问号钩端螺旋体PCR检测试剂盒说明书

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

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使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
表木栓醇英文名称 Umbelliferone分 子 量： 162.14CAS NO.： 93-35-6纯 度： ≥98%分子式： C9H6O3性状: 白色结晶粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 228-234℃溶解性: 易溶于醇、和乙酸，溶于稀碱液，难溶于醚，微溶于沸水。提取来源: 芸香科植物 Citrus medica L.var. sarcodactylis( Noot.) Swingle的成熟果实药理药效: 抗凝血、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗HIV、细胞毒性等多方面的生物活性。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

表小檗碱英文名称 Ginsenoside Rh8分 子 量： 636.86CAS NO.： 343780-69-8纯 度： ≥98%分子式： C36H60O9性状: 白色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于甲醇，DMSO提取来源: 人参叶药理药效: 未见报道鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

别隐品碱英文名称 Pseudolaric acid B-O-β-D-glucopyranoside分 子 量： 594.6CAS NO.： 补充中纯 度： ≥98%分子式： C29H38O13性状: 白色结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于热甲醇、DMSO，不溶于石油醚等溶剂。提取来源: 松科 植 物 金 钱 松 pseudolarix amabilis ( Nelsn ) Regd. [ p. kaempferi Gor d]的根皮和近根树皮药理药效: 抗真菌、消炎、抗肿瘤。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

滨蒿内酯英文名称 7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin分 子 量： 392.4CAS NO.： 86639-52-3纯 度： ≥98%分子式： C22H20N2O5性状: 黄白色结晶规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 217℃溶解性: 微溶于甲醇 、乙醇 、，可溶于DMSO，不溶于水。提取来源: 珙桐科植物喜树Camptotheca acuminata Decne.的果实、枝、叶药理药效: 抗肿瘤，免疫抑制，抗病毒，抗早孕。鉴别方法: NMR; MS检测方法: C18柱(;流动相为甲醇乙腈溶液:用磷酸调pH至4.0的0.05mol/L磷酸氢二钾缓冲液(含10ml-L三乙胺)[(55:5):50];检测波长为266nm贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

槟榔碱英文名称 (+)Gomisin M2分 子 量： 386.44CAS NO.： 补充中纯 度： ≥98%分子式： C22H26O6性状: 白色粉末或晶体规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于，微溶于甲醇提取来源: 五味子药理药效: 补充中鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

丙二酸英文名称 Alisol A分 子 量： 490.7CAS NO.： 19885-10-0纯 度： ≥98%分子式： C30H50O5性状: 白色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 溶于，甲醇等有机溶剂提取来源: 泽泻科植物泽泻 Alisma plantag-oaquatica L. var. orientale Samuels.块茎药理药效: 实验证明, 本品与含有1％胆固醇、2％胆酸钠及0.2％氯化胆碱的食物同时喂养雄性大鼠时, 十天后测量治疗组和对照组血液中胆固醇含量, 发现本品能明显降低血液中胆固醇水平鉴别方法: NMR; MS检测方法: HPLC贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

波尔定碱英文名称 Araloside X分 子 量： 1266CAS NO.： 344911-90-6纯 度： ≥98%分子式： C60H98O28性状: 白色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于水，不溶于石油醚、。提取来源: 五加科楤木属辽东楤木(Aralia elate(Miq.)Seem．) 的根药理药效: 补气安神、 强精滋肾、 祛风活血、治疗神经衰弱。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 色谱柱Hypersil C18 ( 250 mm x 4. 6 mm, 5 μm)色谱柱为吸附剂, V (乙腈) ：V (水) = 30：70 为流动相,检测波长为203 nm。贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

补充中英文名称 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid分 子 量： 678.59CAS NO.： 86632-03-3纯 度： ≥98%分子式： C34H30O15性状: 灰白色无定型粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 可溶于热甲醇、DMSO等溶剂。提取来源: 桔梗科党参属植物脉花党参[C odonop sis nervosa ( Chipp) N annf]药理药效: 消炎散肿、抗氧化。鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无

补骨脂查尔酮英文名称 periplocymarin分 子 量： 534.68CAS NO.： 32476-67-8；127-32-2纯 度： ≥98%分子式： C30H46O8性状: 白色粉末规格: 10mg/20mg/50mg，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 补充中溶解性: 易溶于、乙酸乙酯，可溶于甲醇、DMSO提取来源: 香加皮药理药效: 有强心作用鉴别方法: NMR; MS检测方法: 补充中贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 无
问号钩端螺旋体PCR检测试剂盒说明书4-氨基苯乙酮别名: 对氨基苯乙酮;对乙酰;对氨基乙酰苯;对氨基苯基甲基酮英文名称: 4-AminoacetophenoneCAS: 99-92-3分子式: C8H9NO

1,3-二丙基-8-环戊基别名: 1,3-二丙基-8-环戊基;8-环戊烷基-1,3-二丙基;8-环戊-1,3-二丙基;PD116,948英文名称: 8-CYCLOPENTYL-1,3-DIPROPYLXANTHINECAS: 102146-07-6分子式: C16H24N4O2

4-乙酰吡啶有效期: 2年别名: 甲基-4-吡啶基酮英文名称: 4-AcetylpyridineCAS: 1122-54-9

1,3-二(4-吡啶基)丙烷有效期: 3年溶解性: 25mg/ml MeOH别名: 4,4’-(1,3-丙二基)双吡啶;44'-三亚甲基二吡啶;1,3-联(4-吡啶基)丙烷;4,4'-三亚甲基二吡啶;1,3-二(4-吡啶基)丙烷;1,3-二(4-吡啶)丙烷;1,3-二(4-吡啶)丙烷,98%;4,4’-(1,3-Propanediyl)Bis-Pyridin;4,4’-(1,3-Propanediyl)Bis-Pyridine;1,3-DI-4-Pyridinopropane;英文名称: 1,3-Di(4-Pyridyl)Propane

硫酸亚铈(III) 八水合物别名: 硫酸亚铈英文名称: Cerium(III) sulfate octahydrate CAS: 10450-59-6 分子式: Ce(SO4)3-8H2O

比伐卢定(TFA)英文名称: Bivalirudin TFACAS: 128270-60-0单位: 瓶货期: 2-3天

乙酰丙酮铬别名: 乙酰丙酮铬盐;乙酰丙酮铬;三(2,4-戊二酮)合铬(Ⅲ);三乙酰丙酮铬;2,4-戊二酮铬;三(乙酰丙酮基)配位铬;乙烯基銅鉻;乙酰丙酮化铬;AcetylacetoneChromium英文名称: Chromium(III) acetylacetonateCAS: 21679-31-2分子式: C15H21CrO6

8--1-萘磺酸铵盐英文名称: 8-Anili-Naphthalenesulfonic Acid Ammonium Salt Hydrate 97%CAS: 206659-00-9分子式: C16H18N2O4S分子量: 334.39