产品仅用于科研注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
产品名称：溶组织内阿米巴PCR检测试剂盒说明书
英文名称：Entamoeba histolyticaPCR
编号：HE30925-R
类别:PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
储需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
保存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
盐酸丫啶/盐酸吖啶/吖啶盐酸盐/盐酸氮(杂)蒽/Acridine hydrochloride 质量规格：鉴别 包装;5g 盐酸丫黄素/盐酸吖啶黄/氯化-3,6-二氨基-10-甲基丫啶/三胜黄/丫黄素盐酸盐/锥黄/Acriflavine hydrochloride 质量规格：含量测定 包装;1g 甲基橙/橙黄Ⅲ/金莲橙D/对二甲基氨基偶氮苯磺酸钠/4-[[4-(二甲氨基)苯基]偶氮基]苯磺酸钠/酸性橙 52/半日花素B/Methyl orange 质量规格：鉴别 包装;250mg 甲基紫/甲基青莲/碱性紫1/甲基紫2B/紫/碱性紫1/甲紫/碱基青莲/碱性紫2B/Methyl violet 质量规格：鉴别 包装;5g 甲基紫6B/甲基青莲6B/煌紫/亮紫/五甲基副品红碱/Methyl violet 6B 质量规格：鉴别用 包装;25g 溴甲酚紫/溴甲酚红/二溴邻甲酚磺呋酞/二溴邻甲酚磺酞/二溴邻甲酚磺酰酞/BCP 质量规格：含量测定 包装;5g 溴甲酚紫钠/溴甲酚红钠/5,5ˊ-二溴邻甲酚磺酞钠盐/5,5′-二溴邻甲酚红钠/5,5′-二溴邻甲酚磺酰酞钠/BCP，Na 质量规格：内标 包装;50g 固紫酱GBC盐/固深红GBC/重氮色盐紫酱/坚牢紫酱GBC盐/荧光重氮色盐紫酱/枣红色基GBC/枣红贝司GBC/紫酱色基GBC /固深红GBC /坚牢酱紫GBC盐/Fast Garnet GBC salt 质量规格：内标 包装;25g 固黑K盐/固黑K/固黑K半氯化锌盐/2,5-二甲氧基-4-[(4-基)偶氮]苯重氮(T-4)-四氯锌酸盐/耐晒黑K盐/4-氨基-2,5-二甲氧基-4-硝基偶氮苯重氮盐/Fast Black K Salt 质量规格：含量测定 包装;5g 固盐/黑色基B/4,4′二氨基二硫酸盐/4,4'-二氨基二硫化物/耐晒盐/4,4'-亚胺双硫酸盐/C.I.冰染重氮组分109/Fast Black B Salt 质量规格：>99%,AR 包装;1g 固蓝BB盐/坚牢蓝BB盐/氯化-4-重氮-2,5-二乙氧基-N-苯甲酰基氯化锌盐/Fast blue BB salt 质量规格：含量测定 包装;25g 固蓝RR盐/重氮坚牢蓝/坚牢蓝RR盐/重氮固蓝RR/4-苯甲酰氨基-2,5-二甲氧基氯化重氮苯氯化锌盐/耐晒兰RR盐/Fast blue RR salt 质量规格：含量测定 包装;5g 氨基黑10B/萘酚蓝黑/牛黑NBR/酸性黑1/蓝黑/酸性黑10B/酸性蓝黑10B/酸性青光蓝10B/4-氨基-5-羟基-3-(对偶氮)-6-(苯偶氮)-2,7-萘二磺酸二钠盐/萘蓝黑/对偶氮-3,6-二磺酸-1-氨基-8-萘酚-7-偶氮苯钠盐/Amino black 10B 质量规格：供含量测定用 包装;1g 苏丹Ⅳ/苏旦IV/四号苏丹红/猩红/邻甲苯偶氮邻甲苯偶氮-3-萘酚/油溶暗红/溶剂红24/苏丹红B/1-[4-(邻甲苯偶氮)邻甲苯偶氮]-2-萘酚/1-(2-甲基-4-(2-甲基苯基偶氮)苯基偶氮)-2-萘酚/邻甲苯偶氮邻甲苯偶氮-2-萘酚/油溶红/烛红/Sudan Ⅳ 质量规格：内标 包装;5g 苏丹Ⅲ/三号苏丹红/黄光油溶红/油红/苯基偶氮（4-偶氮-1）-2-萘酚/苏旦Ⅲ/苏丹红Ⅲ/1-[4-(苯基偶氮)苯基偶氮]-2-萘酚/溶剂红23/Sudan Ⅲ 质量规格：含量测定 包装;250g 苏丹Ⅱ/溶剂橙7/苏旦Ⅱ/2,4-二甲基苯(1-偶氮-1)-2-羟基萘/2,4-二甲基苯偶氮-2′-萘酚/二号苏丹红/油溶猩红/黄光油溶橙/1-[(2,4-二甲苯基)偶氮]-2-萘酚/苏丹红II/苏丹橙Ⅱ/1-二甲苯基偶氨-2-萘酚/Sudan Ⅱ 质量规格：含量测定 包装;100g 苏丹I/苏旦I/苯基(偶氮-1)-2-羟基萘/一号苏丹红/苯基偶氮-2-萘酚/苯偶氮苯酚/溶剂黄14/1-(苯基偶氮)-2-萘酚/油溶黄/苯基(偶氮-1)-2-羟基萘/Sudan I 质量规格：含量测定 包装;25g
