特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 产品名称 | 禽腺病毒探针法荧光PCR检测试剂盒 | 英文名称 | Avian Adenovirus | 货号 | YSP96394 |
荧光染料的优点: 产品仅用于科研使用简便; 可以与任何PCR产物结合; 价格便宜; 荧光染料的缺点: 不能区分不同的双链DNA 引物二聚体会影响检测的敏感性 非特异性产物会影响结果的敏感性 引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别,进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。总的来说,SYBR Green I方法是一种基础也的Real-time qPCR实验手段。 荧光探针: Real-e qPCR中的荧光探针为TaqMan探针,其基本原理是依据目的基因设计合成一个能够与之特异性杂交的探针,该探针的5'端标记荧光基团,3'端标记淬灭基团。 正常情况下两个基团的空间距离很近,荧光基因因淬灭而不能发出荧光。PCR扩增时,引物与该探针同时结合到模板上,探针的结合位置位于上下游引物之间。 当扩增延伸到探针结合的位置时,Taq酶利用5'外切酶活性,将探针5'端连接的荧光分子从探针上切割下来,从而使其发出荧光。检测到的荧光分子数与PCR产物的数量成正比,因此,根据PCR反应体系中的荧光强度即可计算出初始DNA模板的数量。 TaqMan探针技术解决了荧光染料与非特异性扩增结合的问题,反应结束后无需通过熔解曲线检测,缩短了实验时间。 TaqMan探针技术的优点: 荧光背景低; 敏感性高; 杂交稳定性高; 荧光光谱分辨率好; 特异性高。 TaqMan探针技术的缺点: 成本高; 设计难度大; 只能用于检测产物长度低于150bp的反应。 由于TaqMan探针的高特异性,可用于等位基因的辨别,特别适用于人类基因多态性以及根据SNP区别和定量菌株。 PCR技术的定量原理: 扩增曲线 在Real- qPCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号,随着反应的进行,监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线,即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。 在Real-time qPCR扩增早期,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化,此时即为基线期。 PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的,随着反应循环数的增加,终PCR反应不再以指数形式生成模板,从而进入“平台期”。在该时期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系,所以根据终的PCR产物量不能计算出初始模板量。 荧光定量PCR原理: 产品仅用于科研荧光定量PCR早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。 孟鲁司特钠C26H29O16Cl2-氯-6-氟 孟鲁司特钠(标准品)C26H29ClO151-基-(反-乙基环己基) β-葡聚糖酶C16H22O4乙基酸 2-脱氧-L-胸苷/替比夫定C54H92O24四丁基氯化铵(水合物) 替比夫定(标准品)C54H92O24溴-5-氯甲 轮环藤宁/1,4,7,10- 四氮杂环十二烷 C48H82O192-溴喹喔啉 雷替曲塞C48H82O19(S)-(-)-1-(甲氧基)乙 L-鸟氨酸 L-天门冬氨酸盐C30H46O3辛酸戊酯 双嘧达莫C29H44O6氨基-7H-吡咯并[2,D]嘧啶硫酸盐 他米巴罗汀C42H72O147-氧代-7-氮杂吲哚 文多灵C30H44O71-(2-吡啶)哌啶单盐酸盐 罗丹明B;玫瑰红BC19H28O3基-氟酸 头孢哌酮;头孢哌酮酸C12H14O46-氯 头孢哌酮(标准品)C16H22O111-溴-2,4,5-三氯 异硫酸罗丹明BC10H10O43,3'5,5'-四甲基联双酚二缩水甘油 罗丹明6G/性红1/玫瑰红6GC13H10O3甲-N,N-二甲基腙 丽丝罗丹明B/酸性红52/磺酰罗丹明B C30H48O5FMOC-D-氨酸 丽丝罗丹明B/酸性红52/磺酰罗丹明B C30H48O41-Boc-哌 禽腺病毒探针法荧光PCR检测试剂盒酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒CEA 癌胚抗原单克隆抗体(检测)100 ul 二酰辅酶A脱羧酶,线粒体(MLYCD)ELISA试剂盒CEAcam8/CD67 癌胚抗原相关细胞粘附分子8抗体100 ul 二酸单酰辅酶A(malonyl CoA) ELISA试剂盒cellulase 纤维素酶抗体100 ul 二(MDA)ELISA试剂盒CEBP-alpha 转录调节因子C/EBP α 抗体100 ul 氨酸转氨酶/谷转氨酶(ALT/GPT)ELISA试剂盒Phospho-CEBP alpha (Ser21) 酸化转录调节因子CEBP α 抗体20 ul 表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒Phospho-CEBP alpha (Thr222/226) 酸化转录调节因子CEBP α 抗体100 ul 表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒CEBP Beta 转录调节因子C/EBP β抗体100 ul 氨酸(LPA)ELISA试剂盒Phospho-CEBP beta (Ser105) 酸化转录调节因子CEBP β抗体1 mg 胞外超氧化物歧化酶[Cu-Zn](SOD3)ELISA试剂盒Phospho-CEBP beta (Thr235) 酸化转录调节因子CEBP β抗体1 Kit |