曼那角病毒PCR检测试剂盒说明书

特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
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服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
钩藤碱英文名称 Eudesmin分 子 量： 386.43824CAS NO.： 526-06-7纯 度： ≥98%分子式： C22H26O6性状: 白色结晶粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂提取来源: 菊科植物艾纳香药理药效: 结核菌抑制剂(in vitro)；钙拮抗(荷兰猪,结肠带)鉴别方法: NMR；Ms检测方法: HPLC: 乙腈-水（56∶44,V/V）,流速为1.0 ml/L,检测波长为221 nm贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 补充中

钩吻碱英文名称 Carabrone分 子 量： 248.3175CAS NO.： 1748-81-8纯 度： ≥98%分子式： C15H20O3性状: 无色液体规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源:药理药效:鉴别方法: NMR；Ms检测方法: HPLC贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项:

钩吻素己英文名称 Dihydrotanshinone I分 子 量： 278.3CAS NO.： 87205-99-0纯 度： ≥98%分子式： C18H14O3性状: 红褐色针状结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 213~215℃溶解性: 易溶于乙醇，丙酮，，苯等有机溶剂，微溶于水。提取来源: 唇形科植物丹参药理药效: 具有抗菌活性。对金黄色葡萄球菌209 P 的抑菌卷直径为23mm(滤纸片法), 对人型结核杆菌 H↓37RV ******抑菌浓度为1.5μg/ml。对溶血性链球菌也有一定抑制作用鉴别方法: NMR; MS检测方法: 采用HP Hypersil ODS柱(250×4.0nm,5μm) ,丹参酮I为乙腈-水(50∶50),流速0.8ml/min,柱温控制37℃,检测波长 254nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

钩吻素子英文名称 Ardisiacrispin A分 子 量： 1061.22CAS NO.： 23643-61-0纯 度： ≥98%分子式： C52H84O22性状: 粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 238-239℃溶解性: 补充中提取来源: 紫金牛科的朱砂根、百两金等药理药效: 收缩子宫作用，对cAMP磷酸二酯酶呈强的抑制作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

枸橘苷英文名称 Taxifolin分 子 量： 304.25CAS NO.： 480-18-2纯 度： ≥98%分子式： C15H12O7性状: 淡黄色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 208-210℃溶解性: 易溶于乙醇、乙酸、沸水，稍溶于冷水，几乎不溶于苯。提取来源: 松科植物花旗松药理药效: 抗癌：对小鼠白血病P388有活性，150和100mg/kg的生命延长率分别为40%和37%。抗菌：对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌和伤寒杆菌有较强的抑菌作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: Agilent Zorbax-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-0.1%磷酸水(40∶60)为流动相;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长290 nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

枸橼酸英文名称 Oleanolic acid分 子 量： 456.7CAS NO.： 508-02-1纯 度： ≥98%分子式： C30H48O3性状: 白色针晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 308℃～310℃溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、苯、、丙酮和，几乎不溶于水。提取来源: 木犀科植物齐墩果 olea europaea l.的叶药理药效: 具有护肝降酶、促进肝细胞再生、抗炎、强心、利尿、抗肿瘤等作用，还具有降血糖、降血脂、镇静的作用，是开发治疗肝病和降血糖等药物有效成分。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 色谱柱为Phenomenex Luna C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为甲醇-0.1%磷酸（70:30）;流速1.0 mL•min-1;检测波长: 205 nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

构树碱A英文名称 luteolin-6-C-glucoside分 子 量： 448.38CAS NO.： 4261-42-1纯 度： ≥98%分子式： C21H20O11性状: 黄色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 237-239℃溶解性: 补充中提取来源: 使君子科小花风车子的叶，葫芦科异株泻根的地上部分，龙胆科日本当药的全草等。药理药效: 保肝作用，抗病毒活性，抗过氧化作用，解焦虑作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: HPLC法，C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水-乙酸(22:78:1),流速1.0 mL/min,检测波长270 nm.贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

古伦宾英文名称 Peimine分 子 量： 431.65CAS NO.： 23496-41-5纯 度： ≥98%分子式： C27H45NO3性状: 白色针状结晶（甲醇）规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 222-225℃溶解性: 易溶于甲醇、乙醇、等有机溶剂。提取来源: 贝母类药材。药理药效: 具有清热散结，化痰止咳之功效。鉴别方法: NMR; MS检测方法: HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流动相为甲醇- 乙腈-0.5% 醋酸溶液（8：19：73），蒸发光散射检测器。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

骨化二醇英文名称 Isoacteoside分 子 量： 624.59CAS NO.： 61303-13-7纯 度： ≥98%分子式： C29H36O15性状: 白色结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于乙醇、甲醇、醋酸乙酯、DMSO，不溶于石油醚等溶剂。提取来源: 列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C. Ma的干燥带鳞叶的肉质茎药理药效: 具有免疫调节、抗氧化、增强体力、抗疲劳等药理作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 色谱柱为C18 ODS柱 ;流动相为乙腈 - 1 .5 %乙酸溶液,其中乙腈线性梯度 11.5 %～20 %(0～25 min) ;检测波长 335 nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无
曼那角病毒PCR检测试剂盒说明书Streptomycin Sulfate 硫酸链霉素英文名称: Streptomycin SulfateCAS: 3810-74-0英文名称: Naphthalen-2-yl acetateCAS: 1523-11-1

Epibrassinolide  24-表油菜素内酯别名: 24-Epibrassinolide;B1105;BP55；24-表油菜素内酯 英文名称: EpibrassinolideCAS: 1912-24-9分子式: C8H14ClN5

Guanidine (hydrochloride)  盐酸胍别名: Guanidinium chloride;Aminoformamidine HydrochlorideCAS: 50-01-1CAS: 86-81-7分子式: C10H12O4

X-GAL  5-溴-4氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷别名: BCIGCAS: 7240-90-6CAS: 174501-64-5分子式: C8H15N2F6P

Hoechst 33258  NO33258 荧光染料别名: 赫斯特荧光染料 33258；bisBenzimide H 33258;H 33258;Hoechst33258;Hoechst-33258英文名称: Hoechst 33258CAS: 25013-16-5分子式: C11H16O2

PNPP  对硝基苯磷酸二钠盐CAS: 4264-83-9纯度: ≥98%分子量: 156.14纯度: 98%

NADH (disodium salt)  还原型辅酶Ⅰ二钠别名: Disodium NADHCAS: 606-68-8分子量: 325.12储存条件: -20℃

Fluo-3AM  钙离子探针别名: Fluo-3-pentaacetoxymethyl esterCAS: 121714-22-5储存条件: 常温，避光防潮密闭干燥纯度: 98%,BR