蛇形隐孢子虫探针法荧光PCR检测试剂盒

荧光定量PCR试剂盒技术：
产品仅用于科研本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

样品RNA的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．产品仅用于科研所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
四溴荧光素盐(>85.0%(HPLC))Phospho-FAK (Tyr576/577) Antibody2-溴-5-硝基-甲基吡啶

溶剂红 48(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-FAK (Tyr576/577) AntibodyN-基-哌啶酮

3,4,5,6-四氯荧光素Phospho-FAK (Tyr397) Antibody三氟

赤藓红B(>95.0%(E))Phospho-FAK (Tyr925) AntibodyL-谷氨酸二甲酯盐酸盐

结晶紫九水合物(>95.0%(T))Phospho-FAK (Tyr925) Antibody溴-羟基

四()酸(>98.0%(HPLC)(W))FAK Antibody1-(氨基基)吡咯烷

2-氨基白啶氢溴化物(>98.0%(T))FAK Antibody荧光素

CPC一水合物(=西吡氯铵一水合物)(>98.0%(HPLC)(T))GPX1 (C8C4) Rabbit mAb2,5-二溴吡

MDEPAP [=化1-甲基-(二乙氨基偶氮)吡啶盐](>95.0%(HPLC)(N))ROS1 (D4D6®) Rabbit mAb间三氟乙

邻甲酚酞络合钠盐ROS1 (D4D6®) Rabbit mAb2-溴代异丁酸甲酯

百里酚酞氨羧络合剂EEA1 (C45B10) Rabbit mAb四氢-2H-吡喃-酮

钙黄绿素蓝(>98.0%(T))EEA1 (C45B10) Rabbit mAb氟-三氟

甲基二甲酚蓝(>85.0%(HPLC))5-Lipoxygenase (C49G1) Rabbit mAb溴-2-酚

1,2-双(2-氨基氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸(>97.0%(HPLC))Endoglin Antibody (Mouse Specific)溴-甲酸甲酯

反-1,2-环己二四乙酸一水合物(>99.0%(T))Phospho-Pyk2 (Tyr402) Antibody氨基-氟甲酸

二亚乙基三五乙酸(>98.0%(T))Pyk2 Antibody1-溴-2,4,6-三氟

1,2-二氨基烷-N,N,N',N'-四乙酸(>98.0%(T))Annexin A1 (D5V2T) XP® Rabbit mAbN-BOC-O-苄基-L-丝氨酸

1,二氨基-2--N,N,N',N'-四乙酸(>98.0%(T))Annexin A1 (D5V2T) XP® Rabbit mAb8-氨基异喹啉
蛇形隐孢子虫探针法荧光PCR检测试剂盒抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒X proin (C-rminus)  抗乙肝病毒X蛋白抗体（C端）300 ul

抗链球菌溶血素O抗体(IgG)ELISA试剂盒Profilin 2  前纤维蛋白2抗体100 ul

抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒Proin G  重组蛋白G抗体100 ul

抗酸性酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒Proin A  重组蛋白A抗体20 ul

抗抗体(AsAb)ELISA试剂盒RAM-11  RAM-11抗体300 ul

抗甲状腺素(T4)抗体(IgG)ELISA试剂盒RAMP-1  受体活性修饰蛋白1抗体100 ul

抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒RACK1  受体激活蛋白激酶C1抗体100 ul

抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒PRMT1  蛋白质精氨酸甲基转移酶1抗体100 ul

抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA试剂盒PRCP  脯氨酰羧肽酶抗体20 ul