单克隆抗体Transferrin Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

转铁蛋白 单克隆抗体Transferrin Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
犬新孢子虫探针法荧光PCR检测试剂盒卷曲螺旋结构域蛋白83抗体UCP-3/FITC  荧光素标记线粒体脱偶连蛋白3抗体IgG100 ul

卷曲螺旋结构域蛋白21抗体UG/FITC  荧光素标记子宫珠蛋白抗体IgG100 ul

卷曲螺旋结构域蛋白6抗体(状甲状腺癌编码蛋白)UMOD/FITC  荧光素标记UMOD抗体IgG100 ul

细胞周期素依赖激酶2相关蛋白2抗体ULBP1/N2DL1/FITC  荧光素标记兔抗、大、UL16结合蛋白1蛋白抗体IgG500 ul

1号染色体开放阅读框201抗体ULBP2/N2DL2/FITC  荧光素标记兔抗、大、UL16结合蛋白2抗体IgG100 ul

卷曲螺旋结构域蛋白7抗体ULBP3/N2DL3/FITC  荧光素标记兔抗、大、UL16结合蛋白3抗体IgG100 ul

卷曲螺旋结构域蛋白80抗体UMOD/FITC  荧光素标记UMOD蛋白抗体IgG100 ul

CD163蛋白样1抗体URGCP/URG4/FITC  荧光素标记型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗体IgG100 ul

周期素依赖性激酶5调节蛋白1样蛋白1抗体URGCP/URG4/FITC  荧光素标记型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗体C端IgG100 ul
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.产品仅用于科研所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。

 

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