古柏线虫通用PCR检测试剂盒

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

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使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
L-色氨酸/L-胰化蛋白氨基酸/L-色氨基酸/L-2-氨基-3-吲哚基-1-丙酸/L-氨基吲哚丙酸/(+/-)-2-氨基-3-(3-吲哚基)丙酸/L-Tryptophan 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;25ml

D-色氨酸/D-胰化蛋白氨基酸/D-2-氨基-3-吲哚基-1-丙酸/D-氨基吲哚丙酸/D-β-3-吲哚丙氨酸/D-Trytophan 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;25g

DL-色氨酸/DL-胰化蛋白氨基酸/DL-色氨基酸/DL-2-氨基-3-吲哚基-1-丙酸/DL-氨基吲哚丙酸/ DL-β-(3-吲哚基)-α-氨基丙酸/(+/-)-2-氨基-3-(3-吲哚基)丙酸/DL-Trytophan 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;5g

BOC-L-色氨酸/N-叔丁氧羰基-L-色氨酸/BOC-L-Tryptophan 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;1g

5-羟基-DL-色氨酸/5-羟基胰化蛋白氨基酸/DL-2-氨基-3-(5-羟基吲哚)丙酸/DL-5-羟基胰化蛋白氨基酸/5-羟基色氨酸/DL-5-羟基色氨酸/DL-5-HTP 质量规格：>98%,BR 包装;5g

L-酪氨酸/L-β-对羟基苯基丙氨酸/L-苯酚氨基丙酸/L-β-对羟苯基-α-氨基丙酸/L-干酪氨基酸/(2S,3R)-2-氨基-3-对羟苯基丙酸/L-β-对羟基苯基丙氨酸/L-Tyrosine 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;1g

D-酪氨酸/D-β-对羟基苯基丙氨酸/D-苯酚氨基丙酸/D-β-对羟苯基-α-氨基丙酸/D-干酪氨基酸/3-（4-羟基苯基）-D-丙氨酸/D-α-氨基对羟基氢化肉桂酸/D-β-对羟基苯丙氨酸/酥氨酸/D-酪胺酸/D-Tyrosine 质量规格：进分sigmaD1501 包装;25g

DL-酪氨酸/DL-β-对羟基苯基丙氨酸/DL-苯酚氨基丙酸/DL-β-对羟苯基-α-氨基丙酸/DL-干酪氨基酸/3-（4-羟基苯基）-DL-丙氨酸/DL-Tyrosine 质量规格：>90%,BR 包装;5g

3,5-二溴-L-酪氨酸/二溴酪氨酸/L-3,5-二溴酪氨酸/3,5-Dibromo-L-Tyrosine 质量规格：>98%,Sigma 包装;1g

3,5-二-L-酪氨酸/3,5-二酪氨酸/β-(3,5-二-4-羟苯基)α-氨基丙酸/3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate 质量规格：>98%,BR 包装;100mg

L-酪氨酸二钠盐/L-Tyrosine disodium salt 质量规格：>99,ALFA原装 包装;500mg

L-缬氨酸/L-α-氨基异戊酸/L-2-氨基-3-甲基丁酸/L-2-氨基异舞戊酸/L-穿心排草氨基酸/2-胺-3-甲基丁酸/L-Valine 质量规格：>98,BR 包装;100ml

D-缬氨酸/D-2-氨基-3-甲基戊酸/D-2-氨基-3-甲基丁酸/D-异戊氨酸/D-α-氨基异戊酸/D-穿心排草氨基酸/D-Valine 质量规格：>98%,BR 包装;500ml

DL-缬氨酸/DL-α-氨基异戊酸/DL-2-氨基-3-甲基丁酸/DL-氨基异戊酸/DL-2-氨基异戊酸/DL-氨基异缬草酸/DL-穿心排草氨基酸/DL-异戊氨酸/DL-Valine 质量规格：>99%,可用于细胞培养 包装;100g

FMOC-L-缬氨酸/芴甲氧羰基-L-缬氨酸/N-芴甲氧羰基-L-缬氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-L-缬氨酸/Fmoc-L-valine 质量规格：>99%,BR 包装;25g

CBZ-D-缬氨酸/苄氧羰基-D-缬氨酸/CBZ-D-Valine 质量规格：HPLC>98%,标准品 包装;500g

L-缬氨酸甲酯盐酸盐/H-Val-OMe•HCl 质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养 包装;5g
古柏线虫通用PCR检测试剂盒Bacillus│mojavensis 中文名称：摩加夫芽孢杆菌种属:Bacillus│mojavensis分离基物:土壤样品提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法；矿物油法 纯度：D,98%

Burkholderia│sp. 中文名称：伯克霍尔德氏菌种属:Burkholderia│sp.提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：>95.0%(GC)

Arthrobacter│citreus 中文名称：柠檬节杆菌种属:Arthrobacter│citreus分离基物:土壤样品提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法；矿物油法 纯度：>95.0%(GC)

Clavibacter│michiganensis 中文名称：密执安棍状杆菌种属:Clavibacter│michiganensis分离基物:土壤样品提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法；矿物油法 纯度：93%

Pseudomonas│trivialis 中文名称：平凡假单胞菌种属:Pseudomonas│trivialis分离基物:土壤样品提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法；矿物油法 纯度：93%

Arthrobacter│aurescens 中文名称：金黄节杆菌种属:Arthrobacter│aurescens分离基物:土壤样品提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法；矿物油法 纯度：98%

Arthrobacter│nitroguajacolicus 中文名称：硝基癒疮木胶节杆菌种属:Arthrobacter│nitroguajacolicus分离基物:土壤样品提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法；矿物油法 纯度：98%

Bacillus│vallismortis 中文名称：死谷芽孢杆菌种属:Bacillus│vallismortis分离基物:土壤样品提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法；矿物油法 纯度：98%