马流感病毒亚型PCR检测试剂盒说明书

服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建

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特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
硅烷偶联剂KH570/3-(异酰氧)丙基*氧基硅烷/3-(甲基酰氧)丙基*氧基硅烷/*基硅烷丙基酸脂/3-(*氧基甲硅烷基)丙基-2-甲基-2-酸酯/γ-(2,3-环氧丙氧)丙基*氧基硅烷/γ-甲基酰氧基丙基*氧基硅烷/3-(*氧基硅烷)丙基酸脂/MEMO 质量规格： 包装;10MG

有机硅消泡剂/Silicone defoamer 质量规格：>97.0%(GC) 包装;25g

离子交换剂Ⅰ/CG-50离子交换树脂/离子交换剂CG-50/阳离子交换树脂CG-50/CG-50弱酸型阳离子交换树脂/Amberlite CG-50 质量规格：>98.0%(GC) 包装;25g

离子交换剂Ⅲ 质量规格：>98.0%(GC) 包装;5g

离子交换剂Ⅴ 质量规格：>98.0%(GC) 包装;1g

十烷基*基溴化铵/(1-癸基)*基溴化铵/癸基*基溴化铵/正溴化癸*基铵/Decyltrimethylammonium bromide 质量规格： 包装;100g

液体生物防腐剂/Proclin 300 质量规格：>97.0%(GC)(T) 包装;25g

布鲁诺广谱高效杀菌剂/溴硝醇/2-溴-2-硝基-1,3-/拌棉醇/溴硝/抑菌醇/皮乐宝/布罗波尔/布洛波尔/2-溴-2-硝基-1,3-/溴丙醇/溴硝丙醇/2-硝基-2-1,3-/Bronorol 质量规格：>98.0%(GC) 包装;5g

1，3-二甲基脲/二甲基脲/N,N-二甲基脲/1,3-二甲脲/1,3-二甲基尿素/对称二甲基脲/均二甲脲/1,3-Dimethylurea 质量规格：>99.0%(GC) 包装;25g

钯碳加氢催化剂/钯碳酸钙/林德拉催化剂/Palladium on carbon hydrogenation 质量规格：>98.0%(GC) 包装;5g

铬雾抑制剂/Chromic acid fog inhibitor 质量规格： 包装;100mg

偶氮脒类引发剂V30/偶氮异丁氰基甲酰胺/1-((氰基-1-甲基乙基)偶氮)甲酰胺/CABN 质量规格：>95.0%(GC) 包装;500mg

偶氮脒类引发剂V40/偶氮二环己基甲腈/1,1'-偶氮双(环己烷甲腈)/1,1'-偶氮(氰基环己烷)/1,1'-偶氮二环己腈/偶氮二环己腈/1,1’-偶氮二环己腈/1,1′-偶氮-二-(六氢苄腈)/1,1'-氮杂双(环己烷-1-腈)/1,1'-偶氮(环己基-1-氰基)/偶氮二(环己烷-1-腈)/ACCN/VAZO88 质量规格：>98.0%(HPLC) 包装;1g

偶氮脒类引发剂V50/2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)/2,2'-偶氮二异丁基脒/偶氮二（2氨基丙脒）盐酸盐/偶氮二异丁脒盐酸盐/偶氮脒类引发剂VAZO56/2,2’-偶氮二(2-甲基丙脒)/2,2’-偶氮二(2-脒基丙烷)/2,2’-偶氮二异丁脒氢氯化物/2,2'-氮杂双(2-咪唑丙烷)/AAPH/AIBA 质量规格：>98.0%(HPLC)(T) 包装;5g

偶氮脒类引发剂V59/偶氮二异戊腈/2,2'-偶氮(2'-甲基)/2,2'-偶氮-二-(2'-甲基)/2,2'-偶氮双二异戊腈/2,2'-氮杂双(2-甲)/偶氮二甲基/AMBN/VAZO67 质量规格：>99.0%(T) 包装;25g

偶氮脒类引发剂V60/偶氮二异/2,2-偶氮二异/2，2′偶氮二（2-甲基）/发孔剂N/发乳剂N /AIBN/VAZO64 质量规格：>98.0%(HPLC)(T) 包装;5g

偶氮脒类引发剂V65/偶氮二异庚腈/2，2'-偶氮二异庚腈/2，2'-偶氮双(2，4-二甲基戊腈)/ 2,2’-偶氮-二-(2,4-二甲基戊腈)/偶氮二甲基戊腈/2,2'-氮杂双异庚腈/ABVN/VAZO52 质量规格：>98.0%(HPLC)(T) 包装;25g
马流感病毒亚型PCR检测试剂盒说明书Pichia burtonii 中文名称：伯顿毕赤酵母（斜面）种属:Pichia burtonii提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:越南饲料酵母(可利用淀粉, 生米糠)；鸡粪除臭培养方法培养基:YM 培养基:酵母提取物，3.0 g 麦芽提取物，3.0 g 葡萄糖，10.0 g 蛋白栋，5.0 g 琼脂，20.0 g 蒸馏1000 ml ，pH 6.2 +/- 0.2生长条件:25-28℃，好氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：96%

Thiobacillus│intermedius 中文名称：中间硫杆菌种属:Thiobacillus│intermedius分离基物:生物除臭塔提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:降解二氧化硫培养方法培养基:412生长条件:28℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；定期移植法 纯度：96%

Mycobacterium│phlei 中文名称：草分枝杆菌种属:Mycobacterium│phlei提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:38生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：96%

Ralstonia│solanacearum 中文名称：茄科罗尔斯通氏菌种属:Ralstonia│solanacearum提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：96%

Lactobacillus gasseri 中文名称：加氏乳杆菌种属:Lactobacillus gasseri提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:MRS培养基:酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸镁 0.2 g，乙酸钠 5.0 g，柠檬酸三铵 2.0 g，磷酸氢二钾 2.0 g，硫酸锰 0.05 g，吐温80 1.0 g，蒸馏 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生长条件:37℃，微好氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：97%

Lactobacillus salivarius 中文名称：唾液乳杆菌种属:Lactobacillus salivarius提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:MRS培养基:酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸镁 0.2 g，乙酸钠 5.0 g，柠檬酸三铵 2.0 g，磷酸氢二钾 2.0 g，硫酸锰 0.05 g，吐温80 1.0 g，蒸馏 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生长条件:37℃，厌氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：97%

Bacteroides thetaiotaomicron 中文名称：多形拟杆菌种属:Bacteroides thetaiotaomicron分离基物:人脸提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:；与柳杉花粉热有关培养方法培养基:PYG培养基:多胨 5.0 g,胰胨 5.0 g,酵母提取物 10.0 g,葡萄糖 10.0 g,盐溶液 40.0 ml,蒸馏 960 ml,琼脂 10.0 g,pH 7.2 ,盐溶液： ,CaCl 0.2 g,MgSO4·7H2O 0.4 g,K2HPO4 1.0 g,KH2PO4 1.0 g,NaHCO3 10.0 g,NaCl 12.0 g,蒸馏 1.0 L 哥伦比亚血平板生长条件:37℃，厌氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：98%

Magnetospirillum│gryphiswaldense 中文名称：格利菲斯瓦尔德镇磁螺菌种属:Magnetospirillum│gryphiswaldense分离基物:river sediment提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:932生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：98%