产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:汉扎洛瓦病毒PCR检测试剂盒 英文名称:Hanzalova Virus RTPCR 编号:HE31059-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 氨基脲/氨基甲酰肼/氨脲/氨基甲籼肼/胺甲盐肼/胺脲/半卡肼/Semicarbazide 包装;100g 芥子酸/3,5-二甲氧基-4-羟基肉桂酸/咖啡酸反式异构体/3,5-二甲氧基-4-羟基-反式-苯乙烯酸/3,5-二甲氧基-4-羟基苯酸/顺13-二十二烯酸/顺二十二碳-13-烯酸/3,5-二甲氧基-4-羟基桂皮酸/Sinapic acid 包装;500g 苯磺酸钠/Sodium benzenesulfonate 包装;1g 癸酸钠/Sodium decanoate 包装;100g 邻苯二甲酸氢钠/苯二甲酸氢钠/1,2-苯二羧酸单钠盐/邻苯二甲酸钠盐/苯二甲酸氢钠/酞酸氢钠/Sodium hydrogen phthalate 包装;25g 草氨酸钠/Sodium oxamate 包装;5g D-泛酸钠/右旋泛酸钠/(R)-N-(2,4-二羟基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)- β-丙氨酸单钠盐/D-本多生酸钠/泛酸钠/D(+)-泛酸钠/Sodium D-pantothenate 包装;1g 高酸钠/过酸钠/偏高酸钠/Sodium periodate 包装;5g 苯酸钠/Sodium phenylpyruvate 包装;1g 亚磷酸氢二钠五合物/五亚磷酸钠/Sodium phosphite dibasic pentahydrate 包装;250mg 磷钼酸钠/钼磷酸钠/Sodium phosphomolybdate hydrate 包装;5g 乙酸锶/醋酸锶/Strontium acetate 包装;100g 氟化锶/二氟化锶/Strontium fluoride 包装;25g 丁香醛/3,5-二甲氧基-4-羟基/Syringaldehyde 包装;1g 丁香酸/4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸/3,5-二甲氧基-4-羟基苯甲酸/4-羟基-3,5-二甲氧基甲酸/梧酸-3,5-二甲醚/紫丁香酸/Syringic acid 包装;5g 牛磺去氧胆酸钠/牛磺脱氧胆酸钠/Sodium taurodeoxycholat 包装;25g 4-甲苯磺酰氯/对甲苯磺酰氯/甲苯-4-磺酰氯/对氯化甲苯砜/PTSC 包装;5g 汉扎洛瓦病毒PCR检测试剂盒Psychrobacter│alimentarius 中文名称:消化嗜冷杆菌种属:Psychrobacter│alimentarius分离基物:沉积物/深海沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:无机污染物抗性菌/抗重金属铬(Cr)培养方法培养基:471生长条件:4℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97% Citricoccus│sp. 中文名称:柠檬球菌种属:Citricoccus│sp.分离基物:样/海提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:大洋细菌培养方法培养基:471生长条件:4℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% Planococcus│sp. 中文名称:动性球菌种属:Planococcus│sp.分离基物:沉积物/深海沉积物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:大洋细菌培养方法培养基:471生长条件:4-20℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% Salinibacterium│amurskyense 中文名称:阿穆斯基湾盐杆菌种属:Salinibacterium│amurskyense分离基物:沉积物/深海沉积物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:大洋细菌,产酶微生物/ 蛋白酶培养方法培养基:471生长条件:4-20℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Tenacibaculum│aiptasiae 中文名称:海葵黏着杆菌种属:Tenacibaculum│aiptasiae分离基物:生物样/海葵(患病的)提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:;培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Roseobacter│litoralis 中文名称:海滨玫瑰杆菌种属:Roseobacter│litoralis分离基物:不详提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97% Oleispira│lenta 中文名称:缓慢油螺旋菌种属:Oleispira│lenta分离基物:样/海提供形式:冻干物模式菌株:yes应用领域:模式菌株:;培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Roseivivax│halotolerans 中文名称:玫瑰色鲜艳菌(加词待译)种属:Roseivivax│halotolerans分离基物:生物样/附生植物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:;生物转化微生物/含有细菌叶绿素;产酶微生物/产脲酶(Urease)培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |