产品仅用于科研注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
产品名称：反刍兽曼氏杆菌PCR检测试剂盒说明书
英文名称：Mannheimia ruminalisPCR
编号：HE31193-R
类别:PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
储需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
保存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
二氢辣椒碱英文名称 Stachydrine分 子 量： 143.18CAS NO.： 471-87-4纯 度： ≥98%分子式： C7H13NO2性状: 白色结晶性粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 益母草药理药效: 水苏碱具有提高冠状动脉、心肌营养性血流量、减少心肌细胞坏死的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: HPLC-ELSD:乙腈：0.2%冰醋酸溶液（80:20）(仅供参考）贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 二氢欧山芹醇当归酸酯英文名称 Sudan II分 子 量： 276.33CAS NO.： 3118-97-6纯 度： ≥98%分子式： C18H16N2O性状: 棕红色结晶规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 合成染料药理药效: 苏丹红Ⅱ可作杀真菌剂，染料鉴别方法: NMR；Ms检测方法: HPLC贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 二氢石蒜碱英文名称 Eriodictyol分 子 量： 288.25CAS NO.： 552-58-9纯 度： ≥98%分子式： C15H12O6性状: 淡黄色粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂提取来源: 花生壳peanutshell药理药效: 圣草酚具有抗氧化，抗辐射，降血脂，降血糖的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: 乙腈：0.2%磷酸水=35:65 254nm贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 二氢英文名称 Cyanidin-3-O-glucoside chloride分 子 量： 484.84CAS NO.： 7084-24-4纯 度： ≥98%分子式： C21H21ClO11性状: 棕红色结晶粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 易溶于甲醇、乙醇、丙酮中，可溶于水，不溶于、等非极性溶剂中提取来源: 黑豆皮水提取，栽培紫菀，覆盆子，毛薯，紫背天葵,矢车菊地上部分药理药效: 矢车菊素-3-O-葡萄糖苷具有抗炎、预防毛细血管脆裂的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: RP-HPLC:0.4%磷酸水：乙腈=88:12 钨灯λ：535nm（仅供参考）或乙腈：0.2%磷酸水溶液=13:87波长：520nm贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 补充中 二氢小檗碱英文名称 Spinosin分 子 量： 608.546CAS NO.： 72063-39-9纯 度： ≥98%分子式： C28H32O15性状: 类白色结晶粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 149°C溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 酸枣仁药理药效: 斯皮诺素具有镇静、安神、催眠的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: RP-HPLC:乙腈：水梯度梯度洗脱 λ：335nm(仅供参考）贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 补充中 二氢血根碱英文名称 Sudan IV；Solvent Red 24分 子 量： 380.44CAS NO.： 85-83-6纯 度： ≥98%分子式： C24H20N4O性状: 褐色粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 合成药理药效: 苏丹红Ⅳ可作染色剂，油漆，脂肪着色剂，医药防腐剂鉴别方法: NMR；Ms检测方法: HPLC贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 二氢杨梅素英文名称 Pinoresinol diglucoside分 子 量： 682.668CAS NO.： 63902-38-5纯 度： ≥98%分子式： C32H42O16性状: 白色结晶粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 杜仲药理药效: 松脂醇二葡萄糖苷具有抗氧化、抗肿瘤、增强免疫力、抗疲劳、抗衰老的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: RP-HPLC:甲醇：水（25:75） λ：277nm(仅供参考）贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 二氢醉椒素英文名称 Carnosol分 子 量： 330.42CAS NO.： 5957-80-2纯 度： ≥98%分子式： C20H26O4性状: 白色结晶粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 240 - 242°C溶解性: 溶于乙醇、丙酮和油脂,不溶于水提取来源: 迷迭香RosmarinusofficinalisL药理药效: 鼠尾草酚具有抗辐射，抗氧化，抗癌的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: RP-HPLC:乙腈-0.5％磷酸溶液(75：25) λ：230nm(仅供参考）贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 补充中 二十八烷醇英文名称 Amentoflavone分 子 量： 538.46CAS NO.： 1617-53-4纯 度： ≥98%分子式： C30H18O10性状: 黄色结晶粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 245 - 250°C溶解性: 易溶于DMSO，溶于甲醇、乙醇、丙酮，不溶于石油醚。提取来源: 卷柏，杉木枝叶药理药效: 穗花杉双黄酮具有抗肿瘤、清除自由基、舒张血管、降血糖的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: RP-HPLC:甲醇：0.1%磷酸溶液梯度洗脱 λ：330nm(仅供参考）贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 补充中
反刍兽曼氏杆菌PCR检测试剂盒说明书化硫代乙酰胆碱有效期: 2年溶解性: 50mg/ml MeOH别名: 2-(乙酰硫代)-N,N,N-*基乙铵化物;化硫代乙酰胆碱;代硫代乙酰胆碱;化乙酰硫代胆碱;化-S-乙酰硫代胆碱;乙酸-N-(2-巯基乙基)*基化铵;S-乙酰硫代胆碱化物;硫代乙酰胆碱(化)英文名称: ACETYLTHIOCHOLINE IODIDE 卵磷脂(大豆)有效期: 2年溶解性: 100mg/mL in CHCL3来源: from soybean,Type II-S,别名: L-α-磷脂酰胆碱；L-α-Phosphatidylcholine 海藻酸钠有效期: 5年级别: CP溶解性: 10 mg/mL in water别名: 褐藻胶 褐藻酸钠 藻胶钠 藻朊钠 聚乙二醇 PEG 4000有效期: 3年级别: Biotechnology Grade溶解性: 100mg/ml in Water别名: 聚氧乙烯4000；Polyglycol, Polyethylene oxide；Polyoxyethylene； PEG4000 β-甘油磷酸二钠盐有效期: 7年溶解性: 200mg/ml in water别名: β-甘油磷酸钠；Disodium β-glycerol phosphate英文名称: β-Glycerol phosphate disodium salt pentahydrate 植物凝胶有效期: 3年级别: plant cell culture tested别名: Agar substitute gelling agent；Gellan Gum英文名称: Phytagel 鲁米诺有效期: 3年溶解性: 50 mg/ml Water别名: 3-氨基苯二甲酰肼; 发光氨英文名称: 5-Amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione 甜菜碱盐酸盐有效期: 2年级别: Ultra Pure Grade溶解性: 1g/mL in water别名: Acidol；Lycine hydrochloride；Oxyneurine hydrochloride
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
技术原理：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。 |