溶组织内阿米巴PCR检测试剂盒说明书Pasteurella│pneumotropica 中文名称：嗜肺巴氏杆菌种属:Pasteurella│pneumotropica分离基物:兔肝脏病料提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究培养方法培养基:56生长条件:37存储条件:真空冷冻干燥法; 纯度：97% Streptococcus│bovis 中文名称：牛链球菌种属:Streptococcus│bovis分离基物:牛脾脏病料提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究培养方法培养基:396生长条件:37存储条件:真空冷冻干燥法;矿物油法; 纯度：97% Alphaherpesvirinae│Infectious bovine rhinotracheitis virus 中文名称：传染性牛鼻气管炎病毒种属:Alphaherpesvirinae│Infectious bovine rhinotracheitis virus分离基物:鼻腔棉拭子安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究和分类培养方法生长条件:37存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法; 纯度：98% Mannheimia│haemolytica 中文名称：溶血性曼氏杆菌种属:Mannheimia│haemolytica分离基物:病猪肺脏提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:用于科研培养方法培养基:0生长条件:37存储条件:真空冷冻干燥法; 纯度：98% Avipoxvirus│Fowlpox virus 中文名称：鸡痘病毒种属:Avipoxvirus│Fowlpox virus分离基物:病鸡结痂提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究培养方法培养基:0生长条件:37存储条件:真空冷冻干燥法; 纯度：98% Influenzavirus A│Avian influenza virus 中文名称：禽流感病毒种属:Influenzavirus A│Avian influenza virus分离基物:病鸡提供形式:冻结物安全等级:2模式菌株:no应用领域:实验研究其生物学活性，并进一步从基因平上进行分析。培养方法培养基:0生长条件:37 纯度：98% Streptococcus│suis 中文名称：猪链球菌种属:Streptococcus│suis分离基物:病猪提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:抗药性检验培养方法培养基:396生长条件:37存储条件:真空冷冻干燥法; 纯度：98% Riemerella│anatipestifer 中文名称：鸭疫里氏杆菌种属:Riemerella│anatipestifer分离基物:鸭心血安全等级:2模式菌株:no应用领域:科研教学培养方法培养基:0生长条件:37存储条件:真空冷冻干燥法; 纯度：98%
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
技术原理：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。 |
