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埃希氏菌通用PCR检测试剂盒说明书

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产品型号:
50T
产品报价:
产品特点:
埃希氏菌通用PCR检测试剂盒说明书实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
  50T埃希氏菌通用PCR检测试剂盒说明书的详细资料:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

埃希氏菌通用PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 Escherichia spp.PCR

 货号

 HE30973-R

实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建


特点优势:
    1.   特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
    2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
    3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
碳酸环己胺/环己胺碳酸盐/CHC 质量规格:>97.0%(T) 包装;1g

1,1-二蒽醌亚胺/二蒽亚胺/1,1′-联蒽醌亚胺/1,1ˊ-亚氨基二蒽醌/1,1′-Dianthrimide 质量规格:>97.0%(T) 包装;25g

2,6-二氯醌-4-氯亚胺/2,6-二氯醌氯亚胺/2,6-双氯苯醌氯酰亚胺/2,6-二氯苯醌-4-氯酰亚胺/氯亚胺基二氯醌/2,6-二氯-4-(氯亚胺)-2,5-环己二烯-1-酮/2,6-二氯苯醌氯亚胺/二氯苯醌氯化亚铵/2,6-Dichloroquinone chlorimide 质量规格:>97.0%(T) 包装;5g

二氰二胺/氰胍/双氰胺/二聚氨基氰/二聚氰/二聚氰胺/氰基胍/二氰二氨/Dicyandiamide 质量规格:>97.0%(GC)(T) 包装;1g

二乙胺盐酸盐/盐酸二乙胺/盐酸氨基二乙烷/二乙基氯化铵/N-乙基乙胺盐酸盐/二乙胺氯化氢/Diethylamine hydrochloride 质量规格:>97.0%(T) 包装;5g

N,N-二乙基甲酰胺/二乙基甲酰胺/N,N-Diethylformamide 质量规格:>98.0%(GC)(T) 包装;1g

N,N-二甲基乙酰胺/乙酰二/二甲替乙酰胺/二甲基乙酰胺/DMAC/NBS 质量规格:>99.0%(GC) 包装;5g

盐酸盐/氨基甲烷盐酸盐/盐酸甲基胺/盐酸/一盐酸盐/盐酸一/Methylamine hydrochloride 质量规格:>98.0%(GC) 包装;100mg

/盐酸氨基二甲烷/盐酸二/N-甲基盐酸盐/Dimethylamine hydrochloride 质量规格:>98.0%(GC) 包装;50mg

二正辛胺/二辛基胺/N,N-二(甲基庚基)胺/双(α-辛基)胺/二正辛基胺/Di-n-octylamine 质量规格:>99.0%(GC) 包装;5g

二/氨基二苯/N-苯基/N,N-二/苯/二苯基胺/Diphenylamine 质量规格:>98.0%(GC) 包装;25g

二磺酸钡/(苯基氨基)苯磺酸钡盐/二磺酸钡/N-苯基对氨基苯磺酸钡盐/二-4-磺酸钡盐/磺酸二钡盐/4-二磺酸钡/Barium diphenylamine sulfonate 质量规格:>97.0%(GC) 包装;5g

二苯基联/N,N'-二苯基联/N,N-二苯对苯二氨基联苯/ N,N'-二苯基联苯二胺/N,N'-二苯对氨基联苯/N,N'-Diphenylbenzidine 质量规格:>97.0%(GC) 包装;25g

乙胺盐酸盐/乙基氯化铵/盐酸一乙胺/一乙胺盐酸盐/盐酸乙胺/氯化乙基氨/Ethylamine hydrochloride 质量规格:>98.0%(GC) 包装;5g

1,7-庚二胺/1,7-二氨基庚烷/七亚甲基二胺/庚亚甲基二胺/1,7-庚烷二胺/1,7-Diaminoheptane 质量规格:>95.0%(GC)(T) 包装;100mg

硫酸肼/硫酸联胺/肼硫酸盐/硫酸联氨/Hydrazine sulfate 质量规格:>95.0%(T) 包装;5MG

丙二酰胺/Malonamide 质量规格:>95.0%(GC) 包装;1g
埃希氏菌通用PCR检测试剂盒说明书Pseudogluconobacter│saccharoketogenes 中文名称:生糖酮假葡糖杆菌种属:Pseudogluconobacter│saccharoketogenes提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:537生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:97%

哺乳动物腺病毒属│3型(GB型) 中文名称:人腺病毒种属:哺乳动物腺病毒属│3型(GB型)分离基物:病料提供形式:冻存管安全等级:3模式菌株:yes应用领域:基础研究培养方法生长条件:37oC存储条件:-70 纯度:97%

Bacillus│azotoformans 中文名称:产氮芽孢杆菌种属:Bacillus│azotoformans分离基物:土壤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:可用于教学、生产培养方法培养基:33生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%

Acidithiobacillus│ferrooxidans 中文名称:亚铁氧化酸硫杆状菌种属:Acidithiobacillus│ferrooxidans分离基物:矿山酸性中提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:718生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%

Stenotrophomonas│maltophilia 中文名称:嗜麦芽窄食单胞菌种属:Stenotrophomonas│maltophilia分离基物:皮革提供形式:斜面培养物;冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:制革培养方法培养基:2生长条件:37℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥98%

Haemophilus│parasuis 中文名称:副猪嗜血杆菌种属:Haemophilus│parasuis分离基物:关节液提供形式:斜面培养物;冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:流行病学调查及疫苗制备研究培养方法培养基:451生长条件:37℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥98%

Monacrosporium│cionopagum 中文名称:柱捕单顶孢种属:Monacrosporium│cionopagum分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:18生长条件:25-28℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;矿物油法;定期移植法 纯度:98%

Actinomadura,madurae 中文名称:马杜拉放线菌种属:Actinomadura,madurae安全等级:3模式菌株:未知培养方法生长条件:28℃ 纯度:97%

 

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