马可尼小囊虫PCR检测试剂盒说明书

服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建

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特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
华蟾毒精英文名称 Gensenoside Rh7分 子 量： 636.86CAS NO.： 343780-68-7纯 度： ≥98%分子式： C36H60O9性状: 白色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于甲醇提取来源: 人参叶药理药效: 抗肿瘤、心血管方面的作用鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

华蟾毒它灵英文名称 Gomisin N分 子 量： 400.47CAS NO.： 69176-52-9纯 度： ≥98%分子式： C23H28O6性状: 白色晶体或粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 异溶于、乙酸乙酯，溶于甲醇提取来源: 北五味子药理药效: 1.保肝作用。对半乳糖胺诱导的肝细胞损害有显著的预防作用,能降低GPT值50%。2.抗氧作用。防止脂质氧化和动脉硬化。其抗氧活性优于dl-α-酚。3.钙拮抗剂作用(降压)和平滑肌松弛作用。对Ca2+和PGF2α诱导的狗肠系膜动脉收缩的IC50(μM)分别为110和60。4.脂质代谢促进剂。大鼠口服本品每日一次,4天后大鼠血甘油三酯从118.7mg/dL降到72.4mg/dL。5.抑制cAMP磷酸二酯酶,IC50为11μM。鉴别方法: NMR; MS检测方法: C18柱，60%乙腈水洗脱，240nm检测贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

槐醇、5-羟基苦参碱英文名称 Lucidenic acid LM1分 子 量： 460.6CAS NO.： 364622-33-3纯 度： ≥98%分子式： C27H40O6性状: 白色粉末或结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: ，甲醇提取来源: 担子菌纲多孔菌科（Polyporaceae）灵芝属（Ganodelma）真菌赤芝Ganoderma lucidum·karst药理药效: 抗肿瘤，保肝，抗过敏鉴别方法: NMR; MS检测方法: 无贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

槐定碱英文名称 Xanthiazone分 子 量： 239CAS NO.： 212701-97-8纯 度： ≥98%分子式： C11H13NO3S性状: 黄色结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于吡啶、苯等有机溶剂，不溶于水。提取来源: 菊科植物苍耳Xanthium sibiricum干燥成熟带总苞的果实药理药效: 抗心律失常作用，并适用于控制心血管疾病。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

槐果碱英文名称 Garcinone D分 子 量： 428.47CAS NO.： 107390-08-9纯 度： ≥98%分子式： C24H28 O7性状: 补充中规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 202-204 ºC溶解性: 可溶于DMSO、热甲醇，不溶于石油醚、等溶剂。提取来源: 藤黄科莽吉柿(Garcinia mangostana)药理药效: 具有一定的抗氧化、消炎等活性。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

槐角苷英文名称 2"-O-beta-L-galactopyranosylorientin分 子 量： 610.15CAS NO.： 861691-37-4纯 度： ≥98%分子式： C27H30O16性状: 黄色针状结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 218-220℃溶解性: 可溶于热甲醇、DMSO等溶剂，不溶于石油醚、、二氯。提取来源: 毛茛科金莲花属植物金莲花(Flos Trollii Chinensis)药理药效: 清热解毒。鉴别方法: NMR; MS检测方法: ODS柱, 流动：0.2%磷酸水溶液-乙腈（83：17）,检测波长348nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

槐角碱英文名称 Olaquindox分 子 量： 263.25CAS NO.： 23696-28-8纯 度： ≥98%分子式： C12H13N3O4性状: 浅黄色结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 202～207℃溶解性: 溶于热水, 微溶于冷水，在乙醇中几乎不溶。提取来源: 补充中药理药效: 具有抗菌作用，对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑制作用，对大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、变形杆菌属等特别敏感，对金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、痢疾密螺旋体等也有抑制作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

环巴胺英文名称 Taraxasteryl acetate分 子 量： 468.75CAS NO.： 6426-43-3纯 度： ≥98%分子式： C32H52O2性状: 无色针晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 212～214℃溶解性: 溶于、丙酮，不溶于水。提取来源: 夹竹桃科(Apocynaceae) 红鸡蛋花 Plumeria rubra L.全理药效: 具有抗肝炎作用。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

环黄芪醇英文名称 Apo-12’-lycopenal分 子 量： 350.54CAS NO.： 1071-52-9纯 度： ≥98%分子式： C25H34O性状: 红色规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于，石油醚，难溶于甲醇、水提取来源: 番茄药理药效: 补充中鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无
马可尼小囊虫PCR检测试剂盒说明书X-Gluc  5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷CAS: 114162-64-0纯度: ≥99%CAS: 3682-35-7分子式: C18H12N6

L-Arginine   L-精氨酸别名: (S)-(+)-ArginineCAS: 74-79-3分子量: 399.58（asAnhydrous）储存条件: RT

Cetylpyridinium (chloride monohydrate)  氯化十六烷基吡啶一水别名: Hexadecylpyridinium chloride monohydrateCAS: 6004-24-6CAS: 7447-41-8分子式: LiCl

BCA  2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠 BCA别名: Disodium bicinchoninateCAS: 979-88-4CAS: 7440-44-0储存条件: RT

Ciprofloxacin  环丙沙星别名: Ciprobay;Cipro;Cipro IVCAS: 85721-33-1CAS: 1787-61-7分子式: C20H12N3NaO7S

Betaine  甜菜碱别名: OxyneurineCAS: 107-43-7英文名称: BilirubinCAS: 635-65-4

(+)-MK 801 Maleate ；(+)-MK 801 顺丁烯二酸盐别名: 马来酸地佐环平英文名称: (+)-MK 801 Maleate 分子式: C15H24O分子量: 220.35

Simvastatin  辛伐他汀/辛伐他丁别名: MK 733;Simlup;Simcard;Simvacor;Simvoget;Zorced;ZocorCAS: 79902-63-9储存条件: -20℃纯度: ≥99.0%