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海豹分支杆菌PCR检测试剂盒说明书

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更新日期:
2020-11-11
点击次数:
399
产品特点:
海豹分支杆菌PCR检测试剂盒说明书实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
  50T海豹分支杆菌PCR检测试剂盒说明书的详细资料:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

 海豹分支杆菌PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 Mycobacterium pinnipediiPCR

 货号

 HE31253-R

实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建


特点优势:
    1.   特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
    2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
    3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
尿苷英文名称 L-Theanine分 子 量: 174.2CAS NO.: 3081-61-6纯 度: ≥98%分子式: C7H14N2O3性状: 白色结晶粉末规格: 10mg/20mg/50mg,可按客户需求包装!用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 202-205℃溶解性: 不溶于乙醇、,易溶于水。提取来源: 山茶科植物茶树Camellia sinensis药理药效: 降血压、改善记忆力、抗疲劳作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 色谱柱: Prevail C18( 250 mm × 4.6 mm, 5μm) ,流动相: 0. 15%三( 含0. 06%七氟丁酸) 水溶液-乙腈溶液( 88∶12) ,流速: 0.8 ml /min,检测器: ELSD 2000,漂移管温度: 111 ℃,气体流量: 2. 8 L/min,进样量: 25 μl。贮存条件: 低温冷藏,避光,密封,干燥注意事项: 无

尿嘧啶英文名称 2-Caffeoyl-L-tartaric acid分 子 量: 312.23CAS NO.: 67879-58-7纯 度: ≥98%分子式: C13H12O9性状: 白色晶体规格: 10mg/20mg/50mg,可按客户需求包装!用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 1123~ 125℃溶解性: 可溶于甲醇、DMSO等溶剂。提取来源: 菊科紫锥菊属植物紫锥菊( E chinacea pur purea ( L . ) Moench)药理药效: 有抗细菌、 抗病毒、 抗肿瘤、 抗真菌和抗炎活性。鉴别方法: NMR; MS检测方法: C18柱,流动相: A(乙腈 )-B ( 0.1%磷酸溶液 ),梯度洗脱,检测波长: 330 nm贮存条件: 低温冷藏,避光,密封,干燥注意事项: 无

尿囊素英文名称 Yubeinine分 子 量: 429.64CAS NO.: 补充中纯 度: ≥98%分子式: C27H43NO3性状: 白色粉末或晶体规格: 10mg/20mg/50mg,可按客户需求包装!用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于甲醇、提取来源: 伊贝母药理药效: 有镇咳作用鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏,避光,密封,干燥注意事项: 无

尿素英文名称 补充中分 子 量: 323CAS NO.: 补充中纯 度: ≥98%分子式: C19H18O5性状: 补充中规格: 10mg/20mg/50mg,可按客户需求包装!用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 补充中提取来源: 补充中药理药效: 补充中鉴别方法: NMR; MS检测方法: H2O:CH3OH(25:75)ODS柱 检测波长 270nm贮存条件: 低温冷藏,避光,密封,干燥注意事项: 无

柠檬苦素英文名称 liriodenine分 子 量: 313.39CAS NO.: 6801-40-7纯 度: ≥98%分子式: C19H23NO3性状: 白色粉末规格: 10mg/20mg/50mg,可按客户需求包装!用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于甲醇、DMSO、水提取来源: 厚朴药理药效: 补充中鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏,避光,密封,干燥注意事项: 无

柠檬酸英文名称 Pungiolide A分 子 量: 508CAS NO.: 130430-97-6纯 度: ≥98%分子式: C30H36O7性状: 白色晶体规格: 10mg/20mg/50mg,可按客户需求包装!用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于、丙酮、乙醇,不溶于石油醚。提取来源: 菊科植物苍耳Xanthium sibiricum干燥成熟带总苞的果实药理药效: 抗菌、消炎作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏,避光,密封,干燥注意事项: 无

牛蒡酚H英文名称 Silicristin分 子 量: 482.44CAS NO.: 33889-69-9纯 度: ≥98%分子式: C25H22O10性状: 类白色晶体规格: 10mg/20mg/50mg,可按客户需求包装!用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 174~176℃溶解性: 可溶于吡啶、甲醇、DMSO等溶剂,不溶于石油醚、。提取来源: 菊科植物水飞蓟[Sily-bum marianum (L.)Gaertn.(Carduus mari-anus L.)]的果实药理药效: 抗肝毒素、促进肝细胞修复、抗肿瘤、降血脂。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏,避光,密封,干燥注意事项: 无

牛蒡子苷英文名称 Jatropholone B分 子 量: 296CAS NO.: 71386-38-4纯 度: ≥98%分子式: C20H24O2性状: 淡黄色固体规格: 10mg/20mg/50mg,可按客户需求包装!用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于、乙酸乙酯、丙酮等有机溶剂,不溶于水。提取来源: 大戟科植物麻疯树Jatropha curcas L.的根皮药理药效: 具有一定的抗癌、杀菌活性。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏,避光,密封,干燥注意事项: 无

牛蒡子苷元英文名称 Scabioside C分 子 量: 766CAS NO.: 17233-22-6纯 度: ≥98%分子式: C41H66O13性状: 白色晶体规格: 10mg/20mg/50mg,可按客户需求包装!用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于甲醇、乙腈、乙醇等溶剂,不溶于石油醚。提取来源: 毛莨科植物白头翁Pulsatilla chinensis (Bunge) Regel.药理药效: 抗肿瘤,保肝利胆作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏,避光,密封,干燥注意事项: 无
海豹分支杆菌PCR检测试剂盒说明书Cefradine  头孢拉定别名: Cephradine;Velocef;SQ-11436CAS: 38821-53-3分子量: 135.05储存条件: RT

PI 3-激酶抑制剂 (PI-103)英文名称: PI 3-Kinase Inhibitor (PI-103) CAS: 371935-74-9分子量: 518.81储存条件: RT

DTE  二硫赤藓糖醇别名: Dithioerythritol;Cleland’s reagentCAS: 6892-68-8分子量: 140.57储存条件: 充氩保存

misartan  替米沙坦别名: BIBR 277;Micardis;Pritor;dayCAS: 144701-48-4分子量: 358.37储存条件: RT

p-Aminosalicylic acid (sodium salt dihydrate)  对氨基水杨酸钠CAS: 6018-19-5纯度: ≥98%储存条件: RT外观(性状): 类白色或黑灰色粉末

Itraconazole  伊曲康唑别名: Oriconazole;R51211;SporanoxCAS: 84625-61-6分子量: 249.08储存条件: 密封保存

5-(6-喹喔啉亚甲基)-2,4-噻唑啉二酮英文名称: PI 3-Kinase Inhibitor (AS605240)CAS: 648450-29-7分子量: 106.12储存条件: RT

Schisandrol A  五味子醇甲别名: Schizandrol;Schizandrol-A;Wuweizi alcohol-A;Wuweizichun-ACAS: 7432-28-2分子量: 230.3纯度: 99%

 

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