产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:肠道病毒组PCR检测试剂盒规格 英文名称:Enterovirus(EV)ARTPCR 编号:HE30948-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 葡聚糖T2000/葡聚糖D2000/右旋糖酐2000/Dextran T2000 质量规格:>98%,BR 包装;5g 聚蔗糖70/菲可70/蔗糖与环氧氯丙烷的聚合物/蔗糖与氯甲基环氧乙烷的聚合物/Ficoll70 质量规格:1mM,BC 包装;1g 聚蔗糖400/菲可400/蔗糖与环氧氯丙烷的聚合物/蔗糖与氯甲基环氧乙烷的聚合物/Ficoll400 质量规格:BC 包装;5g 细胞分离液/Percoll 质量规格:>98%,BR 包装;1g 淋巴细胞分离液/Lymphocyte separation medium 质量规格:>99%,BC 包装;10MG 人细胞分离液/Human cellular segregation 质量规格:>99%,BC 包装;100g 亲和硅烷/电泳玻璃板硅化处理试剂/Bind-Silane 质量规格:>99.8%,BR 包装;25g 疏硅烷/剥离硅烷/Repel-Silane 质量规格:>98%,BC 包装;500g 氯化铯/CSCl/Cesium Chloride 质量规格:>98%,BC 包装;5g 羟基磷灰石/羟磷灰石/骨粉/HAP 质量规格:BR 包装;100g 透析袋8DM,10MD/Dialysis tubing 8DM,10MD 质量规格:>98%,分子生物学级 包装;25g 透析袋27DM,34MD/Dialysis tubing 27DM,34MD 质量规格:>98% (HPLC),BC 包装;5g 透析袋20DM,25MD/Dialysis tubing 20DM,25MD 质量规格:BR 包装;25ml 透析袋36DM,44MD/Dialysis tubing 36DM,44MD 质量规格:BR 包装;5ml 透析袋17/8DM,77MD/Dialysis tubing 17/8DM,77MD 质量规格:>98%,BR 包装;1g 透析袋3000/Dialysis tubing 3000 质量规格:>98%,BC 包装;25g 透析袋3500/Dialysis tubing 3500 质量规格:>98%,BR 包装;5g 肠道病毒组PCR检测试剂盒规格 Salmonella│bloemfontein 中文名称:布隆方丹沙门氏菌种属:Salmonella│bloemfontein提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:6,7 b e,n,x,z42培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:98% Yersinia│aldovae 中文名称:阿氏耶尔森氏菌种属:Yersinia│aldovae提供形式:冻干物安全等级:3模式菌株:no培养方法培养基:CM0051生长条件:28℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:98% Yersinia│rohdei 中文名称:罗氏耶尔森氏菌种属:Yersinia│rohdei提供形式:冻干物安全等级:3模式菌株:no培养方法培养基:CM0051生长条件:28℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:98% Malleomyces│pseudomallei 中文名称:类鼻疽杆菌种属:Malleomyces│pseudomallei提供形式:冻干物安全等级:3模式菌株:no培养方法培养基:CM0116生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:96% Pseudomonas│pseudomallei 中文名称:类鼻疽假单胞菌种属:Pseudomonas│pseudomallei提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no培养方法培养基:CM0122生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:96% Listeria│monocytogenes 中文名称:单核细胞增生利斯特氏种属:Listeria│monocytogenes提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:2培养方法培养基:CM0110生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:99% Brucella│melitensis 中文名称:羊布氏菌种属:Brucella│melitensis提供形式:冻干物安全等级:3模式菌株:no应用领域:强毒株 羊1培养方法培养基:CM0112生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:99% Brucella│abortus 中文名称:牛布氏菌种属:Brucella│abortus提供形式:冻干物安全等级:3模式菌株:no应用领域:强毒株培养方法培养基:CM0112生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度:98% 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |