产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:蟹特定基因序列PCR检测试剂盒说明书 规格:50T 编号:HE32081-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 克螨特溶液标准物质 1mL Allpaahuayo virus(ALLV)奥尔帕瓦约病毒RT-PCR试剂盒 硫线磷溶液标准物质 1mL Allpaahuayo virus(ALLV)奥尔帕瓦约病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 硫磷溶液标准物质 1mL Allpaahuayo virus(ALLV)奥尔帕瓦约病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 伐灭磷溶液标准物质 1mL Alrnaria spp.交链孢霉属通用PCR试剂盒 溶液标准物质 1mL Alrnaria spp.交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 线磷溶液标准物质 1mL Alrnaria spp.交链孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 吡菌磷溶液标准物质 1mL Amapari virus(AMAV)阿马帕里病毒RT-PCR试剂盒 二溴磷溶液标准物质 1mL Amapari virus(AMAV)阿马帕里病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 灭菌磷溶液标准物质 1mL Amidostomum anseri鹅裂口线虫PCR试剂盒 毒壤磷溶液标准物质 1mL Amidostomum anseri鹅裂口线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 谷硫磷溶液标准物质 1mL Amidostomum anseri鹅裂口线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 乙基谷硫磷溶液标准物质 1mL Amycolaptosis spp.拟无枝菌酸菌通用PCR试剂盒 乙基溴硫磷溶液标准物质 1mL Amycolaptosis spp.拟无枝菌酸菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 溴硫磷溶液标准物质 1mL Amycolaptosis spp.拟无枝菌酸菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 5-溴-2-脱氧尿苷/溴脲苷/5'-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷/5-溴去氧脲苷/溴尿苷/溴脲嘧啶苷/5-溴-2ˊ-脱氧尿核苷/5-溴尿嘧啶-2ˊ-脱氧核苷/5-溴脱氧尿苷/5-BrdU/BudR/BDUACS级,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,59-14-32~8℃ 5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名称: 5-溴-2-脱氧尿苷 其他名称: 溴脲苷;5'-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷;5-溴去氧脲苷;溴尿苷;溴脲嘧啶苷;5-溴-2ˊ-脱氧尿核苷;5-溴尿嘧啶-2ˊ-脱氧核苷;5-溴脱氧尿苷 英文名称: 5-BrdU 其他名称: BudR;BDU;5-Bromo-2-Deoxyuridine;2'-Deoxy-5-bromouridine 产品规格: ACS级,99% 包 装: 250毫克/1克 CAS号:59-14-3 C9H11BrN2O5=307.10 级别:ACS Grade 含量:≥99.0% 比旋光度:+23~+24º(C=1%,H2O) 水分:≤1.0% 性状:黄结晶或结晶粉末。熔点:191~194℃ 用途:生化研究。胸腺嘧啶类似物,在遗传学研究中用作诱变剂(mutagen),在细胞分裂的S-期选择性地插进DNA 保存:2~8℃ 蟹特定基因序列PCR检测试剂盒说明书G蛋白结合蛋白7抗体4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide别名: 分子式: C14H16N2O4S性状: Powder纯度: 99.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 绿色荧光蛋白抗体N-Acetyl-L-tyrosine别名: 分子式: C11H13NO4性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 绿色荧光蛋白抗体5-Aminofluorescein别名: 分子式: C20H13NO5性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: G蛋白通路抑制蛋白1抗体Allopurinol别名: 分子式: C5H4N4O性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 胶质细胞系源性神经营养因子受体α2抗体4-Acetylbiphenyl别名: 分子式: C14H12O性状: Powder纯度: 99.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 核突触蛋白-γ抗体N-Acetyl-m-toluidine别名: 分子式: C9H11NO性状: Powder纯度: 99.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子抗体Adipic dihydrazide别名: 分子式: C6H14N4O2性状: Powder纯度: 99.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 谷胱甘肽还原酶抗体2-Amino-6-chlorobenzothiazole别名: 分子式: C7H5ClN2S性状: Powder纯度: 99.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |