产品名称:巴氏阿米巴原虫PCR检测试剂盒说明书 英文名称:Balamuthia mandrillarisPCR 编号:HE30681-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 DNA甲基转移酶1试剂盒 质量规格:>97%,BR 包装;200mg DnaJ同源亚科B成员1试剂盒 质量规格:>97%,BR 包装;1g Dickkopf 3试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;250mg Dickkopf 1试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;5g Dicer-1 elisa试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;50MG DAB2互作蛋白试剂盒 质量规格:BR 包装;1g C型凝集素结构域家族4成员E试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;250mg C肽试剂盒 质量规格:BR 包装;5g C多肽试剂盒 质量规格:商品级 包装;1g CXC趋化因子受体7试剂盒 质量规格:>97%,BR 包装;5g CXC趋化因子受体4试剂盒 质量规格:>99%,BR 包装;1g CXC趋化因子受体3试剂盒 质量规格:>99%,BR 包装;5g CXC趋化因子配体16试剂盒 质量规格:>99.5%,BR 包装;50mg c-sis elisa试剂盒 质量规格:>99%,BR 包装;10g Corin elisa试剂盒 质量规格:>99.5%,BR 包装;50g COP9 结构光形态发生同源物亚基2试剂盒 质量规格:纯度(铜):52.5~56.5% 包装;25g COLL2-1NO2 elisa试剂盒 质量规格:>99%,BR 包装;1g 巴氏阿米巴原虫PCR检测试剂盒说明书Aspergillus│flavus 中文名称:黄曲霉种属:Aspergillus│flavus提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:用于黄麻发酵,使麻软化。培养方法培养基:CM0085生长条件:28-30℃存储条件:定期移植法;其他 纯度:98% Aspergillus│terreus 中文名称:土曲霉种属:Aspergillus│terreus提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:衣康酸。培养方法培养基:CM0085生长条件:28-30℃存储条件:定期移植法;其他 纯度:98% Penicillium citrnum Thom 中文名称:桔青霉种属:Penicillium citrnum Thom提供形式:冻干管,斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:产磷酸二脂酸培养方法培养基:Czapek's 琼脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏 1.0 L,pH 6.0-6.5传代方法①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌或培养基:充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。生长条件:25-26℃,好氧存储条件:2-8℃冷藏,冻干管10年以上,斜面1-3个月。 纯度:98% Mucor│mucedo 中文名称:大毛霉种属:Mucor│mucedo提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:豆腐乳。培养方法培养基:CM0014生长条件:28-32℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:97% Mucor│wutungkiao 中文名称:五通桥毛霉种属:Mucor│wutungkiao提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:腐乳。培养方法培养基:CM0077生长条件:15-25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥99% Aspergillus│candidus 中文名称:亮白曲霉种属:Aspergillus│candidus分离基物:酶曲提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:糖化淀粉用。培养方法培养基:CM0085生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98% Trichoderma│koningii 中文名称:康宁木霉种属:Trichoderma│koningii分离基物:腐木提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:以蔗渣、秸秆、农副产品、工厂纤维素废渣为底物纤维素霉曲(即纤曲),酶解粗饲料。培养方法培养基:CM0014生长条件:28-30℃存储条件:定期移植法;其他 纯度:97% RhizopuschinensisSaito 中文名称:中华根霉种属:RhizopuschinensisSaito提供形式:冻干粉安全等级:1模式菌株:no应用领域:产果胶酶。培养方法培养基:综合PDA:20%马铃薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,琼脂 15g,pH 自然。生长条件:25-28℃,好氧 纯度:97% |