产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:巨细胞病毒PCR检测试剂盒 英文名称:Cytomegalovirus(CMV)PCR 编号:HE30879-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 磷酸丙糖异构酶/丙糖磷酸异构酶/磷酸甘油醛异构酶/TPI/TIM 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 蔗糖磷酸化酶/SP/Sucrose Phosphorylase 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g 醛缩酶/丁醛醇酶/醇醛缩合酶/二磷酸果糖酶/丁酸醇酶/Aldolase from rabbit muscle 质量规格:HPLC≥98% 包装;5g α-甘油磷酸脱氢酶-磷酸丙糖异构酶/3-磷酸甘油脱氢酶-磷酸丙糖异构酶/GDH-TIM/GDH-TPI 质量规格:>90%,BR 包装;25g 酸性磷酸酶/ACP 质量规格:>97%,BR 包装;5g 肠激酶/肠胨酶/肠蛋白酶/肠肽酶/肠激活酶/Enteropeptidase 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;250mg 亮氨酸氨基肽酶/亮氨酸氨肽酶/肽链外切酶/白氨酸氨肽酶/氨基肽酶M/AP-M/LAP 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;500mg 植酸酶/肌醇六磷酸酶/Phytase from wheat 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;100mg 单宁酶/鞣酸酶/丹宁酶/单宁酯酰解酶/Tannase 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 蔗糖酶/果糖苷酶/转化酶/蔗糖转化酶/Invertase 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;250mg 葡萄糖脱氢酶/Glucose Dehydrogenase 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 磷酸烯醇式酸羧化酶/PEPC 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;250mg 血管紧张素转换酶/血管紧张素转化酶/ACE酶/ACE 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐/AEBSF hydrochloride 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 氨肽酶抑制剂盐酸盐/Amastatin hydrochloride hydrate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;100g 门冬酰胺酶/门冬酰氨酶/L-天冬酰胺酶/天冬酰胺酶/L-门冬酰胺酶/L-天门冬酰胺酶/Asparaginase from Escherichia coli 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g 5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷/Bluo-Gal 质量规格:HPLC≥97%,标准品 包装;500g 巨细胞病毒PCR检测试剂盒Bradyrhizobium│sp. 中文名称:慢生根瘤菌(豇豆族)种属:Bradyrhizobium│sp.提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:与绿豆花生共生固氮培养方法培养基:53生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:98% Mesorhizobium│loti 中文名称:百脉根中慢生根瘤菌种属:Mesorhizobium│loti分离基物:根瘤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:63生长条件:28-30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法;定期移植法 纯度:98% Mesorhizobium│amorphae 中文名称:紫穗槐中慢生根瘤菌种属:Mesorhizobium│amorphae分离基物:根瘤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:63生长条件:28-30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法;定期移植法 纯度:BR Mesorhizobium│mediterraneum 中文名称:地中海中慢生根瘤菌种属:Mesorhizobium│mediterraneum分离基物:刺槐提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:63生长条件:28-30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:BR Rhizobium│gallicum 中文名称:高卢根瘤菌种属:Rhizobium│gallicum分离基物:根瘤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:用于分类学和遗传学研究,教学上也有应用,同时也筛选与豆科植物共生固氮的高效菌株用于实际。培养方法培养基:63生长条件:28-30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法;定期移植法 纯度:98% Rhizobium│leguminosarum 中文名称:三叶草根瘤菌种属:Rhizobium│leguminosarum分离基物:三叶草根瘤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:与白三叶共生固氮培养方法培养基:53生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:97% Rhizobium│etli 中文名称:菜豆根瘤菌种属:Rhizobium│etli提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:与菜豆、四季豆共生固氮培养方法培养基:53生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:97% Rhizobium│sp. 中文名称:根瘤菌(柠条)种属:Rhizobium│sp.分离基物:柠条根瘤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:与柠条共生固氮培养方法培养基:53生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:≥97% 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |