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粪产碱杆菌探针法荧光PCR检测试剂盒

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更新日期:
2020-11-25
点击次数:
139
产品特点:
粪产碱杆菌探针法荧光PCR检测试剂盒保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
  50次粪产碱杆菌探针法荧光PCR检测试剂盒的详细资料:

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

产品名称

粪产碱杆菌探针法荧光PCR检测试剂盒

英文名称

 Alcaligenes faecalis

货号

 YSP96364

荧光染料的优点:
产品仅用于科研使用简便;
可以与任何PCR产物结合;
价格便宜;
荧光染料的缺点:
不能区分不同的双链DNA
引物二聚体会影响检测的敏感性
非特异性产物会影响结果的敏感性
引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别,进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。总的来说,SYBR Green I方法是一种基础也的Real-time qPCR实验手段。

荧光探针:
Real-e qPCR中的荧光探针为TaqMan探针,其基本原理是依据目的基因设计合成一个能够与之特异性杂交的探针,该探针的5'端标记荧光基团,3'端标记淬灭基团。
正常情况下两个基团的空间距离很近,荧光基因因淬灭而不能发出荧光。PCR扩增时,引物与该探针同时结合到模板上,探针的结合位置位于上下游引物之间。
当扩增延伸到探针结合的位置时,Taq酶利用5'外切酶活性,将探针5'端连接的荧光分子从探针上切割下来,从而使其发出荧光。检测到的荧光分子数与PCR产物的数量成正比,因此,根据PCR反应体系中的荧光强度即可计算出初始DNA模板的数量。
TaqMan探针技术解决了荧光染料与非特异性扩增结合的问题,反应结束后无需通过熔解曲线检测,缩短了实验时间。
TaqMan探针技术的优点:
荧光背景低;
敏感性高;
杂交稳定性高;
荧光光谱分辨率好;
特异性高。
TaqMan探针技术的缺点:
成本高;
设计难度大;
只能用于检测产物长度低于150bp的反应。
由于TaqMan探针的高特异性,可用于等位基因的辨别,特别适用于人类基因多态性以及根据SNP区别和定量菌株。
PCR技术的定量原理:
扩增曲线
在Real- qPCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号,随着反应的进行,监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线,即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。
在Real-time qPCR扩增早期,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化,此时即为基线期。
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的,随着反应循环数的增加,终PCR反应不再以指数形式生成模板,从而进入“平台期”。在该时期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系,所以根据终的PCR产物量不能计算出初始模板量。

荧光定量PCR原理:
产品仅用于科研荧光定量PCR早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。
一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。
依达拉奉(标准品)C36H62O82-羟基-甲

氢化奎宁定;双氢奎尼丁C36H60O7乙酰基-2-氟吡啶

盐酸依匹斯汀C20H18NO4氯-2-酚

盐酸依匹斯汀(标准品)C13H18O7反式-2-甲基-2-戊烯酸

依普利酮C53H90O22氟吡啶盐酸盐

依普利酮(标准品)C48H82O19N-甲基咔唑

戊酸雌二C42H72O142-氨基-基-5-甲基噻吩

戊酸雌二C36H62O10对甲氧基肉桂酸辛酯

依替膦酸钠C41H70O13三单甲

依托度酸C30H52O42-氯-氟三氟甲苯

依托度酸(标准品)C58H92O252-苯基烯酸

依托孕烯C34H46O18溴-2,6-二氟苯甲酸甲酯

依维莫司C47H76O162,二苯基-甲基-1-戊烯

醋酸氟轻松;醋酸肤轻松C25H32N2O61-戊烯-酮

醋酸氟轻松;醋酸肤轻松(标准品)C59H96O25溴苯甲酰氯

马来酸氟吡汀C48H72O17溴-2-

马来酸氟吡汀(标准品)C16H10N2O2四乙基亚甲基二磷酸脂

氟维司群C20H22O93,二溴吡啶
粪产碱杆菌探针法荧光PCR检测试剂盒抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒Caldesmon  钙介质素抗体100 ul

抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒phosphor-Caldesmon(Ser789)  磷酸化钙介质素抗体10 mg

抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒Calpain 1  钙蛋白酶1抗体100 ul

抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒Calpain 2  钙激活的中性蛋白酶2抗体100 ul

抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗体ELISA试剂盒Calponin 1  钙调节蛋白-1抗体100 ul

抗线粒体ADP/ATP载体(AAC)抗体ELISA试剂盒Phospho-Troponin I (Ser23/24)  磷酸化钙调节蛋白-1抗体100 ul

抗透明带抗体IgG(aZP-IgG)ELISA试剂盒Calmodulin/CAM  钙调节素抗体20 ul

抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(IgM)ELISA试剂盒CaMK2a  钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体100 ul

抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(IgG)ELISA试剂盒phospho-CaMK2 alpha (Thr286)  磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体100 ul

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