产品名称:鲤疱疹病毒型PCR检测试剂盒 英文名称:Cyprinid Herpesvirus (CyHVIII )3PCR 编号:HE30875-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 随机引物/Random primers 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;100g β-葡聚糖酶/葡聚糖酶/α-1,6-葡聚糖6-葡聚糖解酶/右旋糖酐酶/β-Dextranase 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g 5´-核苷酸酶/5′-核苷酸磷酸解酶/5′-Nucleotidase/5′-NT 质量规格:≥90%,BR 包装;5g 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷/5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄苷酸环己氨盐/5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸/5-溴-4氯-3-吲哚葡萄糖苷/5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸环己胺盐/5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷环己基胺盐/X-gluc/X-GlcA 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷/5-溴-4氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷/X-gal/BCIG 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 5-溴-4氯-3-吲哚N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷/5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷/X-GalNAc 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;250mg 5-溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷/ Red-Gal/Mag-gal/Magenta-gal 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 对基-α-D-吡喃葡萄糖苷/4-基-α-D-吡喃葡萄糖苷/4-基-α-D-呋喃葡糖苷/4--α-D-吡喃葡糖苷/对-α-D-葡萄糖吡喃苷/PNPG 质量规格:>98%,BR 包装;1g 对基-β-D-吡喃葡萄糖苷/4-基-β-D-吡喃葡萄糖苷/PNPG 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 对基-α-D-吡喃半乳糖苷/4-基-α-D-吡喃半乳糖苷/PNPG 质量规格:>98%,BR 包装;1g 对基-β-D-吡喃半乳糖苷/4-基-β-D-吡喃半乳糖苷/PNPG 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 对基-β-D-吡喃葡糖醛酸苷/4--β-D-吡喃葡糖醛酸苷/PNPG 质量规格:AR,>99% 包装;5ml 邻-β-D-吡喃半乳糖苷/2--β-D-吡喃半乳糖苷/2-基-β-D-呋喃半乳糖苷/ONPG 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;100g 邻-α-D-吡喃半乳糖苷/2--α-D-吡喃半乳糖苷/ONPG 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g 邻-β-D-吡喃葡萄糖苷/2--β-D-吡喃葡萄糖苷/ONPG 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 邻-α-D-吡喃葡萄糖苷/2--α-D-吡喃葡萄糖苷/ONPG 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25ml n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷/正-辛基谷氨酸/1-正辛基-β-D-吡喃葡糖苷/OGP 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5ml 鲤疱疹病毒型PCR检测试剂盒Phyllobacterium│ifriqiyense 中文名称:突尼斯叶杆菌种属:Phyllobacterium│ifriqiyense分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:分类、研究,可以用来生物肥料。培养方法培养基:65生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:97% Crabtreella│saccharophila 中文名称:嗜糖克拉布特里氏菌种属:Crabtreella│saccharophila分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:分类、研究,可以用来农田土壤及环境修复微生物制剂。培养方法培养基:2生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:98% Lysobacter│antibioticus 中文名称:抗生素溶杆菌(抗生溶杆菌)种属:Lysobacter│antibioticus分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:分类、研究,可以用来生物肥料。培养方法培养基:65生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:98% Clostridium│clostridiiforme 中文名称:梭状梭菌种属:Clostridium│clostridiiforme分离基物:土壤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:红麻脱胶,24小时脱胶程度为7培养方法培养基:33生长条件:35℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:98% Sphingobacterium│kitahiroense 中文名称:北广岛鞘鞍醇杆菌种属:Sphingobacterium│kitahiroense分离基物:天牛肠道提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:饲料用纤维素酶、植酸酶、木聚糖酶等的筛选培养方法培养基:2生长条件:26℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:98% Phytobacter│diazotraphicus 中文名称:固氮植物细菌种属:Phytobacter│diazotraphicus分离基物:陵普通野生稻茎提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究培养方法培养基:3生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:97% Erwinia│chrysanthemi 中文名称:菊欧文氏菌种属:Erwinia│chrysanthemi分离基物:龟背竹提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究培养方法培养基:3生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:97% Shigella│boydii 中文名称:鲍氏志贺菌种属:Shigella│boydii提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:研究培养方法培养基:2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:99% |