产品名称:尖孢镰刀菌PCR检测试剂盒植物病原 英文名称:Fusarium oxysporumPCR() 编号:HE31011-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 硝酸银/银丹/硝酸银(I)/Silver nitrate 质量规格:分析标准品,98.5% 包装;1g 溴化银/Silver bromide 质量规格:719(202)是高等级凝胶强碱Ⅱ型阴离子交换树脂 包装;250mg 碳酸银/Silver carbonate 质量规格:分析标准品,用于凯氏定氮法氮测定,≥99.5% 包装;1g 化银/Silver iodide 质量规格:for HPLC,≥99.0%(T) 包装;5g 偏钒酸银/矾酸银/Silver metavanadate 质量规格:Mesh 20-60 包装;10MG 硫酸银/Silver sulfate 质量规格:粒径0.49 - 0.69 mm 包装;25g 钨酸银/Silver tungstate 质量规格:分析标准品,用于萜烯分析,≥99.5% (GC) 包装;5g 乙酸银/醋酸银/Silver acetate 质量规格:分析标准品 包装;100g 氧化银/氧化二银/氧化银(I)/Silver oxide 质量规格:分析标准品 包装;500g 金/金粉/金海绵/金海棉/Gold 质量规格:分析标准品,≥99.7%(GC 包装;100g 金丝/金/金海绵/金海棉/Gold 质量规格:分析标准品 包装;25g 铝镍合金/镍铝合金/罗兹镍合金/Aluminium-nickel 质量规格:分析标准品,98.5% 包装;5g 第威德合金/德瓦达合金/节瓦尔德合金/代伐达氏合金/铜锌铝合金/定氮合金/戴氏合金/第瓦尔德合金/Devarda's alloy 质量规格:分析标准品 包装;100g 伍德合金/铋铅锡镉合金/伍氏金/武德金/Wood’s metal 质量规格:分析标准品 包装;25g 溴化金/三溴化金/ Gold tribromide 质量规格:0.100mg/ml 包装;500g 氧化金/氧化高金/三氧化金/三氧化二金/氧化金(Ⅲ)/Gold oxide 质量规格:分析标准品,95% 包装;1g 2,5-二苯恶唑/2,5-二苯基恶唑/2,5-二苯基噁唑/2,5-二苯基-1,3-氧氮杂茂/2,5-二苯基唑/PPO 质量规格:100μg/ml,u=4% 包装;1g 尖孢镰刀菌PCR检测试剂盒植物病原Methylophaga│aminisulfidivorans 中文名称:噬甲基菌(加词待译)种属:Methylophaga│aminisulfidivorans分离基物:样/近海岸海提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:M750生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:96% Microbacterium│hatanonis 中文名称:波多野氏微杆菌种属:Microbacterium│hatanonis分离基物:其他/头发定型剂提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:;培养方法培养基:221生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:96% Erythrobacter│gaetbuli 中文名称:潮汐赤杆菌种属:Erythrobacter│gaetbuli分离基物:样/潮间带海sea water of the tidal flat提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:,用于系统分类分析。培养方法培养基:471生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Streptomyces│violascens 中文名称:浅紫链霉菌种属:Streptomyces│violascens分离基物:沉积物/深海沉积物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:抗菌/抗肿瘤活性研究培养方法培养基:1003生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Brevibacillus│sp. 中文名称:短芽胞杆菌种属:Brevibacillus│sp.分离基物:土壤/油污海沙提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:近海细菌培养方法培养基:33生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Chromohalobacter│salexigens 中文名称:需盐色盐杆菌种属:Chromohalobacter│salexigens分离基物:沉积物/深海沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:潜在石油烃类降解菌/生物活性物质筛选培养方法培养基:821生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Oceanicaulis│alexandrii 中文名称:亚历山大海洋柄菌种属:Oceanicaulis│alexandrii分离基物:样/上层海提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物质筛选;4.海洋微生物生态学研究。培养方法培养基:821生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Leifsonia│sp. 中文名称:雷夫松氏细菌种属:Leifsonia│sp.分离基物:沉积物/深海沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:1.海洋石油污染生物修复; 2.生物活性物质筛选培养方法培养基:821生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97% |