产品名称:箭毒蛙壶菌PCR检测试剂盒说明书 英文名称:Batrachochytrium dendrobatidisPCR 编号:HE30689-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 28S抗核糖体抗体试剂盒 质量规格:>99%,BP 包装;25g 26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;5g 25羟基维生素D3试剂盒 质量规格:>95%,BR 包装;1g 25羟基维生素D2试剂盒 质量规格:>50%,BS 包装;5g 20S蛋白酶体试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;100g 2,3-二磷酸甘油酸试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;25g 2,3Dinor血栓烷B2试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;5g 2 型次核苷酸脱氢酶试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;1g Ⅰ型前胶原羧基端肽试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;5g Ⅰ型前胶原N端前肽试剂盒 质量规格:BR 包装;5g Ⅰ型前胶原C末端肽试剂盒 质量规格:BR 包装;5g Ⅰ型胶原交联羧基末端肽试剂盒 质量规格:>98%,BR 包装;1g Ⅰ型胶原N末端肽试剂盒 质量规格:BR 包装;5g Ⅰ型胶原C端肽试剂盒 质量规格:铋含量:>56%,BR 包装;10ml Ⅰ型胶原试剂盒 质量规格:>99%,BR 包装;1g 1型1-磷酸鞘氨醇受体试剂盒 质量规格:>98%,植物激素级 包装;250mg 17-酮类固醇试剂盒 质量规格:BR 包装;25g 箭毒蛙壶菌PCR检测试剂盒说明书Sporolactobacillus inulinus 中文名称:菊糖芽孢乳杆菌种属:Sporolactobacillus inulinus分离基物:鸡饲料提供形式:冻干粉安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:、D-乳酸培养方法培养基:MRS培养基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸镁 0.2 g,乙酸钠 5.0 g,柠檬酸三铵 2.0 g,磷酸氢二钾 2.0 g,硫酸锰 0.05 g,吐温80 1.0 g,蒸馏 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。生长条件:37℃,厌氧 纯度:98% Calibacteriumchanglense=Rhodobacterchanglensis 中文名称:类红红细菌种属:Calibacteriumchanglense=Rhodobacterchanglensis安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:109生长条件:30℃ 纯度:98% Porphyromonas gingivalis 中文名称:牙龈卟啉单胞菌种属:Porphyromonas gingivalis分离基物:人类龈沟提供形式:冻干管,斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:,质量控制菌株培养方法培养基:TSA+5%脱纤维羊血:胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g,大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5.0g,氯化钠 5.0g,琼脂 15.0g,5%脱纤维羊血,pH7.3±0.2。121℃,15min。传代方法①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌或培养基:充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。生长条件:37℃,厌氧。存储条件:2-8℃冷藏 纯度:98% pyxidicoccusfallax 中文名称:匣状粘球菌种属:pyxidicoccusfallax安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:169生长条件:30℃ 纯度:98% CystobacterSP. 中文名称:孢囊杆菌种属:CystobacterSP.安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:169生长条件:30℃ 纯度:98% Corallococcusexiguous 中文名称:弱小珊瑚杆菌种属:Corallococcusexiguous安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:169生长条件:30℃ 纯度:98% Myxococcusxanthus 中文名称:黄色粘球菌种属:Myxococcusxanthus安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:169生长条件:30℃ 纯度:铱含量:43% Pseudomonasalcaligenes 中文名称:产碱假单胞菌种属:Pseudomonasalcaligenes分离基物:游泳池提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes培养方法培养基:CM0002;营养肉汁琼脂;蛋白胨5.0g,牛肉浸取物3.0g,NaCl5.0g,琼脂15.0g,蒸馏1.0L,pH7.0。[注]培养芽孢杆菌时加入5mgMnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。生长条件:30℃;好氧存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:铱含量:43% |