即肠道病毒型PCR检测试剂盒说明书

特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
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服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
偶氮氯膦Ⅳ/偶氮氯磷Ⅳ/CPA-Ⅳ 质量规格：效价测定 包装;25g

偶氮氯膦mA/2-(4-氯-2-膦酸基苯偶氮)-7-(3-乙酰基苯偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸/CPA-mA 质量规格：效价测定 包装;5g

偶氮氯膦mN/2-(4-氯-2-膦酸基苯偶氮)-7-(3-偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸/CPA-mN 质量规格：效价测定 包装;1g

孔雀绿草酸盐/孔雀石绿草酸盐/碱性绿4/Malachite green oxalate 质量规格：>98%,BR 包装;25g

孔雀绿/孔雀石绿/碱性孔雀石绿/品绿/绿/盐基块绿/严基块绿/块绿/中国绿/维多利亚绿G/氢氧化铬绿/碱性艳绿4B/氢氧化铬绿色颜料/维多利亚绿/耐晒绿/颜料绿18/Malachite green 质量规格：HPLC≥97%,标准品 包装;5g

固蓝B盐/坚牢蓝B盐/重氮蓝B盐/蓝光重氮色盐蓝/氯化四氮邻二甲氧基/牢固兰B盐/耐晒兰B锌盐/坚固兰B盐/坚蓝B锌盐/Fast Blue B salt 质量规格：HPLC≥98%,标准品 包装;25g

邻联茴香胺/联大茴香胺/二甲氧联/3,3′-二甲氧基-4,4′-二氨基联苯/3，3-二甲氧基联/3,3'-二甲氧基-1,1'-联苯-4,4'-二胺/邻二茴香胺/1,4-二叠氮双环[2.2.2]辛烷;三乙基二胺/联甲氧基/邻联大茴香胺/3,3'-Dimethoxybenzidine 质量规格：检查 包装;5g

邻联茴香胺盐酸盐/联大茴香胺盐酸盐/3,3’-二甲氧基联盐酸盐/联大回香胺盐酸盐/快蓝B/二盐酸邻联茴香胺/3,3’-二甲氧基-(1,1’-联苯基)-4,4’-二胺/邻联大茴香胺盐酸盐/盐酸-3，3′-二甲氧基-4，4′-二氨基联苯/o-Dianisidine dihydrochloride 质量规格：HPLC法有关物质检查 包装;100g

苋菜红/酸性红27/萘酚红/偶氮品红S/1-（4′-磺基-1′-萘偶氮）-2-萘酚-3，6-二磺酸三钠盐/鸡冠花红/蓝光酸性红/对磺基萘偶氮-R-盐/食用色素红色2号/酸性苋菜红/食品红9/Amaranth 质量规格：含量 包装;25g

紫脲酸铵/氨基紫色酸/红紫酸铵/骨螺紫/紫尿酸胺/5，5′-次氮基二巴比土酸铵盐/5-((六氢-2,4,6-三氧代-5-嘧啶基)亚氨基)-2,4,6(1H,3H,5H)嘧啶三酮单铵盐/Murexide 质量规格：杂质检查 包装;5g

邻甲酚酞/邻甲酚呋酞/ 2-甲酚酞, 3,3′-二甲基酚酞/3,3-双(4-羟基-3-甲基苯基)-1(3H)-异苯并呋喃酮/邻甲苯酚酞/3,3'-二甲酚酞/邻甲酚酜酞/o-Cresolphthalein 质量规格：HPLC含量测定 包装;100g

邻甲酚酞络合剂/N,N'-[(3-氧代-1(3H)-异苯并呋喃基亚基]双[(6-羟基-5-甲基-3,1-亚苯基)亚甲基]双[N-(羧基甲基)甘氨酸]/酞紫/金属酞/酚酞紫/2-甲酚酞络合剂/3',3''-双[[双(羧甲基)氨基]甲基]-5', 5''-二甲基酚酞/o-Cresolphthalein complexon 质量规格：>95%,BR 包装;25g

二甲酚橙/二甲酚桔黄/3,3′-双[N,N-二(羧甲基)氨基甲基]邻甲酚磺酰酞/邻甲酚磺酰酞-3,3′-双甲基亚氨基二乙酸/二甲酚橙三钠盐/二甲苯酚橙钠盐/二甲酚橙钠盐/二甲酚桔黄钠盐/Xylenol Orange 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;500g

二甲酚橙四钠/二甲酚桔黄四钠/二甲酚橙四钠盐/二甲苯酚橙钠盐/ Xylenol Orange tetrasodium salt 质量规格：干品Cloxacillin>90%,一 包装;1g

钙黄绿素/3,3′-双(二乙酸)荧光素/荧光素络合剂/荧光素配位剂/双[N,N-双（羧甲基）氨基甲基]荧光素/3,3’-双(甲氨二乙酸)荧光素/N,N’-[[3’,6’-二羟基-3-氧代螺[异苯并呋喃-1(3H),9’-(9H)占吨]-2’,7’-二基]双(亚甲基)]双[N-(羧基甲基)甘氨酸] /Calcein 质量规格：HPLC含量测定 包装;250mg

钙黄绿素二钠盐/钙黄绿素钠盐/Calcein disodium salt 质量规格：杂质检查 包装;25g

铬黑T/依来铬黑T/羊毛铬黑T/媒介黑T/酸性媒介黑T/1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠/Eriochrome black T 质量规格：含量测定 包装;5g
即肠道病毒型PCR检测试剂盒说明书Escherichia│coli 中文名称：大肠埃希氏菌DH5α/pNL4-3 PR(-)种属:Escherichia│coli提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:保存野生型HIV NL4-3基因，载体pcDNA3.1，蛋白酶失活培养方法培养基:CM0033生长条件:37C存储条件:液氮超低温冻结 纯度：>98.0%(GC)

Streptomyces│lavendulae var.hainanesis 中文名称：淡紫灰链霉菌海南变种种属:Streptomyces│lavendulae var.hainanesis提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:产生Zhongshengmycin产生中生菌素,突变株培养方法培养基:CM0012生长条件:28C存储条件:真空冷冻干燥 纯度：>98.0%(GC)

Phyllosticta│glumarum(Ell.et Tr.)Miyake 中文名称：稻谷枯菌种属:Phyllosticta│glumarum(Ell.et Tr.)Miyake分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:CM0014生长条件:26C存储条件:-80℃冰箱冻结；真空冷冻干燥 纯度：98%

Streptomyces│deccanensis 中文名称：德干链霉菌种属:Streptomyces│deccanensis分离基物:土壤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:CM0027生长条件:28C存储条件:真空冷冻干燥 纯度：98%

Amycolatopsis│orientalis 中文名称：东方拟无枝酸菌种属:Amycolatopsis│orientalis提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:CM0027生长条件:28C存储条件:-80℃冰箱冻结；真空冷冻干燥 纯度：98%

Cordyceps│sp. 中文名称：冬虫夏草属种属:Cordyceps│sp.提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:抑菌活性培养方法培养基:CM0014生长条件:28C存储条件:真空冷冻干燥 纯度：98%

Actinopolyspora│sp. 中文名称：放线多孢菌属菌种种属:Actinopolyspora│sp.分离基物:盐碱土提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:环境培养方法培养基:CM0027+5%NaCl生长条件:28C存储条件:真空冷冻干燥 纯度：98%

Neosartorya│fischeri 中文名称：费希新萨托菌种属:Neosartorya│fischeri分离基物:枯叶提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:产生真菌毒素培养方法培养基:CM0014生长条件:26C存储条件:-80℃冰箱冻结；真空冷冻干燥 纯度：98%