产品名称:总生物碱含量测定试剂盒说明书 规格:48样、96样、 货号:GOY-016365 检测方法:可见分光光度法、微板法 产品分类:氧化应激系列 公司产品仅用于科研贮存温度:2~8℃。 本试剂盒保质期:6个月
【实验前溶液配制】 配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复 溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。 配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19 稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量 配制洗涤液。 配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1份 浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。 【所用仪器、试剂】 仪 器:微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装 置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:单道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 试 剂:乙腈、中性氧化铝

测定步骤: 1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。 2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。 3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制) 4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。 5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂) 选择抗凝的注意点: ①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致; ②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固; ③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆); ④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。 phospho-JAK2(Tyr221) 化酪氨激JAK-2抗体红生成受体(EPOR)ELISA试剂盒 Jak3 酪氨激JAK-3抗体红生成(EPO)ELISA试剂盒 Phospho-Jak3 (Tyr785) 化酪氨激JAK-3抗体红膜(EMP)ELISA试剂盒 Phospho-Jak3 (Tyr980/981) 化酪氨激JAK-3抗体红激因子(ESF)ELISA试剂盒 JNK1/3 氨基末端激1/3抗体横纹肌辅肌动α(sm Actinin-α)ELISA试剂盒 JNK2 氨基末端激2抗体亨廷顿相关1(HAP1)ELISA试剂盒 JNK3/MAPK10 氨基末端激3抗体黑瘤衍生亮氨拉链额外核因子(MLZE)ELISA试剂盒 Jab1 Jun激活区域-连接1抗体黑色抗体(MC Ab)ELISA试剂盒 phospho-JNK1/2/3(Thr183/185) 化氨基末端激1/2/3抗体黑色激(MSH)ELISA试剂盒 JNK1/2/3 氨基末端激1/2/3抗体黑色浓缩激(MCH)ELISA试剂盒 JAM1/CD321 连接粘附分子1黑色瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒 p300/KAT3B 转录接头EP300抗体黑色瘤相关抗原D4(MAGED4/MAGED4B)ELISA试剂盒 KCNA5 电压阀门通道混合器相关亚家族成员5抗体黑色瘤活性抑制(MIA)ELISA试剂盒 KCNG4/KV6.3 离子通道G4抗体黑色瘤标记物(MART/Melan-A)ELISA试剂盒 KCNA7 电压阀门通道混合器相关亚家族成员7抗体核转录因子κBp65(NFκBp65)ELISA试剂盒细胞CASPASE-7表达比色法定量检测试剂盒10/50 次人主动脉内皮微小RNA大鼠巨噬炎性3α(MIP-3α/20)ELISA试剂盒, 细胞CASPASE-7表达荧光定量检测试剂盒10/50 次人主动脉平滑肌微小RNA兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒, CASPASE-7表达西方杂交分析试剂盒5次人心肌微小RNA抑制β-B(Inhbb)ELISA试剂盒--动物,人 CASPASE-7免疫共沉淀分析试剂盒5次人心肌-成人微小RNA哥伦比亚CNA琼脂础 CASPASE-7表达elisa试剂盒25次人心肝成纤维微小RNADL-2-氨丁 细胞CASPASE-8表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次人心脏成纤维-成人心室微小RNACBZ-L-天冬 冰冻切片组织TRAIL 表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人心肌成纤维-成人心房微小RNANHS活化琼脂糖凝胶4FF 石蜡切片组织TRAIL 表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人角膜上皮微小RNA人c-jun ELISA试剂盒, 载玻片细胞TRAIL 表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人角膜微小RNA人质金属抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒,TIMP-2 ELISA kit 冰冻切片组织TRAIL 表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人视网膜色上皮微小RNA人透明质结合(HABP)ELISA试剂盒,HABP ELISA kit 石蜡切片组织TRAIL 表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人晶状体上皮微小RNA人登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒,DF-Ab ELISA 细胞TRAIL 表达比色法定量检测试剂盒10/50 次人虹膜色上皮微小RNA人钙调(CAM)ELISA试剂盒, CAM ELISA 细胞TRAIL 表达荧光定量检测试剂盒10/50 次人结膜成纤维微小RNA人前列F(PGF)ELISA试剂盒,PGF ELISA TRAIL 表达西方杂交分析试剂盒5次人无色睫状上皮微小RNA人前列特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒,PSA ELISA TRAIL 免疫共沉淀分析试剂盒5次人小梁网微小RNA人环加氧2(COX-2)ELISA试剂盒, 总生物碱含量测定试剂盒说明书检测试剂盒ADP核糖基化因子结合2抗体 可溶程序性死亡分子-1检测试剂盒精氨加压受体2抗体 可溶性鸟环化检测试剂盒凋亡相关斑点样ASC抗体 可溶性CD163分子检测试剂盒丝状肌动结合抗体 可溶性CD36检测试剂盒抗凝血3抗体 可溶性CD38检测试剂盒人血清白单克隆抗体 可溶性CD40配体检测试剂盒载脂A4抗体 可溶性CD44V6检测试剂盒化Rho鸟交换因子2抗体 操作步骤: 实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
|