实验外包: 1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析 2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq 3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA 6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选 7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR 8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建 服务流程: 接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。 产品名称 | 库蠓通用PCR检测试剂盒 | 英文名称 | Culicoides spp.PCR | 货号 | HE30871-R |
使用方法: 一、样品 DNA 的制备 用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。 二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。 1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。 2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。 3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。 4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。 5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。 6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。 8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。 PCR实验方法步骤: 方法 1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 特点优势: 1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。 2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。 3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。 4. 实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。 5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。 蛋白酶(枯草杆菌)/枯草杆菌蛋白酶/枯草溶菌素/蛋白酶A.S1398/蛋白酶2709/解朊酶/舒替兰酶/Proteinase(Bacillus subtilis) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 乳酸脱氢酶(兔肌)/ L-乳酸脱氢酶/乳酸去氢酵素/LDH/LAD/Lactic dehydrogenase(rabbit muscle) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g 胶原酶/骨胶原酶/胶原蛋白解酶/Collagenase 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 透明质酸酶/玻璃酸酶/玻璃糖醛酸酶/玻糖酸酶/粘朊酶/粘蛋白酶/透明糖酶/Hyaluronidase 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 过氧化物酶(辣根)/辣根过氧化物酶/过氧化酶/Perxidase(horseradish)/HRP/POD 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g α-半乳糖苷酶/α-D-半乳糖苷半乳糖解酶/蜜二糖酶/α-Galactosidase preparation from green coffee beans 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g β-半乳糖苷酶/乳糖酶/β-D-半乳糖苷酶/乳糖分解酵素/乳酸酶/GAL/β-Galactosidase from Escherichia coli 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 谷氨酸脱氢酶/L-谷氨酸去氢酶/L-GLDH 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 核糖核酸酶(牛胰)/RNA酶/核糖核酸酶A(牛胰)/核糖核酸酶I /RNASE A/ RNase I/RNASE 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 核糖核酸酶H/Ribonulease H 质量规格:GC≥98%,进口分装 包装;5g 核糖核酸酶T1/Rnase T1 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g RNase&DNase清除剂/Rnase&Dnase away 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 去核酸酶试剂/Nuclease eliminator/Nuclease eliminator Wipes 质量规格:>98%,PIKfyve抑制剂 包装;1g 脱氧核糖核酸酶Ⅰ(牛胰)/去氧细胞核酸酶/氧核糖核酸-5ˊ-寡核苷酸解酶/无核糖核酸酶/脱氧核糖核酸去聚合酶/脱羟核糖核酸酶(牛胰)/除氧细胞核酸酶(牛胰) /DNA酶/Dnase Ⅰ 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 脱氧核糖核酸酶Ⅱ(猪脾)/去氧细胞核酸酶/氧核糖核酸-5ˊ-寡核苷酸解酶/无核糖核酸酶/脱氧核糖核酸去聚合酶/脱羟核糖核酸酶(猪胰)/除氧细胞核酸酶(猪胰) /DNase II 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g 肌酸激酶(兔肌)/磷酸肌酸激酶(兔肌)/肌酸磷酸激酶(兔肌)/CPK/Creatine phosphokinase(rabbit muscle) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 心肌黄酶/黄递酶/硫辛酰胺脱氢酶/二氢硫辛酰胺脱氢酶/二氢硫辛酸脱氢酶/Diaphorase 质量规格:>98%,美国进口 包装;1g 库蠓通用PCR检测试剂盒Lentinus│giganteus 中文名称:大革耳(巨大香菇)种属:Lentinus│giganteus提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;矿物油法;定期移植法 纯度:97% Termitomyces│albuminosus 中文名称:鸡枞菌种属:Termitomyces│albuminosus提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;矿物油法;定期移植法 纯度:95% Calvatia│booniana 中文名称:西部大秃马勃种属:Calvatia│booniana提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;矿物油法;定期移植法 纯度:95% Thelephora│ganbajun 中文名称:干巴菌种属:Thelephora│ganbajun提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;矿物油法;定期移植法 纯度:99% Panus│brunneipes 中文名称:纤毛革耳种属:Panus│brunneipes提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度:99% Hypholoma│fasciculare 中文名称:簇生沿丝菌种属:Hypholoma│fasciculare提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度:99% Trametes hirsuta 中文名称:毛栓菌(斜面)种属:Trametes hirsuta提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度:97% Lyophyllum│fumosum 中文名称:烟色离褶伞种属:Lyophyllum│fumosum提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度:97% |