产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:嗜血杆菌通用PCR检测试剂盒说明书 英文名称:Haemophilus spp.PCR 编号:HE31053-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 人参皂苷Rg1/人参皂甙Rg1/Ginsenoside Rg1 质量规格:≥3TIU/mg,进分,来源: 牛肺或牛胰 包装;1g 人参皂苷Rg2/人参皂甙Rg2/Ginsenoside Rg2 质量规格:>98%,BR 包装;25g 人参皂苷Rg3/人参皂甙Rg3/Ginsenoside Rg3 质量规格:>98%,BR 包装;5g 人参皂苷Re/人参皂甙Re/Ginsenoside Re 质量规格:BR,4000u/g 包装;1g 人参皂苷Rc/人参皂甙Rc/Ginsenoside Rc 质量规格:1500USP u/mg,猪源 包装;25g 人参皂苷Rd/人参皂甙Rd/Ginsenoside Rd 质量规格:95%,美国进口原装 包装;5g 人参皂苷Rf/人参皂甙Rf/Ginsenoside Rf 质量规格:>45 U/mg,进分 包装;25g 人参皂苷Rh1/人参皂甙Rh1/Ginsenoside Rh1 质量规格:美国*7-15 units/mg,来源于地衣芽孢杆菌 包装;5g 人参皂苷Rh2/人参皂甙Rh2/Ginsenoside Rh2 质量规格:>98%,BR 包装;25g 柚皮苷/柚甙/橙皮甙/柚皮素-7-鼠李葡萄糖苷/柚苷/柑桔苷/柚皮甙/7-[[2-O-(6-脱氧-A-L-甘露吡喃基)-B-D-葡萄吡喃基]氧代]-2,3-二氢-5-羟基-2-(4-羟苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮/Naringin 质量规格:>98%,标准品 包装;5g 川陈皮素/川皮亭/蜜橘黄素/陈黃皮酮/5,6,7,8,3'4'-六甲氧基黄酮/川皮苷/Nobiletin 质量规格:>90%,罗氏分包 包装;100g 烟碱/尼古丁/1-甲基-2-(3-吡啶基)吡咯烷/(-)-Nicotine 质量规格:>98%,BR 包装;25g 丹参素钠/3-(3',4'-二羟基苯基)乳酸钠/Sodium Danshensu 质量规格:30 units/mg 包装;500g 葛根黄酮/葛根素/8-β-D-葡萄吡喃糖-4',7-二羟基异黄酮/黄豆甙元-8-葡萄糖甙/葛根提取物/Puerarin 质量规格:20000U/g,BR 包装;5g 柴胡皂苷A/柴胡皂甙A/Saikosaponin A 质量规格:BR,6万U/G 包装;1g 柴胡皂苷B1/柴胡皂甙B1/Saikosaponin B1 质量规格:>95%,BR,M.W:80万-150万 包装;100g 柴胡皂苷C/柴胡皂甙C/Saikosaponin C 质量规格:>95%,BR,M.W:3000 包装;25g 嗜血杆菌通用PCR检测试剂盒说明书Bacillus│sonorensis 中文名称:索诺拉沙漠芽孢杆菌种属:Bacillus│sonorensis分离基物:样/表层海提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:有机污染物降解菌/降解二苯并噻吩培养方法培养基:472生长条件:28-50℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Donghicola│eburneus 中文名称:白栖东海菌种属:Donghicola│eburneus分离基物:样/表层海提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:有机污染物降解菌/石油烃类降解菌培养方法培养基:821生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥98% Sphingobium│sp. 中文名称:鞘氨醇菌种属:Sphingobium│sp.分离基物:样/深海底层样提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:潜在的有机污染物降解菌/分离自多环芳烃(PAHs)富集菌群培养方法培养基:471生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Aquimonas│voraii 中文名称:沃氏单胞菌种属:Aquimonas│voraii分离基物:沉积物/表层沉积物提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:潜在的有机污染物降解菌/分离自苯酚降解菌群培养方法培养基:33生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Tistrella│mobilis 中文名称:运动替斯崔纳菌种属:Tistrella│mobilis分离基物:样/深海底层样提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:潜在的有机污染物降解菌/分离自多环芳烃(PAHs)富集菌群培养方法培养基:471生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Psychrobacter│submarinus 中文名称:海底嗜冷杆菌种属:Psychrobacter│submarinus分离基物:沉积物/表层沉积物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:微生物/低温微生物培养方法培养基:471生长条件:15-20℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Brochothrix│thermosphacta 中文名称:热杀索丝菌种属:Brochothrix│thermosphacta分离基物:土壤/南极土壤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:待定培养方法培养基:33生长条件:20-25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Hafnia│paralvei 中文名称:哈夫尼菌种属:Hafnia│paralvei分离基物:土壤/南极土壤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:极地细菌培养方法培养基:33生长条件:20-25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |