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黄杆菌通用PCR检测试剂盒说明书

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更新日期:
2024-08-26
点击次数:
643
产品特点:
黄杆菌通用PCR检测试剂盒说明书实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
  50T黄杆菌通用PCR检测试剂盒说明书的详细资料:

实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

黄杆菌通用PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 Flavobacterium spp.PCR

 货号

 HE30989-R

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
    1.   特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
    2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
    3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
无碳酸钠/碳酸钠/纯碱/苏打/食用纯碱/炭氧/Sodium carbonate anhydrous 质量规格:酶活:>200 NADP units/mg,BC 包装;100g

碳酸氢钠/重碳酸钠/酸式碳酸钠/小苏打/重曹/焙碱/Sodium hydrogen carboante 质量规格:>98%,BR 包装;25g

结晶硫酸钠/芒硝/硫酸钠/十硫酸钠/芒硝矿/晶硝/Sodium sulfafe decahydrate 质量规格:>96%,BR 包装;500g

无硫酸钠/无芒硝/元明粉/85硝/盐饼/硬脂钠/Sodium sulfate anhydrous 质量规格:>98%,BR 包装;1g

结晶亚硫酸钠/硫养粉/Sodium sulfite heptahydrate 质量规格:>98%,BR 包装;5g

无亚硫酸钠/亚硫酸钠/硫养粉/硫化石/Sodium sulfite anhydrous 质量规格:>98%,BR 包装;1g

亚硫酸氢钠/重亚硫酸钠/酸式亚硫酸钠/Sodiumhydrogen sulfite 质量规格:>98%,BR 包装;1g

硫代硫酸钠/大苏打/硫代硫酸钠五合物/脱氯剂/五合硫代硫酸钠/一硫硫酸钠/海波/Sodium thiosulfate pentahydrate 质量规格:BC 包装;5g

无硫代硫酸钠/无大苏打/无次亚硫酸钠/次亚硫酸钠/硫代硫酸钠/硫代硫酸二钠/硫代硫酸二钠盐/海波/Sodium thiosulfate 质量规格:>99%,BR 包装;25g

磷酸二氢钠一物/磷酸一钠单合物/一盐基磷酸钠一物/Sodium dihydrogen phosphate monohydrate 质量规格:>98%,BR 包装;5g

磷酸二氢钠二物/磷酸一钠二物/一盐基磷酸钠二物/酸性磷酸钠/Sodium phosphate monobasic dihydrate 质量规格:>98%,BR 包装;25g

无磷酸二氢钠/磷酸一钠/MSP 质量规格:>98%,BR 包装;5g

磷酸氢二钠/磷酸二钠/二盐基磷酸钠/十二合磷酸氢二钠/十二磷酸二钠/十二磷酸氢二钠/双盐基磷酸钠/Sodium phosphate dibasic dodecahydrate 质量规格:4000~6500 mpa.s,BR 包装;100g

磷酸氢二钠七物/七合磷酸二钠/七合二盐基磷酸钠/七合磷酸氢二钠/SSodium phosphate dibasic heptahydrate 质量规格:>98%(TLC),BR 包装;25g

无磷酸氢二钠/无磷酸二钠/磷酸二钠/二盐基性磷酸钠/Sodium phosphate dibasic 质量规格:>98%(HPLC),BR 包装;5g

磷酸三钠/正磷酸钠/十二磷酸钠/磷酸三钠十二合物/TSP 质量规格:>98%,医药级 包装;100g

无磷酸三钠/三碱式磷酸钠/原磷酸三钠/磷酸三钠/磷酸钠/Trisodium phosphate 质量规格:>70%,BR 包装;25g
黄杆菌通用PCR检测试剂盒说明书海洋微生物菌种海洋微生物菌种海洋微生物菌种 纯度:98%

Dothideomycetes│sp. 中文名称:座囊菌种属:Dothideomycetes│sp.分离基物:样/深层海提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:大洋丝状真菌培养方法培养基:475生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Brachybacterium│paraconglomeratum 中文名称:副凝胶短状杆菌种属:Brachybacterium│paraconglomeratum分离基物:沉积物/多管沉积物(5-10cm)提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:大洋细菌培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99%

Microbacterium│trichotecenolyticum 中文名称:解单端孢菌素微杆菌种属:Microbacterium│trichotecenolyticum分离基物:沉积物/日本海沟沉积物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:生物活性微生物/潜在的抗肿瘤活性培养方法培养基:1003生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99%

Comamonas│denitrificans 中文名称:脱氮丛毛单胞菌种属:Comamonas│denitrificans分离基物:沉积物/表层沉积物提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:有机污染物降解菌/苯酚、间甲酚降解菌(已验证)培养方法培养基:33生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Vibrio│harveyi 中文名称:哈氏弧菌(原:鲨鱼弧菌)种属:Vibrio│harveyi分离基物:生物样/鲨鱼的肾提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:参考菌株/分类研究;本菌株是鲨鱼弧菌(Vibrio carchariae)的模式菌株:,鲨鱼弧菌现组合为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Citrobacter│murliniae 中文名称:啮齿类柠檬酸杆菌种属:Citrobacter│murliniae分离基物:生物样/暗纹东方鲀/肝脏提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:共生微生物/暗纹东方鲀肝脏共生菌培养方法培养基:471生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97%

Weissella│cibaria 中文名称:食物魏斯氏菌种属:Weissella│cibaria分离基物:生物样/鱼肠道内容物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:1.生物活性物质筛选; 2.鱼肠道微生态研究。培养方法培养基:821生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97% 

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