产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:豌豆内源基因PCR检测试剂盒 规格:50T 编号:HE32067-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 溴螨酯溶液标准物质 1mL Akabane Disease Virus(AKAV)牛赤羽病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 克菌丹溶液标准物质 1mL Akabane Disease Virus(AKAV)牛赤羽病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 丙草胺溶液标准物质 1mL Alastrim Virus类天花病毒PCR试剂盒 液标准物质 1mL Alastrim Virus类天花病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 准物质 1mL Alastrim Virus类天花病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 标准物质 1mL Alcaligenes faecalis粪产碱杆菌PCR试剂盒 敌稗溶液标准物质 1mL Alcaligenes faecalis粪产碱杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 七氯溶液标准物质 1mL Alcaligenes faecalis粪产碱杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 液标准物质 1mL Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚疱疹病毒1型PCR试剂盒 狄试剂溶液标准物质 1mL Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚疱疹病毒1型染料法荧光定量PCR试剂盒 准物质 1mL Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 氯胺灵溶液标准物质 1mL Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒PCR试剂盒 杀虫畏溶液标准物质 1mL Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 蚜灭多溶液标准物质 1mL Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 克螨特溶液标准物质 1mL Allpaahuayo virus(ALLV)奥尔帕瓦约病毒RT-PCR试剂盒 尿嘧啶/2,4-二羟基嘧啶/2,4-(1H,3H)-嘧啶二酮/由雪/2,6-二羟基/1,3-二氮杂/Uracil高纯,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,66-22-8RT 100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名称: 尿嘧啶 其他名称: 2,4-二羟基嘧啶;2,4-(1,3)-嘧啶二酮;由雪;2,6-二羟基;1,3-二氮杂;灭胞素;杀枯定;杀胞素;叶枯散 英文名称: Uracil 其他名称: 2,6-Dihydroxypyrimidine;2,4-(1H,3H)-Pyrimidinedione ;2,4-Dihydroxypyr-imidine;2,4-Dioxopyrimidine;2,4-Pyrimidinediol 产品规格: 高纯,98% 包 装: 5克/25克/100克 CAS号:66-22-8 C4H4N2O2=112.09 级别:High putiry grade 含量:≥98.0% 熔点:>300℃ 干燥失重:≤1.0% 重金属:≤20ppm 性状:浅黄色结晶。100份25℃的水溶解本品0.358 份。易溶于热水,溶于氢氧化铵和其他碱类,微溶于冷水,几乎不溶于乙醇。大吸收波长(pH 7.0) 202.5、259.5nm(ε×10-3 9.2、8.2)。 用途:生化研究。有机合成 保存:RT 豌豆内源基因PCR检测试剂盒磷化谷氨受体1抗体2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbama别名: 分子式: C12H14N2S3性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: G蛋白修补结构域蛋白1抗体m-Anisic acid别名: 分子式: C8H8O3性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 磷化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1抗体p-Anisoin别名: 分子式: C16H16O4性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 磷化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白17-Anilino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid别名: 分子式: C16H13NO4S性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 葡萄糖激酶调节蛋白抗体Benzanilide别名: 分子式: C13H11NO性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: GTP结合蛋白10抗体3-Benzalphthalide别名: 分子式: C15H10O2性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 磷化Ras GTP酶活化蛋白结合蛋白1抗体L-Aspartic acid别名: 分子式: C4H7NO4性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: Ras GTP酶活化蛋白结合蛋白1抗体Benzoin别名: 分子式: C14H12O2性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |