石膏样小孢子菌PCR检测试剂盒说明书

服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建

​
特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
荷叶碱英文名称 Timosaponin BII分 子 量： 920.5CAS NO.： 136656-07-0纯 度： ≥98%分子式： C45H76O19性状: 白色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 267-272℃溶解性: 溶于吡啶及55％乙醇，微溶于甲醇和醋酸乙酯，不溶于石油醚及等提取来源: 单子叶植物百合科 Liliaceae 知母 Anemarrhena asphodeloides Bge. 的干燥根茎药理药效: 知母皂苷BⅡ具有抑制血小板聚集的作用鉴别方法: NMR; MS检测方法: 采用C8色谱柱，柱温为30℃；以乙腈-水(体积比2l：79)为流动相，流速为1.0mL•min-1；蒸发光散射检测器检测，漂移管温度为80℃，载气压力206.85 kPa。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

黑芥子苷英文名称 Tetrandrine分 子 量： 622.75CAS NO.： 518-34-3纯 度： ≥98%分子式： C38H42N2O6性状: 无色针状结晶()规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 215－217℃溶解性: 几乎不溶于水,石油醚,溶于和某些有机溶剂。提取来源: 防己科植物粉防己根药理药效: 用于单纯性各期矽肺及煤矽肺。此外，还用于早期轻度高血压、风湿痛、关节痛、神经痛等。鉴别方法: NMR; MS检测方法: HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以甲醇-0.3%二乙胺(80:20)为流动相，检测波长为242nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

黑芥子硫苷酸钾一水英文名称 5,7-dihydroxychromone分 子 量： 178.14CAS NO.： 31721-94-5纯 度： ≥98%分子式： C9H6O4性状: 黄色结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 266-268℃溶解性: 可溶于甲醇、ＤＭＳＯ等溶剂，不溶于石油醚。提取来源: 落花生(Arachis hypogaea L.)的花生壳药理药效: 降血脂，抗氧化。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 色谱柱C18，流动相：甲醇∶ 1%磷酸(48∶ 52)，检测波长 254nm贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

红豆树素 VI英文名称 Octacosanol分 子 量： 410.76CAS NO.： 557-61-9纯 度： ≥98%分子式： C28H58O性状: 白色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 83.2～83.6℃溶解性: 可溶于热乙醇、、苯、甲苯、、二氯、石油醚等有机溶剂，不溶于水。提取来源: 豆科猪屎豆属植物假地蓝(Crotalaria ferruginea Grah)的全草或带根全草药理药效: 增进耐力、提高反应灵敏性； 减轻肌肉疼痛；降低收缩期血压；提高机体新陈代谢。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

红景天苷英文名称 Baohuoside I分 子 量： 514.52CAS NO.： 113558-15-9纯 度： ≥98%分子式： C27H30O10性状: 黄色针状结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 202-203℃溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂提取来源: 羊藿药理药效: 宝藿苷I对人食管癌细胞Eca-109的抑制作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: HPLC法，色谱柱为Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm) (0--15 min，乙腈所占比例为10％～25％；15--38 rain，乙腈比例为25％；38--61 min，乙腈比例为25％～71％),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为270 nm,柱温为30℃。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

红景天素英文名称 Ligustrazine Hydrochloride分 子 量： 172.66CAS NO.： 76494-51-4纯 度： ≥98%分子式： C8H12N2•HCl性状: 白色结晶粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中…溶解性: 补充中提取来源: 伞形科植物川芎 Ligusticum chuanxiong Hort. 根茎。药理药效: 适用于闭塞性血管疾病、脑血栓形成、脉管炎、冠心病、心绞痛等。对缺血性脑血管病的急性期、恢复期及其后遗症，如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞、脑动脉硬化等均有较好疗效，能改善这些疾病引起的偏瘫、失语、吞咽困难、肢体麻木、无力、头痛、头晕、失眠、耳鸣、走路不稳、记忆力减退等症状。鉴别方法: NMR; MS检测方法: HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流动相: 水- 甲醇- 三乙胺( 40:60:0.2)；检测波长: 294 nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

红杉醇英文名称 Triptonide分 子 量： 358.39CAS NO.： 38647-11-9纯 度： ≥98%分子式： C20H22O6性状: 无色(二氯-)规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 252～253℃溶解性: 补充中提取来源: 中药雷公藤的根药理药效: 治疗麻风反应,治疗类风湿性关节炎,治疗肺结核及其他慢性肺部疾病。鉴别方法: NMR; MS检测方法: HPLC法，色谱柱:Diamonsil C18(2)柱,流动相:乙腈—水[25:75( 10 min)→45:55( 15 min)→45:55(20 min)],流速:1mL/min,检测波长:218nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

荭草苷英文名称 (+)-Piresil-4-O-beta-D-glucopyraside分 子 量： 520.53CAS NO.： 69251-96-3纯 度： ≥98%分子式： C26H32O11性状: 白色粉末或针晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于甲醇提取来源: 连翘（Forsythia Suspensa）果实药理药效: 保肝，抗病毒等鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

荭草素-2"-0-B-L半乳糖苷英文名称 γ-Fagarine分 子 量： 229.23CAS NO.： 524-15-2纯 度： ≥98%分子式： C13H11NO3性状: 白色或黄色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于，微溶于甲醇，不溶于水提取来源: 白鲜皮药理药效: 补充中鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无
石膏样小孢子菌PCR检测试剂盒说明书Cytarabine  阿糖胞苷别名: Cytosine β-D-arabinofuranoside;Cytosine Arabinoside;Ara-CCAS: 147-94-4分子量: 380.4储存条件: 2～8℃。保质期5年

5-Fluorouracil  5-氟尿嘧啶别名: 5-FUCAS: 51-21-8

Quercetin  槲皮素CAS: 117-39-5纯度: ≥98%分子量: 426.41储存条件: 2-8℃

MPTP (hydrochloride)  1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐别名: MPTPCAS: 23007-85-4分子量: 152.15纯度: 98%

Acetylcysteine  N-乙酰-L-半胱氨酸别名: N-Acetyl-L-cysteine;LNAC;NAC;AcetadoteCAS: 616-91-1储存条件: RT纯度: 98%

Dihydroartemisinin  双氢青蒿素别名: β-Dihydroartemisinin;DHA;DihydroqinghaosuCAS: 71939-50-9

Acetaminophen  对乙酰氨基酚别名: Paracetamol;Tylenol;4'-Hydroxyacetanilide;4-Acetamidophenol;APAPCAS: 103-90-2分子量: 495.75储存条件: 0-4℃

Valproic acid (sodium salt)  丙戊酸钠别名: Sodium ValproateCAS: 1069-66-5分子量: 523.32储存条件: 温，避光防潮密闭干燥