产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:鸭乙型肝炎病毒PCR检测试剂盒规格 英文名称:Duck Hepatitis B Virus(DHBV)PCR 编号:HE30900-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 尿苷二磷酸葡萄糖/尿苷-5ˊ-二磷酸葡糖二钠盐/葡萄糖-5ˊ-二磷酸尿苷二钠盐/二磷酸尿苷葡萄糖二钠盐/UDP-Glc/UDPG 质量规格:含量测定 包装;1g 鸟苷/鸟嘌呤核苷/鸟嘌呤核甙/9-β-D-呋喃核苷鸟嘌呤/9-β-D-呋喃核糖基鸟嘌呤/鸟甙/鸟粪苷/鸟粪素苷/鸟嘌呤呋喃核苷/Guanosine 质量规格:含量测定 包装;1g 5-鸟苷一磷酸二钠盐/5′-鸟苷酸二钠/5'-鸟甙酸二钠/鸟苷酸二钠/鸟苷-5'-磷酸二钠盐/5'-一磷酸鸟苷二钠/5'-鸟嘌呤磷酸二钠盐/5′-GMP,2Na 质量规格:含量测定 包装;100g 5-鸟苷二磷酸二钠盐/鸟苷-5'-二磷酸二钠盐/5'-鸟嘌呤核苷二磷酸二钠盐/5'-GDP,2Na 质量规格:供检查用 包装;25g 5-鸟苷三磷酸二钠盐/鸟苷-5'-三磷酸二钠盐/5'-鸟嘌呤核苷三磷酸二钠盐/5'-GTP,2Na 质量规格:含量测定 包装;5g 5-鸟苷三磷酸三钠盐/鸟苷-5'-三磷酸三钠盐/5'-鸟嘌呤核苷三磷酸三钠盐/5'-GTP,3Na 质量规格:>98%,BR 包装;25g 鸟苷-3',5'-环磷酸钠盐/3',5'-环一磷酸鸟苷钠盐/环磷鸟苷/鸟嘌呤核糖苷-3',5'-环磷酸酯/cGMP/3′,5′-cGMP-Na/cyclic GMP 质量规格:>98%,特异性的p110β抑制剂 包装;5g 肌苷/次核苷/9-β-D-呋喃核糖基次/9-D-核糖次/次黄苷/肌甙/Inosine 质量规格:TLC法检查 包装;25g 5-肌苷一磷酸二钠盐/肌苷-5'-单磷酸二钠盐/5′-肌苷酸钠/5-单磷酸次核苷二钠/5′-IMP,2Na 质量规格:含量测定 包装;5g 5-肌苷二磷酸二钠盐/肌苷-5'-二磷酸二钠盐/次核苷-5'-二磷酸二钠/5′-IDP,2Na 质量规格:含量测定 包装;1g 5-肌苷二磷酸三钠盐/肌苷-5'-二磷酸三钠盐/次黄苷-5ˊ-二磷酸三钠盐/次核苷-5ˊ-二磷酸三钠盐/5′-IDP,3Na 质量规格:TLC法检查 包装;5g 5-肌苷三磷酸三钠盐/肌苷-5'-三磷酸三钠盐/次黄苷-5ˊ-三磷酸三钠盐/次核苷-5ˊ-三磷酸三钠盐/5′-ITP,3Na 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 5-肌苷三磷酸二钠盐/次核苷-5'-三磷酸二钠/三磷酸肌苷二钠/5′-ITP,2Na 质量规格:供检查用 包装;100g 三磷酸脱氧核糖核苷酸/脱氧核糖核苷-5′-三磷酸/寡核苷酸缓冲液/dNTPs 质量规格:供HPLC法含量测定用 包装;25g 2′-脱氧腺苷/2′-脱氧腺甙/去氧胰苷/去氧腺嘌呤配糖/去氧腺核苷/脱氧腺嘌呤核苷/9-β-D-2ˊ-脱氧呋喃核苷腺嘌呤/2′-Da 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;5g 2′-脱氧腺苷-5′-单磷酸/脱氧腺苷单磷酸/脱氧腺苷酸/dAMP 质量规格:含量测定 包装;5ml 2′-脱氧腺苷-5′-单磷酸二钠/脱氧腺苷单磷酸二钠/脱氧腺苷酸二钠/dAMP,2Na 质量规格:≥97%,BR 包装;1g 鸭乙型肝炎病毒PCR检测试剂盒规格 Pseudomonas│poae 中文名称:草假单胞菌种属:Pseudomonas│poae分离基物:市售产提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:耐盐细菌,在10%NaCl培养基:中可生长。培养方法培养基:33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:>98.0%(GC) Pseudomonas│balearica 中文名称:巴利阿里假单胞菌种属:Pseudomonas│balearica分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:能于30℃、48小时降解约1000ppm的萘,萘为碳源(无机盐培养基:)培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:>98.0%(GC) Chromohalobacter│israelensis 中文名称:以色列色盐杆菌种属:Chromohalobacter│israelensis分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:能够耐受15%的盐培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:99% Virgibacillus│halodenitrificans 中文名称:盐脱氮枝芽孢杆菌种属:Virgibacillus│halodenitrificans分离基物:盐场土提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:在10%NaCl培养基:上能够生长。培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:99% Enterobacter│radicincitans 中文名称:促根生肠杆菌种属:Enterobacter│radicincitans分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:在M9培养基:中抗普斯特的浓度达500mg/L。培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:99% Klebsiella│sp. 中文名称:克雷氏杆菌种属:Klebsiella│sp.分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:在M9培养基:中抗普斯特的浓度达500mg/L。培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:98% Cellulosimicrobium│sp. 中文名称:纤维微菌种属:Cellulosimicrobium│sp.分离基物:污泥提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:98% Paenibacillus│alkaliterrae 中文名称:耐碱类芽孢杆菌种属:Paenibacillus│alkaliterrae分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:分类、研究,可以用来生物肥料。培养方法培养基:65生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:98% 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |