羊仰口线虫PCR检测试剂盒说明书

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

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使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
雷公藤红素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 质量规格：>98% 包装;5g

雷公藤红素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 质量规格：HPLC≥98%,标准品 包装;25g

雷公藤红素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 质量规格：>97.5%,BR 包装;5g

雷公藤红素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 质量规格：2,000-5,000 units/mg，进分 包装;25g

雷公藤红素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 质量规格：>98%,BR 包装;5g

β-柏木烯/雪松烯 CEDRENE, B-(SG) 质量规格：HPLC>99%,标准品 包装;25g

(-)-α-柏木烯 CEDRENE, (-)-alpha-(SG) 质量规格：>98%,BR 包装;5g

柏木脑 CEDROL(SG) 质量规格：>98%,BR 包装;25g

柏木脑 CEDROL(SG) 质量规格：>95%,BR 包装;250g

常春藤皂苷元 CAULOSAPOGENIN(SH)(SEE HEDERAGENIN) 质量规格：>99%,BR 包装;50g

葳岩仙皂苷 C CAULOSIDE C(P)(NEW) 质量规格：>98.0%，进口原装 包装;1g

毛壳素 CHAETOCIN(AS) 质量规格：>98%,BR 包装;5g

毛壳素 CHAETOCIN(AS) 质量规格：>98.5%,BR 包装;25g

α-卡茄碱 CHACONINE, ALPHA-(SH) 质量规格：HPLC>98%,标准品 包装;5g

α-卡茄碱 CHACONINE, ALPHA-(P)(PLEASE CALL) 质量规格：>98%,BR 包装;1mg

1-十六烷醇/鲸蜡醇 CETYL ALCOHOL(1-HEXADECANOL)(SG) 质量规格：>99%,BR 包装;1g

1-十六烷醇/鲸蜡醇 CETYL ALCOHOL(1-HEXADECANOL)(SG) 质量规格：>98%,BR 包装;5g
羊仰口线虫PCR检测试剂盒说明书Beauveria brongniartii (Sacc.) Petch 中文名称：布氏白僵菌（卵孢白僵菌）种属:Beauveria brongniartii (Sacc.) Petch分离基物:大黑腮金龟提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:鞘翅目昆虫生物防治培养方法培养基:综合PDA：马铃薯煮汁1000mL，磷酸二氢钾 3g，硫酸镁 1.5g，葡萄糖 20g，维生素B1 10mg，琼脂 20g，pH自然。马铃薯煮液：200g马铃薯，去皮，切块，放入蒸馏中煮沸30min，取滤液定容至1000mL,备用。121℃，15min。生长条件:25℃，好氧生长特性卵孢白僵菌菌落粉状，白色，生长期15天，后变为淡黄色。产孢细胞单生，很少簇生，产孢轴纤细，膝状弯曲，具小齿突。分生孢子透明，光滑，椭圆形，基部有时有小尖突。自然状态下寄生在虫体生长并穿出外骨骼，在虫体表面形成白色被覆物；产孢细胞浓密簇生，但有时轮生或单生，直接着生在气生菌丝、稍有分化的分生孢子梗或膨大的柄细胞上，瓶状，下部膨大，上部延长呈颈状，在顶生的分生孢子下方不远处再分枝产孢，反复向顶部合轴式产孢，形成具小齿突的产孢轴。存储条件:定期移植法 纯度：1.0M in THF

Phaffia rhodozyma M.W. Mill. Yoney. & Soneda 中文名称：红发夫酵母种属:Phaffia rhodozyma M.W. Mill. Yoney. & Soneda提供形式:冻干粉安全等级:1模式菌株:no应用领域:产虾红素培养方法培养基:YM,麦芽汁生长条件:28存储条件:定期移植法 纯度：1.0M in THF

Alternaria│solani Sorauer 中文名称：茄链格孢种属:Alternaria│solani Sorauer分离基物:病叶提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度：98%

Alternaria solani Sorauer 中文名称：茄链格孢（斜面）种属:Alternaria solani Sorauer分离基物:马铃薯叶片提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:马铃薯、葡萄糖琼脂：取去皮马铃薯200克，切成小块，加1000毫升煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克，溶化后分装，15磅灭菌30分钟。生长条件:25℃，好氧存储条件:定期移植法 纯度：98%

Termitomyces│eurhizus (Berk.) R. Heim 中文名称：鸡枞(鸡菌）种属:Termitomyces│eurhizus (Berk.) R. Heim分离基物:子实体提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:食、药菌培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度：AR,99.5%

Valsa mali Miyabe & G. Yamada 中文名称：苹果黑腐皮壳菌（斜面）种属:Valsa mali Miyabe & G. Yamada分离基物:苹果树树皮提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:进行分析检测及抗病性鉴定，指导。培养方法培养基:PDA琼脂：马铃薯煮液 1.0L，葡萄糖 20.0g，琼脂 15.0g，自然pH 。生长条件:25-28℃，5d存储条件:定期移植法 纯度：AR,99.5%

Suillus grevillei (Klotzsch) Singer 中文名称：厚环粘盖牛肝菌种属:Suillus grevillei (Klotzsch) Singer分离基物:担子果提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:综合PDA：马铃薯煮汁1000mL，磷酸二氢钾 3g，硫酸镁 1.5g，葡萄糖 20g，维生素B1 10mg，琼脂 20g，pH自然。马铃薯煮液：200g马铃薯，去皮，切块，放入蒸馏中煮沸30min，取滤液定容至1000mL,备用。121℃，15min。生长条件:25℃，好氧存储条件:定期移植法 纯度：99%

Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorokīn 中文名称：金龟子绿僵菌（斜面）种属:Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorokīn分离基物:金龟子提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:综合PDA：马铃薯煮汁1000mL，磷酸二氢钾 3g，硫酸镁 1.5g，葡萄糖 20g，维生素B1 10mg，琼脂 20g，pH自然。马铃薯煮液：200g马铃薯，去皮，切块，放入蒸馏中煮沸30min，取滤液定容至1000mL,备用。121℃，15min。生长条件:24℃，好氧生长特性半知菌亚门、丛梗孢目、瘤座孢科、绿僵菌属，金龟子绿僵菌区别于白色绿僵菌和黄绿绿僵菌的主要. 形态特征是：产孢细胞为圆柱体或窄椭圆，分生孢子圆柱. 体；而白色绿僵菌与黄绿绿僵菌的形态特征为：产孢细胞棍帮形。存储条件:定期移植法 纯度：99%