同艾特韦病毒PCR检测试剂盒说明书

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

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使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
N-甲基-D-葡糖胺/葡/葡萄糖/1-去氧-1-山梨醇/N-甲基葡萄胺/Meglumine 质量规格：>95%,BR 包装;25g

乳酸锌/2-羟基丙酸锌/Zinc lactate 质量规格：HPLC法含量测定 包装;5g

乳酸亚铁/乳酸低铁/2-羟基丙酸亚铁盐/α-羟基丙酸亚铁/Ferrous lactate 质量规格：>98%,BR 包装;10MG

乳酸钙/L-乳酸钙/α-羟基-丙酸钙五化合物/Calcium Lactate 质量规格：含量测定 包装;1g

L-乳酸钠/乳酸钠/α-羟基丙酸钠/(S)-2-羟基丙酸钠盐/Sodium lactate 质量规格：含量测定 包装;5g

DL-乳酸钠/乳酸钠/2-羟基丙酸单钠盐/(±)-2-羟基丙酸钠盐/Sodium DL-lactate 质量规格：UV法含量测定 包装;1g

柠檬酸钙/枸橼酸钙/2-羟基-1,2,3-丙三羧酸钙盐/Calcium citrate tetrahydrate 质量规格：UV法含量测定 包装;5g

柠檬酸铁/枸椽酸铁/柠檬酸铁(III)/2-羟基-1,2,3-丙烷三羧酸铁盐/Ferric citrate 质量规格：HPLC≥98%,标准品 包装;250mg

苹果酸钠/DL-苹果酸钠/DL-羟基丁二酸二钠/DL-林檎酸钠/Sodium DL-ma1ate 质量规格：>98%,GSNOR抑制剂 包装;100ml

苹果酸钠三物/DL-苹果酸钠合物/DL-羟基丁二酸二钠/DL-林檎酸钠/Sodium DL-ma1ate trihydrate 质量规格：含量测定 包装;100g

葡萄糖酸锌/(T-4)-双(D-葡萄糖酸-κO1,κO2)-锌/Zinc gluconate 质量规格：UV法含量测定 包装;500g

葡萄糖酸钙/D-葡萄糖酸钙/葡萄酸钙/Calcium D-gluconate 质量规格：>98%,BR 包装;1g

正磷酸铁二物/磷酸高铁二物/磷酸铁二物/Ferric phosphate dihydrate 质量规格：含量测定 包装;5g

正磷酸铁四物/磷酸高铁四物/磷酸铁四物/Iron(III) phosphate tetrahydrate 质量规格：含量测定 包装;100g

乳酸锂/DL-乳酸锂/2-羟基丙酸单锂盐/2-羟丙酸锂/2-羟基丙酸锂/DL-lactic acid lithium salt 质量规格：HPLC法含量测定 包装;25g

柠檬酸钠/枸橼酸钠/柠檬酸三钠盐二/柠檬酸三钠/2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸钠/Sodium citrate dihydrate 质量规格：检查用 包装;5g

D-葡萄糖酸钠/五羟基己酸钠/葡萄糖酸钠/D-葡糖酸单钠盐/葡糖酸钠/Sodium D-gluconate 质量规格：鉴别 包装;10MG
同艾特韦病毒PCR检测试剂盒说明书Endomycopsis│fibuliger 中文名称：胁状拟内孢霉种属:Endomycopsis│fibuliger提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:检定菌培养方法培养基:CM0017生长条件:28C存储条件:真空冷冻干燥 纯度：98%

Pyrenochaeta│sp. 中文名称：须壳孢属种属:Pyrenochaeta│sp.提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:抗癌活性培养方法培养基:CM0014生长条件:28C存储条件:真空冷冻干燥 纯度：AR,98%

Cladosporium│sp. 中文名称：芽枝孢霉属种属:Cladosporium│sp.分离基物:根提供形式:冻结物安全等级:1模式菌株:no应用领域:抗烟曲霉培养方法培养基:CM0014生长条件:25C存储条件:-80℃冰箱冻结；矿物油法 纯度：98%

Salmonella│typhimurium var.copenhagen 中文名称：鼠伤寒沙门氏菌哥本哈根变种种属:Salmonella│typhimurium var.copenhagen提供形式:其他安全等级:2模式菌株:no应用领域:(1),4,12　i　1,2培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：98%

Salmonella│enteritidis var.danysz 中文名称：肠炎沙门氏菌danysz 变种种属:Salmonella│enteritidis var.danysz提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:1,9,12　g,m　-培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：98%

Salmonella│abortus-ovis 中文名称：绵羊沙门氏菌种属:Salmonella│abortus-ovis提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:4,12　c　1,6培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：97%

Salmonella│typhi Gale mntant ty21a 中文名称：伤寒沙门氏菌Ty21a,ga种属:Salmonella│typhi Gale mntant ty21a提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:无毒株,口服菌苗侯选株培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：97%

Salmonella│gallinarum 中文名称：鸡沙门氏菌种属:Salmonella│gallinarum提供形式:冻结物安全等级:2模式菌株:no应用领域:1,9,12　-　-培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:定期移植法 纯度：97%