产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:厌氧消化链球菌PCR检测试剂盒说明书 英文名称:Peptostreptococcus anaerobiusPCR 编号:HE31373-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 多聚- L- 赖氨酸(7- 15万 ) 25mg 有效期 2年级别 10 mg/mL in water别名 聚-L-赖氨酸 盐 多聚赖氨酸英文名称 Poly-L-lysine hydrobromideCAS 25988-63-0分子量 70,000-150,000储存条件 -20℃外观(性状) 白色冻干片状或团块单位 支多聚赖氨酸可以用于促进细胞的贴壁生长。 原理: 多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。培养瓶表面的性质对于细胞培养至关重要,细胞表面的糖蛋白(阴性)易于吸附在亲水性的表面上,因而细胞培养表面如果有相当含量的阳性电荷更能促进细胞吸附,这正是运用多聚赖氨酸优化细胞培养表面的重要所在。 多聚-L-赖氨酸(15-30万)(进口) 25mg 有效期 2年溶解性 10 mg/mL in water别名 聚-L-赖氨酸 盐 多聚赖氨酸英文名称 Poly-L-LysineCAS 25988-63-0分子量 150,000-300,000储存条件 -20℃外观(性状) 白色冻干粉末或纤维状单位 支Poly-L-lysine聚合物可用于促进细胞粘附到固体基质,用于科研实验。 原理: 多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。培养瓶表面的性质对于细胞培养至关重要,细胞表面的糖蛋白(阴性)易于吸附在亲水性的表面上,因而细胞培养表面如果有相当含量的阳性电荷更能促进细胞吸附,这正是运用多聚赖氨酸优化细胞培养表面的重要所在。 加拿大树胶 100ml 有效期 3年级别 For Microscopy别名 加拿大香脂;加拿大树脂;光学树脂胶;枞香胶;加拿大枞树香脂;加拿大树胶(韧性);加拿大香胶;加拿大松节油英文名称 CanadabalsamCAS 8007-47-4储存条件 RT加拿大树胶是浅黄至微绿色、粘性、透明、微有荧光的液体。有愉快香气。味苦。露置空气中渐变为固态的非结晶物质。能与苯、、二甲苯、乙酸乙酯和香柏油等混溶。溶于乙醇、、松节油和石油醚,不溶于水。相对密度0.987~0.994。折光率(n20D)1.52~1.54。 加拿大树胶主要用于生化研究。镜片及盖玻片胶粘,贴附显微镜标本。用作清漆。。加拿大树胶溶于二甲苯后,它的折光率是1.52,接近于玻璃的折光率(1.51),透明度很好,用以封片几乎无色,干后坚硬牢固,可长期保存。因此,它是封片常用的封藏剂。市售的加拿大树脂有浓液体和固体两种。如果是固体,可以在树胶中加入约相当于树胶体积一半量的二甲苯,放在温暖处,时常搅拌,促使树胶溶化。溶化后的较液浓度以胶液能沿玻璃棒一端顺利下流为宜(如果要封藏后使它干燥更快,可用苯代替二甲苯)。 防脱载玻片(氨基处理) 50片 英文名称 APS ( Amino Silane ) coated glass slide 柠檬酸钠抗原修复液(1×) 100ml 英文名称 Sodium Citrate Antigen Retrieval Solution,1×储存条件 RT,有效期1年外观(性状) 液体单位 瓶细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阴性染色结果。所以要求在进行免疫组化染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高检测的准确性。 柠檬酸钠抗原修复液(Citrate Antigen Retrieval solution,1×)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 厌氧消化链球菌PCR检测试剂盒说明书抗利尿激素/血管升压素/加压素/血管加压素抗体16-O-Methyl-14,15-didehydroisovincanol别名: 16-epi-O-Methyl-14,15-didehydrovincanol分子式: C20H24N2O性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 景东山橙;吲哚生物碱;中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库 ATP结合盒蛋白家族GCN20F家族1抗体5'-S-Methyl-5'-thioadenosine别名: 5'-Methylthioadenosine分子式: C11H15N5O3S性状: Powder纯度: 99.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 核苷;对照品;标准品;微生物代谢产物;天然产物;天然产物库 醛糖还原酶抗体Adenosine别名: 分子式: C10H13N5O4性状: Powder纯度: 98.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 核苷;对照品;标准品;微生物代谢产物;天然产物;天然产物库 人血清白蛋白抗体Neosnine别名: 分子式: C17H27NO2性状: Powder纯度: 97.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 镇咳剂;大百部;百部生物碱;植物提取物;天然产物;天然产物库 抗体(采用活疫苗制备)Triacetonamine别名: 2,2,6,6-tramethyl-4-piperidinone分子式: C9H17NO性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 三丙酮;中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库 活化转录因子4抗体N-Demethylechitamine别名: 分子式: C21H26N2O4性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 糖胶树;吲哚生物碱;中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库 腺苷激酶-1抗体Uracil别名: 分子式: C4H4N2O2性状: Powder纯度: 98.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 对照品;标准品;微生物代谢产物;天然产物;天然产物库 纤维状肌动蛋白抗体Neotuberosmonine别名: 分子式: C22H33NO4性状: Cryst.纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 镇咳剂;大百部;中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |