产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:眼蜱通用PCR检测试剂盒规格 英文名称:Hyaloma spp.PCR 编号:HE31112-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 乳糖发酵管 包装;5mg 1% NaC1乳糖发酵管 包装;100ml 3% NaC1乳糖发酵管 包装;500ml 3.5% NaC1乳糖发酵管 包装;100mg 5%乳糖发酵管 包装;1g 1% NaC1阿拉伯糖发酵管 包装;25g 3% NaC1阿拉伯糖发酵管 包装;5g 3.5% NaC1阿拉伯糖发酵管 包装;5g 1% NaC1蔗糖发酵管 包装;100g 3% NaC1蔗糖发酵管 包装;500g 3.5% NaC1蔗糖发酵管 包装;100ml 甘露醇发酵管 包装;250ml 1% NaC1甘露醇发酵管 包装;100g 3% NaC1甘露醇发酵管 包装;500g 3.5% NaC1甘露醇发酵管 包装;100g 1% NaC1纤维二糖发酵管 包装;25g 1% NaC1甘露糖发酵管 包装;10mg 眼蜱通用PCR检测试剂盒规格 溴甲酚绿有效期: 2年以上溶解性: 0.1g/100mL Water来源: 合成别名: 溴甲酚蓝;四溴间甲酚磺酚酞;3,3′,5,5′-四溴间甲酚磺酸酚酞 2,4,6-三吡啶基三嗪有效期: 2年溶解性: 100mg/mL in MeOH别名: 2,4,6-三(2-吡啶基)三嗪英文名称: TPTZ 乙二胺四乙酸锌钠盐水合物别名: 乙二胺四乙酸二钠锌盐;乙二胺四乙酸锌钠盐;乙二胺四乙酸锌二钠盐;EDTA锌钠盐;四水合乙二胺四乙酸二钠锌盐;乙二胺四乙酸二钠锌盐(四水);ZincDisodiumEdta;英文名称: Zinc Disodium EdtaCAS: 14025-21-9分子式: C10H12N2Na2O8Zn.xH2O 无水氯化锂有效期: 2年级别: Biotech Grade溶解性: 1.4g/mL in water英文名称: Lithium chloride 活性炭粉有效期: 5年 级别: AR来源: 椰子壳英文名称: Charcoal 铬黑T有效期: 2年溶解性: 10 mg/mL in water别名: 依来铬黑T;羊毛铬黑T;媒介黑T;酸性媒介黑T;1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠;EriochromeblackT;英文名称: Eriochrome black T Bilirubin 胆红素有效期: 2年级别: 医药级溶解性: 1mg/ml CHcl3来源: 猪胆红素 2,6-二叔丁基对甲酚有效期: 2年溶解性: 100mg/ml in EtOH英文名称: 2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenolCAS: 128-37-0 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |