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耐久肠球菌PCR检测试剂盒说明书

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更新日期:
2024-08-27
点击次数:
648
产品特点:
耐久肠球菌PCR检测试剂盒说明书实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
  50T耐久肠球菌PCR检测试剂盒说明书的详细资料:

特点优势:
    1.   特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
    2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
    3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

 耐久肠球菌PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 Enterococcus duransPCR

 货号

 HE30937-R

实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基钠盐/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)间甲钠盐/TOOS sodium salt 质量规格:>95%,BR 包装;5g

N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基钠盐/N-乙基-N-(3-磺丙基)间甲钠盐/TOPS sodium salt 质量规格:>95%,BR 包装;25g

双向电泳指示剂/Tracking Dye-2D 质量规格:>95%,BR 包装;5g

碱性蓝26/维多利亚蓝B/碱性品蓝B/碱性艳蓝B/盐基品蓝B/维多利亚兰B/品蓝B/胜利蓝B/Basic Blue 26 质量规格:>95%,BR 包装;1g

Yariv′s Reagent 质量规格:>95%,BR 包装;25g

2,4-二羟基-4’-硝基偶氮苯/对偶氮间苯二酚/镁试剂I/偶氮紫/偶氧紫/(对偶氮)间苯二酚/4-(4-偶氮)间苯二酚/Azoviolet 质量规格:>95%,BR 包装;5g

4-[(2,4-二羟基苯基)偶氮]苯磺酸钠/间苯二酚磺/金莲橙O/酸性橙6/金莲橙/间苯二酚品黄/偶氮间苯二酚磺酸钠/树脂酚黃O/Tropaeolin O sodium salt 质量规格:>95%,BR 包装;1g

耐尔蓝A/5-氨基-9-(二乙基氨基)苯并[α]吩恶嗪-7-翁硫酸盐/硫酸耐尔蓝/硫酸尼罗蓝/耐尔蓝/耐尔兰A/尼罗蓝A/耐尔兰/尼罗兰A/Nile Blue A 质量规格:>95%,BR 包装;5g

尼罗红/尼罗丝/Nile Red 质量规格:>95%,BR 包装;1g

酞菁/戊基萘腈/酞菁/酞菁氧化钒/氧化钡酞菁/酞菁氧化钒(IV)/钒氧酞菁/Oxyvanadium phthalocyanine 质量规格:>95%,BR 包装;25g

间硝基酚/3-酚/间酚/3-硝基酚/3-Nitrophenol 质量规格:>95%,BR 包装;5g

二还原茚三酮/还原茚三酮二合物/茚烷锡二合物/二合茚烷锡/Hydrindantin dihydrate 质量规格:>95%,BR 包装;1g

直接N/直接黑EX/直接青光元/直接元/直接元青/氯唑黑/卡拉唑黑E/酸性绿光直接黑/直接黑38/Direct Black 38 质量规格:>95%,BR 包装;5g

固红B/标准重氮色盐玫瑰红/B红盐/固红B盐/Fast red B salt 质量规格:>95%,BR 包装;1g

5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯/5(6)-羧基二醋酸乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯/二乙酸-N-琥珀酰亚胺酯羰基荧光素/CFSE 质量规格:>95%,BR 包装;5g

固红B二磺酸萘盐/2-甲氧基-4-硝基-苯重氮1,5-萘二磺酸盐/耐晒红B,1,5-萘二磺酸盐/Fast red B salt 1,5-Naphthalenedisulfonate 质量规格:>95%,BR 包装;1g

羟基萘酚蓝/色酚兰/Hydroxynaphthol blue 质量规格:>95%,BR 包装;250mg
耐久肠球菌PCR检测试剂盒说明书Campylobacter│fetus subsp.jejuni 中文名称:胎儿弯曲菌空肠亚种种属:Campylobacter│fetus subsp.jejuni提供形式:冻干物安全等级:3模式菌株:no应用领域:制备血清  1培养方法培养基:CM0112生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98+%,ee 99%

Moraxella│lacunata 中文名称:腔隙莫拉氏菌种属:Moraxella│lacunata提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no培养方法培养基:CM0010生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:99+%

Neisseria│subflava 中文名称:微黄色奈瑟氏菌种属:Neisseria│subflava提供形式:冻干物安全等级:3模式菌株:no培养方法培养基:CM0109生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:99+%

Providencia│stuartii 中文名称:司徒氏普罗菲登斯菌种属:Providencia│stuartii提供形式:其他安全等级:3模式菌株:no应用领域:4 4培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:99+%

Providencia│alcalifaciens 中文名称:产碱普罗菲登斯菌种属:Providencia│alcalifaciens提供形式:其他安全等级:3模式菌株:no应用领域:32 11培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:>98.0%(GC)

Providencia│sp. 中文名称:普罗菲登斯菌种属:Providencia│sp.提供形式:其他安全等级:3模式菌株:no应用领域:34 -培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:>98.0%(GC)

Salmonella│II 中文名称:沙门氏菌第Ⅱ亚属种属:Salmonella│II提供形式:其他安全等级:2模式菌株:no培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:>98.0%(GC)

Citrobacter│freundii 中文名称:弗劳地拘橼酸杆菌种属:Citrobacter│freundii提供形式:其他安全等级:3模式菌株:no应用领域:6 16培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:>98.0%(GC)

 

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