产品仅用于科研注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
产品名称：革蜱PCR检测试剂盒说明书
英文名称：Dermacenter spp.PCR
编号：HE30885-R
类别:PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
储需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
保存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
组蛋白H1（小牛胸腺）/Histones H1 from calf thymus 质量规格：分析标准品 包装;5g 粘蛋白/Mucin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;1g 胃粘膜素/粘液素II/粘液素III/胃膜素/Mucin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;250mg 蛋白保护剂TY/Protein protectant TY 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;5g 琼脂糖蛋白A/Protein A–Agarose 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;100g 金属硫蛋白/Metallothionein/MT 质量规格：>98%,BR 包装;25g 肌红蛋白/肌球素/肌血球素/Myoglobin from equine skeletal muscle 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;5g 琼脂糖凝胶4B蛋白A/Protein A-Sepharose 4B, Fast Flow from Staphylococcus aureus 质量规格：≥98%(T)，BR 包装;100g 纤粘连蛋白/纤连蛋白(人血)/纤链蛋白/粘连蛋白/纤维结合素/血清纤维结合蛋白/CIG 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;25g β-乳球蛋白/β-Lactoglobulin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;5g Olig(dT)15 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;100g PUC18/PUC18质粒 质量规格：HPLC≥98%,标准品 包装;25g PUC19/PUC19质粒 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;1g 结合珠蛋白/ Haptoglobin from pooled human plasma 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;25g 蛋白脱脂剂/Lipids-Remover from proteins 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;5g 氧合血红蛋白/Oxyhemoglobin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 包装;10mg 蛋白稳定化试剂/Prionex 质量规格：HPLC≥97%，标准品 包装;1g
革蜱PCR检测试剂盒说明书Colletotrichum│orbiculare 中文名称：瓜菌种属:Colletotrichum│orbiculare提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度：98% Cladosporium│cucumerinum 中文名称：瓜枝孢（黄瓜黑星病菌）种属:Cladosporium│cucumerinum提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度：AR,98.5％ Gibberella│zeae 中文名称：玉蜀黍赤霉（麦类赤霉病菌）种属:Gibberella│zeae提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度：10μg/ml,u=4% Doratomyces│nanus 中文名称：第九矛束霉种属:Doratomyces│nanus提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度：96% Pestalotiopsis│adusta 中文名称：烟色拟盘多毛孢种属:Pestalotiopsis│adusta提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度：96% Ulocladium│cucurbitae 中文名称：南瓜细基格孢种属:Ulocladium│cucurbitae提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:20℃ 纯度：97% Cercospora│amorphophalli 中文名称：魔芋尾孢种属:Cercospora│amorphophalli提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:28℃ 纯度：97% Pestalotiopsis│palmarum 中文名称：掌状拟盘多毛孢种属:Pestalotiopsis│palmarum提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:28℃ 纯度：≥99%
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
技术原理：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。 |
