产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:副猪嗜血杆菌PCR检测试剂盒 英文名称:Haemophilus parasuisPCR 编号:HE31051-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 乙酰羟肟酸乙酯/N-羟基乙酰亚胺酸乙酯/Ethyl acetohydroxamate 质量规格:1:3000,BR 包装;500g 菲/1,2-苯并萘/Phenanthrene 质量规格:≥50 U/mg,sigma 原装 包装;100g 氧化钡/无氧化钡/重土/钡氧重土/一氧化钡/Barium oxide 质量规格:>98% 包装;25g 过硼酸钠/高硼酸钠/四合高硼酸钠/四合过硼酸钠盐/Sodium perborate tetrahydrate 质量规格:1:12000,BR 包装;5g 过硼酸钠一物/高硼酸钠一物/Sodium perborate monohydrate 质量规格:≥30units/mg protein,sigma分装 包装;25g 对苯酚/4-苯酚/对酚/4-酚/4-Iodophenol 质量规格:≥30units/mg protein,sigma原装 包装;5g 对苯基苯酚/对苯基酚/对羟基联苯/4-羟基联苯/4-联苯酚/(1,1'-二苯基)-4-酚/4-苯基苯酚/4-苯基酚/4-苯酚/4-Hydroxybiphenyl 质量规格:进分 包装;1g 三缩四乙二醇/四甘醇/四缩乙二醇/聚乙二醇-4/TEG 质量规格:≥95%,进口半硫酸盐 包装;5g 木质素磺酸钠/分散剂CMN/分散剂M-9/木素磺酸钠/木质磺素钠/木质磺酸钠/Sodium lignosulfonate 质量规格:≥90%,进分 包装;100g 安息香胶/安息香浸膏/安息香酊/Gum benzoin 质量规格:≥99%,BR 包装;25g 龙脑/2-莰醇/冰片/龙胆/合成龙脑/内型-1,7,7-*基-二环[2.2.1]庚-2-醇/樟醇/钓樟醇/外-2-莰醇/异龙脑/Borneol 质量规格:3万U/g 包装;500g 松香酸/1,2,3,4,4a,4b,5,6,10,10a-十氢化-1,4a-二甲基-7-异丙基-1-菲甲酸/枞酸/松脂酸/熟松香/树脂酸/Abietic acid 质量规格:BR,70万u/ml液体 包装;25g 三聚氯氰/2,4,6-三氯-1,3,5-三嗪/三聚氰酰氯/氰脲酰氯/氰尿酰氯/三聚/三氯三聚氰/Cyanuric chloride 质量规格:BR,酶活5万,粉末 包装;5g 2-乙烯吡啶/2-乙烯基吡啶/乙烯基吡啶单体/2-乙烯基氮苯/2-吡啶基乙烯/2-VP 质量规格:≥2000KU/mg protein,(牛胰) 包装;100g 1,1,2-三氯三氟乙烷/ 1,1,2-三氟-1,2,2-三氯乙烷/氟利昂-113/1,1,2-三氟三氯乙烷/三氯三氟代乙烷/1,1,2-Trichlorotrifluoroethane 质量规格:BR,4000u/g 包装;25g 硫酸铬/六硫酸铬/硫酸铬(Ⅲ)六/Chromium(III) sulfate hexahydrate 质量规格:BR,100 U/mg 包装;500g 硫酸铬溶液/无硫酸铬/硫酸铬(III)/Chromium(III) sulfate 质量规格:BR,75U/MG 包装;10mg 副猪嗜血杆菌PCR检测试剂盒Bacillus│licheniformis 中文名称:地衣芽胞杆菌种属:Bacillus│licheniformis分离基物:沉积物/深海沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:微生物/高温菌(55℃)培养方法培养基:823生长条件:55℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:平均分子量 ~475,含100 ppm MeHQ,200 ppm BHT Rhodothermus│marinus 中文名称:海洋红嗜热盐菌种属:Rhodothermus│marinus分离基物:沉积物/深海沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:微生物/耐压菌培养方法培养基:823生长条件:37℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Idiomarina│zobellii 中文名称:左贝尔海源菌种属:Idiomarina│zobellii分离基物:沉积物/深海沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:微生物/耐碱菌培养方法培养基:823生长条件:37℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Agarivorans│gilvus 中文名称:淡黄色噬琼胶菌种属:Agarivorans│gilvus分离基物:生物样/浒苔提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:准模式菌株:;产酶菌株/产琼脂酶培养方法培养基:471生长条件:30-37℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97% Alcanivorax│venustensis 中文名称:优雅食烷菌种属:Alcanivorax│venustensis分离基物:样/表层海提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:有机污染物降解菌/石油烃类降解菌培养方法培养基:745生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97% Idiomarina│baltica 中文名称:波罗的海海源菌种属:Idiomarina│baltica分离基物:样/表层海提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:潜在的有机污染物降解菌/分离自石油降解菌群培养方法培养基:745生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Gracilimonas│sp. 中文名称:纤细单胞菌种属:Gracilimonas│sp.分离基物:样/表层海提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:潜在的有机污染物降解菌/分离自石油降解菌群培养方法培养基:745生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Alcanivorax│jadensis 中文名称:亚德食烷菌种属:Alcanivorax│jadensis分离基物:样/表层海提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:有机污染物降解菌/石油烃类降解菌培养方法培养基:745生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:90% 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |