特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！ 产品名称 | 白垩立克次氏体探针法荧光PCR检测试剂盒 | 英文名称 | Rickettsia gravesii | 货号 | YSP97141 |
荧光染料的优点：
产品仅用于科研使用简便；
可以与任何PCR产物结合；
价格便宜；
荧光染料的缺点：
不能区分不同的双链DNA
引物二聚体会影响检测的敏感性
非特异性产物会影响结果的敏感性
引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别，进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。总的来说，SYBR Green I方法是一种基础也的Real-time qPCR实验手段。
荧光探针：
Real-e qPCR中的荧光探针为TaqMan探针，其基本原理是依据目的基因设计合成一个能够与之特异性杂交的探针，该探针的5'端标记荧光基团，3'端标记淬灭基团。
正常情况下两个基团的空间距离很近，荧光基因因淬灭而不能发出荧光。PCR扩增时，引物与该探针同时结合到模板上，探针的结合位置位于上下游引物之间。
当扩增延伸到探针结合的位置时，Taq酶利用5'外切酶活性，将探针5'端连接的荧光分子从探针上切割下来，从而使其发出荧光。检测到的荧光分子数与PCR产物的数量成正比，因此，根据PCR反应体系中的荧光强度即可计算出初始DNA模板的数量。
TaqMan探针技术解决了荧光染料与非特异性扩增结合的问题，反应结束后无需通过熔解曲线检测，缩短了实验时间。
TaqMan探针技术的优点：
荧光背景低；
敏感性高；
杂交稳定性高；
荧光光谱分辨率好；
特异性高。
TaqMan探针技术的缺点：
成本高；
设计难度大；
只能用于检测产物长度低于150bp的反应。
由于TaqMan探针的高特异性，可用于等位基因的辨别，特别适用于人类基因多态性以及根据SNP区别和定量菌株。
PCR技术的定量原理：
扩增曲线
在Real- qPCR中，对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号，随着反应的进行，监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线，即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。
在Real-time qPCR扩增早期，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化，此时即为基线期。
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的，随着反应循环数的增加，终PCR反应不再以指数形式生成模板，从而进入“平台期”。在该时期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系，所以根据终的PCR产物量不能计算出初始模板量。
荧光定量PCR原理：
产品仅用于科研荧光定量PCR早称TaqMan PCR，后来也叫Real-Time PCR，是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理：随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。
一般而言，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段，荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化。而在平台期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系，根据终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段， PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便，在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念：荧光阈值和 CT值。
谷胱甘肽过氧化酶8(GPX8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 噬几丁质菌属 100mg Paralemmin 3蛋白(PALM3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 湖泊黄杆菌 500mg 丝聚蛋白2(FLG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 侧孢短小芽胞杆菌 1g 脂质运载蛋白15(LCN15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 少根根霉 250mg 防御素β132(DEFβ132)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 拟土黄红菇 5g L-天冬氨酸脱氢酶(ASPDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 十字斯氏格孢 1g Clarin 2蛋白(CLRN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 美澳型核果褐腐病菌 25g 癌调蛋白2(OCM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 蓖麻炭疽刺盘孢菌 5g 双调蛋白B(AREGB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 漏斗状侧耳（凤尾菇） 1g 封闭蛋白24(CLDN24)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 大肠埃希菌 250mg 脂肪酸转移酶2(LIPT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 小环绵盘菌 5g RIO激酶2(RIOK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 郝氏链霉菌 1g 分拣连接蛋白7(SNX7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 德尔布有孢酵母 25g γ-谷氨酰基转氨酶3(γGT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 梨生囊壳孢菌 5g N-α-酰转移酶16(NαA16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 黑曲霉 1g 内酰胺酶β2(LACTβ2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 拟青霉 250mg 岩藻糖基转移酶10(FUT10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 巨大芽胞杆菌 1g 外核苷酸焦酸酶/酸二酯酶4(ENPP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 黄色毛霉 250mg
白垩立克次氏体探针法荧光PCR检测试剂盒酸化动力相关蛋白1抗体HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高迁移率族蛋白A1抗原500 ul DNA连接酶4抗体HMGA2 (high mobility group A2) 高迁移率族蛋白A2抗原100 ul 二肽基肽酶6抗体HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原1 Pack 二氢叶酸还原酶抗体HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原1 Pack 有丝分裂控制样蛋白DIS3L抗体HO-2(Heme oxygenase 2) 血红素氧合酶-2抗原100 ul 有丝分裂控制蛋白样DIS3L2抗体phospho-HP1/herochromatin proin 1 (pTyr24)(fruit fly) 异染色质蛋白1(酸化多肽)100 ul DOM3Z蛋白抗体phospho-herochromatin proin 1 (pTyr41)peptide 异染色质蛋白1（酸化多肽）20 ul 蓬乱蛋白2抗体HPV16-E6/E6 proin(Human papillomavirus type 16) 类头状瘤病毒16抗原3250 ul 酸化蓬乱蛋白2抗体HPV18 E6 类头状瘤病毒18抗原650 ul |
