匙状*毛样线虫PCR检测试剂盒说明书

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

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使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
乌苯美司英文名称 β-demonic acid分 子 量： 454.68CAS NO.： 28282-25-9纯 度： ≥98%分子式： C30H46O3性状: 白色晶体规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于、甲醇提取来源: 橄榄科植物卡氏乳香树药理药效: 对白血病细胞HL-60具有细胞生长抑制作用鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

乌金苷英文名称 Tenacissoside G分 子 量： 792.95CAS NO.： 191729-43-8纯 度： ≥98%分子式： C42H64O14性状: 无色针晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 117-119℃溶解性: 溶于甲醇、丙酮、DMSO，不溶于石油醚等溶剂。提取来源: 萝藦科牛奶菜属植物通关藤 Marsdenia tenacissima (Roxb.) Wight et Arn.药理药效: 具有平喘、降压及抑制肺炎球菌和流感杆菌。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

英文名称 4-Hydroxyisoleucine分 子 量： 147.17CAS NO.： 781658-23-9纯 度： ≥98%分子式： C6H13NO3性状: 白色结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 202~205℃溶解性: 可溶于稀酸、稀碱溶液。提取来源: 豆科植物戎芦巴Trigonella foenum-graecum L.的种子药理药效: 抗糖尿病和降胆固醇。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

乌头原碱英文名称 Oleanolic acid - 3-O-β-D- Galactosyl( 1→3)-β-D-glucosyl( 1→3)-α-L-rhamnosyl(1→2)-α-L-arabinoside分 子 量： 1059.24CAS NO.： 补充中纯 度： ≥98%分子式： C53H86O21性状: 白色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于甲醇提取来源: 白头翁药理药效: 不明鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

乌药醇英文名称 Tangeretin分 子 量： 372.38CAS NO.： 481-53-8纯 度： ≥98%分子式： C20H20O7性状: 黄色晶体规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于甲醇、DMSO等溶剂。提取来源: 芸香科川橘 Citrus nobilis果皮药理药效: 具有显著的抗真菌活性。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水(体积比30∶30∶40),流速1.0 mL.min-1,检测波长342 nm;柱温为室温(25℃)。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

乌药碱英文名称 Hupehenine分 子 量： 415.65CAS NO.： 98243-57-3纯 度： ≥98%分子式： C27H45NO2性状: 无色针晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 181～182℃溶解性: 可溶于酸性溶液，不溶于石油醚、等溶剂。提取来源: 百合科(Liliaceae) 梭砂贝母 Fritillaria delavayi Franch.药理药效: 清热润肺,化痰止咳。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

乌药醚内酯英文名称 Cucurbitacin Ⅱb分 子 量： 520.71CAS NO.： 50298-90-3纯 度： ≥98%分子式： C30H48O7性状: 无色针晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 155～157℃溶解性: 可溶于石油醚、、乙酸乙酯，不溶于水。提取来源: 葫芦科雪胆属植物雪胆Hemsleya amabilis Diels块根药理药效: 抑菌作用、消炎、解热作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: ELSD检测，乙腈：水=20：95贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

乌药内酯英文名称 Lannaconitine分 子 量： 584.64CAS NO.： 32854-75-4纯 度： ≥98%分子式： C32H44N2O8性状: 白色晶体规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于酸性溶液，不溶于石油醚、等溶剂。提取来源: 毛莫科乌头属植物草乌（Aconitum kusnezoffii Reichb）药理药效: 具有强效镇痛、降温消热、抗炎消热、增强免疫力等作用，主要用于癌痛、头痛、牙痛、肩臂痛、颈椎痛、腰痛、结石痛、外伤疼痛、风湿痛、胃肠溃疼痛、神经疼痛、坐骨神经痛、妇炎症引发的各种疼痛、术后疼痛。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 方法采用Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.01 mol.L-1磷酸二氢钠(80∶20)为流动相,检测波长252 nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

吴茱萸次碱英文名称 Lucidenic acid L分 子 量： 474.59CAS NO.： 补充中纯 度： ≥98%分子式： C27H38O7性状: 黄色粉末或结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于甲醇，提取来源: 灵芝Ganoderma lucidum药理药效: 具有明显降低胆固醇、提高淋巴细胞、巨噬细胞的活性、降低因半乳糖胺及丙酸杆菌造成的转氨酶升高鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无
匙状*毛样线虫PCR检测试剂盒说明书磷化细胞凋亡信号调节激酶1抗体6-Ethoxydihydrosanguinarine别名: 分子式: C22H19NO5性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品；中药标准品；植物提取物；天然产物；天然产物库

磷化活化复制因子2抗体Dehydrocorydaline别名: 脱氢紫堇碱; 脱氢延胡索碱分子式: C22H24NO4性状: Yellow powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 抑制胃分泌；抗溃疡；延胡索；小檗碱；中药对照品；中药标准品；植物提取物；天然产物；天然产物库

磷化钠钾ATP酶蛋白a1抗体Corynoline别名: 分子式: C21H21NO5性状: Powder纯度: 98.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品；中药标准品；植物提取物；天然产物；天然产物库

磷化钠钾ATP酶蛋白a1抗体Crassicauline A别名: Bulleyaconitine A分子式: C35H49NO10性状: Powder纯度: 97.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品；中药标准品；植物提取物；天然产物；天然产物库

乙酰辅酶A羧化酶抗体O-Nornuciferine别名: N-Methylasimilobine分子式: C18H19NO2性状: Yellow powder纯度: 98.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 中药对照品；中药标准品；植物提取物；天然产物；天然产物库

磷化乙酰辅酶A羧化酶抗体Stylopine别名: 分子式: C19H17NO4性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 小檗碱；中药对照品；中药标准品；植物提取物；天然产物；天然产物库

磷化Ack1抗体Neoline别名: Bullatine B分子式: C24H39NO6性状: Powder纯度: 97.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 乌头属；乌头生物碱；中药对照品；中药标准品；植物提取物；天然产物；天然产物库

磷化腺苷单磷活化蛋白激酶α1抗体Skimmianine别名: 分子式: C14H13NO4性状: Powder纯度: 98.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 抗炎；茵芋；喹啉生物碱；中药对照品；中药标准品；植物提取物；天然产物；天然产物库