特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！ 产品名称 | 巴尔通体通用探针法荧光PCR检测试剂盒 | 英文名称 | Bartonella spp. | 货号 | YSP96429 |
荧光染料的优点：
产品仅用于科研使用简便；
可以与任何PCR产物结合；
价格便宜；
荧光染料的缺点：
不能区分不同的双链DNA
引物二聚体会影响检测的敏感性
非特异性产物会影响结果的敏感性
引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别，进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。总的来说，SYBR Green I方法是一种基础也的Real-time qPCR实验手段。
荧光探针：
Real-e qPCR中的荧光探针为TaqMan探针，其基本原理是依据目的基因设计合成一个能够与之特异性杂交的探针，该探针的5'端标记荧光基团，3'端标记淬灭基团。
正常情况下两个基团的空间距离很近，荧光基因因淬灭而不能发出荧光。PCR扩增时，引物与该探针同时结合到模板上，探针的结合位置位于上下游引物之间。
当扩增延伸到探针结合的位置时，Taq酶利用5'外切酶活性，将探针5'端连接的荧光分子从探针上切割下来，从而使其发出荧光。检测到的荧光分子数与PCR产物的数量成正比，因此，根据PCR反应体系中的荧光强度即可计算出初始DNA模板的数量。
TaqMan探针技术解决了荧光染料与非特异性扩增结合的问题，反应结束后无需通过熔解曲线检测，缩短了实验时间。
TaqMan探针技术的优点：
荧光背景低；
敏感性高；
杂交稳定性高；
荧光光谱分辨率好；
特异性高。
TaqMan探针技术的缺点：
成本高；
设计难度大；
只能用于检测产物长度低于150bp的反应。
由于TaqMan探针的高特异性，可用于等位基因的辨别，特别适用于人类基因多态性以及根据SNP区别和定量菌株。
PCR技术的定量原理：
扩增曲线
在Real- qPCR中，对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号，随着反应的进行，监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线，即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。
在Real-time qPCR扩增早期，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化，此时即为基线期。
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的，随着反应循环数的增加，终PCR反应不再以指数形式生成模板，从而进入“平台期”。在该时期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系，所以根据终的PCR产物量不能计算出初始模板量。
荧光定量PCR原理：
产品仅用于科研荧光定量PCR早称TaqMan PCR，后来也叫Real-Time PCR，是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理：随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。
一般而言，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段，荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化。而在平台期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系，根据终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段， PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便，在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念：荧光阈值和 CT值。
硫酸镍六水GFAP (D1F4Q) XP® Rabbit mAb2-吡啶甲酰肼 乙酸铵(分子生物学级)GFAP (D1F4Q) XP® Rabbit mAb2-羟基-5-乙酮 微晶纤维素(100 um)YAP (1A12) Mouse mAb5-溴-2-羟基乙酮 糖；α-糖,一水BNIP3L/Nix (D4R4B) Rabbit mAbBOC-L-焦谷氨酸乙酯 氯化钙二水Phospho-DNAJC2/MPP11 (Ser47) Antibody2-溴-5-氯甲 乙二Malic Enzyme 2 Antibody2-溴-3,5-二氯吡啶 硫酸镁七水(分子生物学级)PI3 Kinase Class II α (D3Q5B) Rabbit mAb1,二氢异并呋喃 糖化酶;葡萄糖淀粉酶SignalSilence® FLIP siRNA II2,4,5-三氟甲 乙酰Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)3,二氟甲酸乙酯 聚乙二4000SOS1 (D3T7T) Rabbit mAb1-BOC-氨甲基哌啶 无水酸氢二p44/42 MAPK (Erk1/2) Blocking Peptide (#4695 Specific)2-溴-6-氟吡啶 甲酰SignalSilence® p27 Kip1 siRNA II2,6-二氟- 聚乙二8000Immunofluorescence Blocking Buffer去甲托品盐酸盐 氯化锂(分子生物学级)PAX3 Antibody2,二氟氯 硫酸亚铁铵六水α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)溴-羟基甲酸 红四氮唑SignalSilence® UCHL1 siRNA II氨基 磺甲氧哒CARD9 Antibody氯代肟基乙酸乙酯 磺甲氧哒(标准品)CK1δ AntibodyL-(+)-环己基甘氨酸
巴尔通体通用探针法荧光PCR检测试剂盒豚鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒E2 tag E2 tag标签抗体100 ul 豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒HPV16 E7 proin 头瘤病毒16型E7抗体20 ul 豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒EAAT1/Glast 胶质细胞谷氨酸运载蛋白1抗体300 ul 豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒EAAT2 胶质细胞谷氨酸运载蛋白2抗体100 ul 豚鼠黄体激素(LH)ELISA试剂盒EAAT3 胶质细胞谷氨酸运载蛋白3抗体100 ul 豚鼠环酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒EBNA 3A EB病毒核抗原-3A抗体100 ul 豚鼠环酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒ECE1 内皮素转化酶1抗体100 ul 豚鼠过氧化脂质/过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒ECE2 内皮素转化酶2抗体300 ul 豚鼠钩端螺旋体IgG(Leptospira)ELISA试剂盒ECG2 食道癌相关基因抗体100 ul |
